奶粉中双酚A检测方案(旋涡混合器)

食品添加剂/污染物141www.biocomma.cn 奶粉中双酚A的 HPLC测定 一、样品提取 准确称取奶粉样品2.0g(精确至0.01g)于50 mL玻璃试管中，加入10 mL乙腈 (HPLC级)，涡旋3 min， 50℃超声提取15 min， 12000 r/min离心5 min， 取上清液于一干净的玻璃试管中，残留部分按上述操作重复提取一遍，合并乙腈相，混匀后取10 mL于50℃氮吹近干，以10%甲醇-水溶液(V/V)复溶，待净化。 图2婴儿二段奶粉的双酚A色谱图 二、样品净化 净化小柱： HLB， 200mg， 6mL(玻璃柱)。 先以5 mL甲醇和5mL水活化固相萃取小柱，上待净化液，待样液流出后以6 mL 10%甲醇-水溶液(V/V)分两次淋洗小柱，待淋洗液全部流出后抽干小柱，用5 mL 10%乙酸乙酯-甲醇溶液(V/V)洗脱，收集全部洗脱液，50℃氮吹近干，以1 mL 75%甲醇-水溶液(V/V)复溶，离心取上清液，待上机。 三、仪器条件 仪器： UltiMate 3000 (Thermofisher Scientific)，配DAD 检测器 图3婴儿二段奶粉添加浓度为0.5 mg/kg 的双酚A色谱图 色谱谱：Copure@ C18 (4.6 mm×250)mm， 5 Hm) 流动相：甲醇/水=75/25(V/V) 流速：1mL/min柱温：30℃ 进样量：10匹L 检测波皮：224nm 四、实验结果 表1奶粉中双酚A加标回收实验结果 样品 加标水平(mg/kg) 平均回收率(%) RSD(%，n=3) 婴儿二段奶粉 0.500 99.58 4.91 2.00 93.25 3.22 5.00 92.47 3.99 高钙低脂高蛋白奶粉 0.500 103.8 3.59 2.00 94. 13 4.20 5.00 96.02 4.33 图4高钙低脂高蛋白奶粉的双酚A色谱图 图5高钙低脂高蛋白奶粉添加浓度为0.5 mg/kg 的双酚A色谱图 图1浓度为 0.5 mg/L的双酚A标物色谱图 订购信息 货号 描述 包装 COHLB6200-BL Copure@ HLB 玻璃柱， 200 mg， 6mL 30支/盒 CS46250DS Copure @ ODS 色谱柱， 4.6 mm×250mm， 5 Hm 1根/盒 SDC-3000 多管涡旋混匀仪 1台/箱 SC2-1 2mL蓝色聚丙烯盖，白色PTFE/红色硅胶垫，9-425 100个/盒 一、样品提取 准确称取奶粉样品 2.0 g( 精确至 0.01g) 于 50 mL 玻璃试 管中，加入 10 mL 乙腈（HPLC 级），涡旋 3 min，50℃超 声提取 15 min，12000 r/min 离心 5 min，取上清液于一 干净的玻璃试管中，残留部分按上述操作重复提取一遍， 合并乙腈相，混匀后取 10 mL 于 50℃氮吹近干，以 10% 甲醇 - 水溶液（V/V）复溶，待净化。 二、样品净化 净化小柱：HLB，200mg，6 mL（玻璃柱）。 先以 5 mL 甲醇和 5 mL 水活化固相萃取小柱，上待净化液， 待样液流出后以 6 mL 10% 甲醇 - 水溶液（V/V）分两次淋 洗小柱，待淋洗液全部流出后抽干小柱，用 5 mL 10% 乙酸 乙酯 - 甲醇溶液（V/V）洗脱，收集全部洗脱液，50℃氮吹 近干，以 1 mL 75% 甲醇 - 水溶液（V/V）复溶，离心取上 清液，待上机。 三、仪器条件 仪器：UltiMate 3000（Thermofisher Scientific），配 DAD 检测器 色谱柱：Copure® C18 (4.6 mm×250 mm，5 µm) 流动相：甲醇 / 水 =75/25（V/V） 流速：1 mL/min 柱温：30℃ 进样量：10 µL 检测波长：224 nm 四、实验结果