本文使用岛津LCMS-QTOF联用系统,建立了一种mRNA药物加帽分析的方法。在高温条件下,使用聚合物基质反相色谱柱对5´-加帽序列,生物素标记探针等进行分离,并通过LCMS-9050四极杆飞行时间质谱对色谱峰进行鉴定。在260nm下计算各色谱峰的峰面积,单点外标法定量。该方法可用于mRNA药物加帽率的研究。
基于岛津LCMS-QTOF联用系统,建立了一种mRNA加帽的质谱分析方法。核酸电负性强,本方法采用三乙胺离子对试剂,实现在反相模式分离,流动相中添加六氟异丙醇,促进了核酸在负模式下的电离,对酶解后的mRNA片段进行分离和检测,并分别采用紫外和质谱的数据进行了色谱定性和质谱多电荷解卷积分析,两种工艺的加帽样品均能准确定性Cap1、Cap probe,以合成的AGG-38nt-Cap为标准,单点外标法计算Cap1含量,391-s2和409-s2中Cap1浓度分别为1.53 μM、1.72 μM,表明两种工艺加帽效率相当。该方法可用于mRNA加帽效率评估,也可供寡核苷酸质量控制提供参考。
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岛津企业管理(中国)有限公司为您提供《LCMS-QTOF用于mRNA药物加帽的分析》,该方案主要用于生物药品药物研发中含量测定检测,参考标准--,《LCMS-QTOF用于mRNA药物加帽的分析》用到的仪器有岛津 Nexera LC-40 液相色谱仪