聚乙二醇及单、二聚乙二醇化的治疗性蛋白中分离分析检测方案(二手分析仪器)

液相色谱/质谱 (LC/MS) 技术在蛋白质表 征方面功能强大、灵敏度高。在蛋白质药 物的监管审批中，采用 LC/MS 方法来进 行定性和定量分析。聚乙二醇化是生物制 药业中一种重要的共价修饰方法，可提高 蛋白的治疗功效。1 聚乙二醇化过程指的 是聚乙二醇与治疗性蛋白的化学结合。这 种修饰可以增加蛋白药物的半衰期。但由 于聚乙二醇分子本身的异质性，聚乙二醇 化修饰可导致产品的异质性。因此，在产 品发布前分析聚乙二醇试剂及聚乙二醇化 蛋白药物非常重要。本研究中，我们通过 联用 Agilent 1260 Infinity LC 及 Agilent 6520 Q-TOF 质谱仪对完整的聚乙二醇化治 疗性蛋白样品和聚乙二醇试剂进行分析。 聚乙二醇和聚乙二醇化蛋白从 HPLC 分离 及洗脱出来，而电荷剥离剂三乙胺 (TEA) 由一个注射泵通过三通接头导入，如图 1 所示。2,3 作为一个电荷降低试剂，TEA 在进入质谱仪前与聚乙二醇化蛋白样品混 合。胺类化合物的添加可改善质谱图，有 助于结果解释。结果表明所研究的聚乙二 醇化治疗性蛋白与聚乙二醇试剂一样，都 具有异质性。聚乙二醇化后，完整蛋白分 析显示出多重峰，每个峰之间的质量偏移 约为 44 Da，为乙二醇的质量。