水质中9种烷基酚类化合物和双酚A检测方案(液相色谱仪)

SSL-CA22-245Excellence in Science Excellence in ScienceLC-312 岛津企业管理(中国)有限公司-分析中心Shimadzu (China) Co.， LTD.-Analytical Applications CenterTel：86(21)34193996Email： sshzyan@shimadzu.com.cnhttp：//www.shimadzu.com.cn 水质中9种烷基酚类化合物和双酚A的测定-固相萃取/高效液相色谱法量 LC-312 摘要：本文利用高效液相色谱仪，建立了一种水质中9种烷基酚类化合物和双酚A的测定方法。本方法参考《HJ1192-2021水质9种烷基酚类化合物和双酚A的测定固相萃取/高效液相色谱法》，以以标法定量，双酚A、4-叔丁基苯酚、4-丁基苯酚、4-戊基苯酚、4-己基苯酚、4-叔辛基苯酚、4-庚基苯酚、4-支链壬基酚、4-辛基苯酚、4-壬基酚在20~1000 ug/L浓度范围内各组分线性关系良好，各组分相关系数均达到 0.9999以以，方法检出限为 0.05 ug/L， 方法定量限为 0.1 ug/L。对高中低三个水平的混合标准溶液连续进样6次，保留时间和峰面积重复性良好。加标回收实验中，各组分回收及精密度良好。该方法简单方便，能有效检测水质中9种烷基酚类化合物和双酚A的含量。 关键词：高效液相色谱仪烷基酚 双酚A 水质 固相萃取 目前，国际上高度重视环境激素产生的危害，环境激素又称“环境荷尔蒙”，是外源性内分泌化学物质，环境激素主要含有烷基酚类化合物、双酚A等。这些环境激素主要来源于农业种的除草剂、杀虫剂，生活中的塑料增塑剂及各种塑料制品、洗涤剂、化妆品材料还有化工生产中的原料。烷基酚类化合物是环境激素种常见的一种，其对环境和动植物及人类都有较大的影响。 本法采用 HLB固相萃取柱在酸性条件下进行富集、净化，用甲醇和二氯甲烷洗脱，浓缩后使用具有荧光检测器的高效液相色谱仪测定，具有操作简单，效率高，重现性好等特点。 本文利用 Nexera XR高效液相色谱仪，通过固相萃取法，建立了水质中9种烷基酚化合物和双酚A的检测方法，供检测人员参考。 实验部分 1.1仪器 本实验使用岛津 Nexera XR高效液相色谱仪。具体配置为： 系统控制器：CBM-20A自动进样器： SIL-20AC XR柱温箱：CTO-20AC输液泵： LC-20ADXR脱气机： DGU-20A检测器： RF-20ARXR 色谱工作站： LabSolutions Ver. 6.102 1.2分析条件 液相色谱条件： 色谱柱：Shim-pack Scepter C18-120 ，5 um 250× 4.6mm I.D.岛津(上海)实验器材有限公司P/N：227-31020-06 流动相A：水B：乙腈 流速：1.0 mL/min柱温：40℃进样体积：50uL洗脱方式：梯度洗脱激发波长：227nm发射波长：315nm梯度洗脱： 表1 梯度洗脱程序 时间(min) A相(水) B相(乙腈) 0 50% 50% 15 40% 60% 35 16% 84% 40 10% 90% 41 50% 50% 45 50% 50% 1.3标准溶液的配置 将10 ug/mL的双酚A和9种烷基酚类化合物混合标准溶液，用乙腈逐级稀释，配制成浓度为20 ug/L、50ug/L、100 ug/L、500 ug/L、1000 ug/L 的混合标准工作溶液，待上机分析。 1.4样品前处理方法 依次用10mL正己烷、10mL二氯甲烷、10mL甲醇和10mL实验用水活化250 mg/6mL的HLB固相萃取柱，将样品以3 mL/min~5 mL/min 的流速通过固相萃取柱。上样结束后，用10mL甲醇淋洗固相萃取柱，去除固相萃取柱上的杂质，然后用氮气吹干，再以2 mL/min~4 mL/min的流速，分别用2mL甲醇和5mL二氯甲烷洗脱，收集洗脱液，浓缩至1mL以下，加入3mL乙腈，再浓缩至约0.5 mL， 用乙腈定容至1mL，过膜后待侧定。 结果与讨论 2.1标准溶液色谱图 图19种烷基酚类化合物和双酚A标准溶液色谱图 (1000 ug/L) (1.双酚A；2.4-叔丁基苯酚；3.4-丁基苯酚；4.4-戊基苯酚；5.4-己基苯酚； 6.4-叔辛基苯酚；7.4-庚基苯酚；8.4-支链壬基酚；9.4-辛基苯酚；10.4-壬基酚) 表29 种烷基酚类化合物和双酚A信息 No. 化合物 英文名称 CAS号 保留时间(min) 双酚A BisphenolA 80-05-7 7.11 2 4-叔丁基苯酚 4-tert-Butylphenol 98-54-4 11.41 3 4-丁基苯酚 4-Butylphenol 1638-22-8 13.55 4 4-戊基苯酚 4-Pentylphenol 14938-35-3 17.84 5 4-己基苯酚 4-hexylphenol 2446-69-7 22.49 6 4-叔辛基苯酚 4-tert-Octylphenol 140-66-9 25.19 4-庚基苯酚 4-heptylphenol 1987-50-4 26.96 8 4-支链壬基酚 4-nonylphenol 84852-15-3 30.20 9 4-辛基苯酚 4-octylphenol 1806-26-4 31.16 10 4-壬基酚 4-n-nonylphenol 104-40-5 35.06 2.2线性范围 按照1.3配制成各浓度标准溶液，以各目标物浓度为横坐标，目标物峰面积为纵坐标，以外标法绘制标准曲线，所得校准曲线线性关系良好，线性相关系数大于0.9999。曲线结果如下图、线性方程及相关系数如下表3所示。 