玉米中伏马毒素检测方案(旋涡混合器)

真菌毒素www.biocomma.cn 155 《GB 5009.240-2016食品安全国家标准食品中伏马毒素的测定》 一、样品提取 准确角取经粉碎的玉米样品5.0 g(精确至0.01g) 于50mL离心管中，加入20ml乙腈/水溶液(50：50，v/v)，涡旋20 min，超声振荡10 min，4000 r/min离8 min， 移取8mL上清液，加入22mL吐温 -20/PBS溶液，混合均匀后，经玻璃纤维滤纸过滤。 一、样品净化 准确移取上述滤液15 mL过免疫亲和柱(货号：)，流速控制在1~2滴/秒，用10mLPBS缓冲液淋洗免疫亲和柱，弃去全部流出液，抽干小柱。用2mL甲醇-乙酸溶液(98+2)进行洗脱，关阀门静置2-3 min 再收集流出液。将收集的洗脱液于45℃氮吹至近干，加2mL 30%乙腈水溶解残渣。涡旋 30 s， 过0.22 Hm尼龙滤膜供上机测试。 三、仪器条件 仪器： UPLC-MS/MS (Thermo Fisher TQS IEndura) 色谱柱： CommaSil@ ODS (2.1 mm×100mm， 3 Hm) 流动相：A：水(0.1%甲酸) B：乙腈(0.1%甲酸) 洗脱方式：梯度洗脱，见表1 表1梯度洗脱程序 时间/min A/% B/% 0 70 30 0.50 70 30 4.00 40 60 4.50 0 100 4.80 0 100 5.10 70 30 订购信息 流速：0.35 mL/min 柱温：30℃ 进样量：8L 质谱条件 离子源：HESI 电喷雾电压：3500V 鞘气压力：38 arb 辅气压力：8 arb 离子传输管：300℃ 辅气温度：350℃ 表2组分名称、保留时间及特征离子一览表(*为定量离子) 名称 保留时间/min 母离子 子离子 FB2 2.97 706 336.26*，318.28 FB3 2.63 706 336.26*，318.28 四、实验结果 表3食品中伏马毒素加标回收实验结果 目标物 加标浓度 Hg/kg 回收率(%) 平均回收率 RSD(%) 1 2 3 (%) FB2 80.0 97.5 97.5 102 99.0 2.60 FB3 80.0 89.5 91.4 100 93.6 5.59 标曲配制：用初始流动相配制 415381. MS 图1添加水平为80 Hg/kg 的伏马毒素色谱图 货号 描述 包装 COAFT2103 Copure@伏马毒素免疫亲和柱，3mL 50支/盒 CS2150180DS CommaSile ODS 色谱柱， 2.1 mm×100mm， 3 Hm 1根/盒 BC-1000 biocomma@多管涡旋混习仪 1台/箱 SF130-22-NL 尼龙针式过滤器，直径13 mm， 孔径0.22 Hm， 有机系 100个/盒 SC2-1 2 mL 蓝色聚丙烯盖，白色PTFE/红色硅胶垫，9-425 100个/盒 V2-AL 2mL 螺纹棕色样品瓶，带书写处11.6*32 mm， 9-425 100个/盒 样品提取准确称取经粉碎的玉米样品5.0 g(精确至0.01g)于50mL离心管中，加入20ml乙腈/水溶液（50:50,v/v)，涡旋20 min,超声振荡10 min,4000 r/min离8 min，移取8 mL上清液，加入22mL吐温-20/PBS溶液，混合均匀后，经玻璃纤维滤纸过滤。样品净化准确移取上述滤液15 mL过伏马毒素免疫亲和柱（货号：COAFFB103），流速控制在1~2滴/秒，用10 mLPBS缓冲液淋洗免疫亲和柱，弃去全部流出液，抽干小柱。用2 mL甲醇-乙酸溶液（98+2）进行洗脱，关阀门静置2-3 min再收集流出液。将收集的洗脱液于45 ℃氮吹至近干，加2 mL 30 %乙腈水溶解残渣。涡旋30 s，过0.22 μm尼龙滤膜供上机测试。仪器条件仪器：UPLC-MS/MS（Thermo Fisher TQS Endura）色谱柱：CommaSil® ODS (2.1 mm×100 mm，3 μm)流动相：A：水（0.1%甲酸）  B：乙腈（0.1%甲酸）洗脱方式：梯度洗脱，见表1表1 梯度洗脱程序流速：0.35 mL/min柱温：30 ℃进样量：8 μL质谱条件离子源：HESI            电喷雾电压：3500 V鞘气压力：38 arb         辅气压力：8 arb离子传输管：300 ℃      辅气温度：350 ℃表2 组分名称、保留时间及特征离子一览表（*为定量离子）实验结果表3  食品中伏马毒素加标回收实验结果标曲配制：用初始流动相配制订购信息