酶底物法检测在环境应急监测中的应用

　　粪大肠菌群作为水质污染的重要指标之一，也是作为环境质量标准和排放标准中不可缺少的控制指标之一。快速、准确地检测水中粪大肠菌群，对于突发性水环境污染事件中水体粪便污染评价，以及采取的应急措施和生活用水的安全显得尤为重要。　　接下来，我们就和大家说说酶底物法在环境应急监测中的应用。　　应急监测指的是突发环境事件发生后，对污染物种类、浓度和污染范围进行的及时监测。目前在国内已颁布的相关标准中，粪大肠菌群检测多用于经典方法多管发酵法和滤膜法，但是这两种方法相对来说，操作繁琐，而且需要48h~72h才能获得结果，难以满足突发行环境污染事故监测及时、准确的要求。酶底物法作为一种新型的检测方法，在2003年从美国引入到我国，用于大肠菌群的检测。　　酶底物法检测仪器主要用于51孔定量盘和97孔定量盘的薄膜封口，与微生物检测试剂配合使用，需要配合水中大肠杆菌检测试剂来使用，无需培养基制备和大量玻璃器皿灭菌，插电即用，预热时间仅3分钟，即可操作，24h即可完成定性定量分析，无需验证试验，为环境应急监测中总大肠菌群、大肠杆菌、粪大肠菌群等的定量检测提供简单、快速、准确的实验方案。　　目前，酶底物法检测法在国外已有90%的实验室在使用，而且使用率都高于其他的检测方法。在我国该方法也在日益普及，改方法已经被列入《生活饮用水卫生标准》（GB5749-2006）检测水中总大肠菌群的标准方法。那么，酶底物法检测在环境应急监测中使用还应当注意以下几点，以确保准确、快速的检测。　　1、样品均匀性　　在进行水样监测前，水样需摇匀，并尽快与培养基结合，否则可能会导致结果差异性很大，影响其稳定性。　　2、稀释比的合理性　　经研究发现，水样稀释倍数越高，酶底物法的测定值越偏低，所以在检测的过程中，需要根据具体情况对水样做小倍数的稀释，这样会使得结果更加准确、快速。　　3、培养温度的恒定性　　在培养的过程中需要注意温度的控制，样品在培养箱中于44.5℃培养，误差控制在±0.5℃，温度偏高或偏低都直接影响检测结果。　　酶底物法检测方法，无论是从时间、环境要求还是定量方法，用起来都是非常方便的，而且它也不需要专业的人士，只需要培训以下就可以。方法操作简便，检测周期短，能够准确判断水样受粪便污染状况，也更加符合突发性环境应急监测实时、快速、准确的要求，并且将得到更为广泛和标准化的应用。