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文
本应用简报介绍了采用 Agilent 1260 Infinity 生物惰性四元液相色谱系统进行单克隆抗
体肽图分析的应用解决方案,并证明了其可靠性。该仪器具有生物惰性和耐腐蚀性,再
结合简单且重现性好的方法,使得该解决方案尤其适用于生物制药行业中单克隆抗体的
QA/QC 分析。为了获得更高的分离度和检测灵敏度,我们将方法转移到 Agilent 1290
Infinity 液相色谱系统上,并使用了亚 2 μm 粒径色谱柱。1290 Infinity 液相色谱系统卓
越的性能范围(压力与流速)克服了由于使用较小粒径填料和较长色谱柱导致背压上升
的挑战,使该系统成为高分离度和高灵敏度分析应用的理想选择。
肽图分析是研究蛋白质一级结构的一项基
本技术。对于重组蛋白质药物,肽图分
析用于最初的“结构证明”表征,即确
认预期氨基酸序列的表达并表征任何翻译
后修饰。此外,肽图分析还被用于随后
产品的批间一致性测试(即“指纹图分
析”),以支持其生物工艺开发和临床
试验。肽图分析也可用作当前监测重组细
胞系“遗传稳定性”的方法。最近,新
的技术平台使肽图分析方法变的更加快速
和便捷,从而拓展到过程监控及其它更高
样品量的应用中1
。
为了进行蛋白质表征,需要对复杂的蛋白
质裂解产物进行色谱分离,这是一项严峻
的挑战。这里,我们展示了使用 Agilent
1260 Infinity 生物惰性四元液相色谱系统,
以及 Agilent Poroshell 120 SB C18,4.6 ×
150 mm,2.7 µm 色谱柱分离 IgG1 单克
隆抗体胰蛋白酶裂解多肽的优势。本文介
绍了使用 1260 Infinity 生物惰性四元液相
色谱系统,验证胰蛋白酶裂解 IgG1 肽图
的优化 RP-HPLC 方法及其稳定性。为进
一步提高方法性能,我们将方法转移到配
备了 Agilent ZORBAX RRHD SB C18,
2.1 × 150 mm,1.8 µm 色谱柱的 1290
Infinity 液相色谱系统上。使用亚 2 µm 颗
粒填料的超高效液相色谱 (UHPLC) 分离,
改善了单位时间内的分离度和检测灵敏
度,缩短了运行时间,并使肽图分析变得
更加简便。最后,将两根 RRHD 色谱柱
串联使用,以评估更长亚 2 µm 颗粒色谱
柱的肽图分析性能。
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天津市普伦科技开发有限公司为您提供《单克隆抗体中高分离度肽图分析检测方案(二手分析仪器)》,该方案主要用于治疗类生物药品中含量测定检测,参考标准--,《单克隆抗体中高分离度肽图分析检测方案(二手分析仪器)》用到的仪器有二手翻新安捷伦1260液相色谱仪