人转化生长因子Β2(TGFΒ2)ELISA试剂盒操作步骤

中文别名:人转化生长因子Β2(TGFΒ2)ELISA试剂盒 英文名称:Human transforming growth factors β2, TGFβ2 Elisa Kit特异性：可检测样本中的人转化生长因子β2，且与其类似物无明显交叉反应。 种属： 人保存温度： 2-8℃样本类型： 血清、血浆、组织匀浆、细胞培养上清 和 其他生物液体 背景：转化生长因子β2(TGF-β2)前体蛋白由19个氨基酸的信号肽、283个氨基酸的前区和112个氨基酸的成熟区组成。人TGF-β2成熟区与人TGF-β1和TGF-β3的同源性分别为71%和80%，与小鼠TGF-β2的同源性为97%。它可由各类细胞表达，包括破骨细胞、胸腺上皮细胞、角蛋白细胞、肝细胞、胃的主细胞和卫星细胞等。TGF-β2具有显著的种属交叉生物活性，如人TGF-β2对小鼠细胞具有活性，而猪TGF-β2对兔细胞具有活性等。TGF-β2具有4种基本活性：是大部分类型细胞的生长抑制因子；可增强细胞外基质的沉积；具有免疫抑制作用，抑制抗原递呈细胞表达IL-12和CD40L，上调IL-10分泌；在胚胎发育期表达于离散区域，如上皮、心肌、手足的软骨和骨骼、以及神经系统，提示其具有特异性的功能。工作原理：本试剂盒采用的是双抗体夹心法酶联免疫吸附检测技术（ELISA）。测定样品中人转化生长因子β2水平。向预先包被了抗人转化生长因子β2抗体的酶标孔中，加入标准品和样本，温育后，加入生物素标记的抗转化生长因子β2抗体。再与HRP标记的链霉亲和素结合，形成免疫复合物，再经过温育和洗涤，去除未结合的酶，然后加入显色底物TMB，产生蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。最后，在450 nm处测定反应孔样品吸光度（OD）值，样本中的人转化生长因子β2浓度与OD值成正比，通过绘制标准曲线计算出样本中人转化生长因子β2的浓度。 产品描述试剂名称    数量    试剂名称    数量96孔板(预包被)    1    96孔板覆膜    2标准品    2    稀释液    1×45mL检测溶液A    1×120μL    检测溶液B    1×120μLTMB底物    1×9mL    终止液    1×6mL浓洗涤液(30×)    1×20mL    使用说明书    1需自备的设备及试剂450±10nm滤光片的酶标仪(建议仪器使用前提前预热)单道或多道微量加液器及吸头稀释样品的EP管蒸馏水或去离子水吸水纸盛放洗液的容器试剂盒的储存及有效期未开封的试剂盒：所有试剂均按试剂瓶标签上所示保存。请注意，收到试剂盒后请尽快将TMB 洗涤液，终止液保存于4℃，其他试剂保存于-20℃。使用后的试剂盒：剩余试剂仍需按照试剂瓶标签所示的温度保存，开封后的酶标板要加干燥剂后密封保存于-20℃，避免潮湿。稳定性 经测定，试剂盒在有效期内按推荐温度保存，其活性降低率小于5%。为减小外部因素对试剂盒破坏前后检测值的影响，实验室的环境条件需尽量保持一致，尤其是实验室内温度、湿度及温育条件。其次由同一实验员来进行操作可减少人为误差。注意：试剂盒内酶标条可拆卸，按实验需求可分多次使用；使用后的剩余试剂盒建议在首次实验后 1个月内使用完毕。产品过期时间以盒子上的标签为准，保质期内所有组分都确保是稳定的。