面积 面 面积 序号 名称 校准曲线 相关系数r 精确度(%) 检测限(ug/L) 定量限 灵((ug/L) 1 双酚A Y=6074.48*x+1321.82 0.9999 95.8-108.0 0.05 0.10 2 4-叔丁基苯酚 Y=4518.10*x+23.3389 0.9999 96.6-109.0 0.05 0.10 3 4-丁基苯酚 Y=5804.77*x+2476.76 0.9999 97.0-108.4 0.05 0.10 4 4-戊基苯酚 Y=5526.24*x+8300.25 0.9999 95.0-110.0 0.05 0.10 5 4-己基苯酚 Y=5364.62*x+241.743 0.9999 96.7-105.5 0.05 0.10 6 4-叔辛基苯酚 Y=4678.09*x-681.655 0.9999 96.8-108.9 0.05 0.10 7 4-庚基苯酚 Y=5070.84*x-5500.85 0.9999 96.7-107.9 0.05 0.10 8 4-支链壬基酚 Y=2655.86*x-9855.04 0.9999 92.5-108.3 0.05 0.10 9 4-辛基苯酚 Y=5017.82*x-2257.09 0.9999 96.5-108.0 0.05 0.10 10 4-壬基酚 Y=4630.69*x-559.952 0.9999 96.3-108.3 0.05 0.10 2.3重复性考察 按照1.3步骤配制低、中、高三个浓度标准溶液，连续进样6次，考察分析方法保留时间和峰面积的重复性。结果表明：各组分保留时间的 RSD%均小于1.0%，峰面积的 RSD% 均小于10.0%，方法重复性良好，仪器精密度良好。结果见表4。 表4重复性测试 序号 名称 RSD%(20pg/L) RSD% (100ug/L) RSD% (500 ug/L) R.T. Area R.T. Area R.T. Area 1 双酚 A 0.049 0.84 0.047 1.05 0.028 1.06 2 4-叔丁基苯酚 0.058 1.18 0.038 0.82 0.027 0.42 3 4-丁基苯酚 0.047 1.45 0.039 0.75 0.021 0.34 4 4-戊基苯酚 0.033 5.09 0.040 1.04 0.018 0.57 5 4-己基苯酚 0.028 0.54 0.035 0.59 0.018 0.57 6 4-叔辛基苯酚 0.026 1.90 0.030 0.86 0.017 0.64 7 4-庚基苯酚 0.024 0.97 0.025 0.81 0.015 0.80 8 4-支链壬基酚 0.020 3.83 0.016 1.17 0.007 0.88 9 4-辛基苯酚 0.019 0.48 0.013 1.01 0.005 0.93 10 4-壬基酚 0.006 0.57 0.005 1.09 0.005 0.98 2.4加标回收实验 按照1.4步骤中制备样品和加标样品，三个水平加标浓度如下表5所示。测试结果显示：各水平的加标回收率在95.0~101.3%之间，相对标准偏差 RSD%在0.50~6.63%之间。 表5样品加标实验结果 序号 名称 样品浓度 加标 (20 ug/L) 加标(100ug/L) 加标(500ug/L) (ug/L) 回收率% RSD% 回收率% RSD% 回收率% RSD% 1 双酚A N.D. 99.6 0.84 101.1 5.97 100.9 0.77 2 4-叔丁基苯酚 N.D. 99.1 1.08 101.2 6.70 100.6 0.69 3 4-丁基苯酚 N.D. 99.8 0.63 101.1 6.27 100.6 0.64 4 4-戊基苯酚 N.D. 95.0 6.63 101.5 7.38 100.7 0.78 5 4-己基苯酚 N.D. 99.1 2.23 100.2 4.69 100.6 0.76 6 4-叔辛基苯酚 N.D. 100.3 1.59 101.3 6.58 100.7 0.75 7 4-庚基苯酚 N.D. 100.6 0.89 101.0 5.97 100.9 0.74 8 4-支链壬基酚 N.D. 96.1 3.30 100.9 6.40 100.8 0.71 9 4-辛基苯酚 N.D. 100.0 0.81 101.2 5.84 101.0 0.59 10 4-壬基酚 N.D. 100.3 0.50 101.3 5.97 101.0 0.61 说明： N.D.--测试值低于方法检测限 结论 本文利用岛津LC-20AD XR高效液相色谱仪，建立一种简便、快速、准确检测水质中9种烷基酚类化合物和双酚A的分析方法。该方法采用外标法定量，各组分在20~1000 ug/L浓度范围内线性关系良好，各组分相关系数均达到0.9999以上，方法检出限为 0.05 ug/L， 方法定量限为0.10 ug/L。对 100 ug/L的标准溶液重复进样6针，保留时间和峰面积重复性良好。加标回收实验中，各物质回收率在95.0~101.3%之间，回收及精密度良好。该方法操作简捷，为水质中9种烷基酚化合物和双双A的检测提供很好的参考。 岛津应用云 本文利用岛津LC-20AD XR高效液相色谱仪，建立一种简便、快速、准确检测水质中9种烷基酚类化合物和双酚A的分析方法。该方法采用外标法定量，各组分在20~1000 µg/L浓度范围内线性关系良好，各组分相关系数均达到0.9999以上，方法检出限为0.05 μg/L，方法定量限为0.10 μg/L。对100 μg/L的标准溶液重复进样6针，保留时间和峰面积重复性良好。加标回收实验中，各物质回收率在95.0~ 101.3%之间，回收及精密度良好。该方法操作简捷，为水质中9种烷基酚化合物和双酚A的检测提供很好的参考。