婴儿配方乳粉中高氯酸盐，氯酸盐检测方案(液相色谱仪)

「应用纪要WatersTHE SCIENCE OF WHAT'S POSSIBLE. 「应用纪要1 Waters Torus DEA色谱柱用于婴幼儿配方乳粉中高氯酸盐和氯酸盐的UPLC-MS/MS测定的解决方案 仇雯荔，袁汉成，田雪飞，贺章静 实验方案 样品制备 (参考<食品中氯酸盐和高氯酸盐的测 定-BJS201706>方法) 提取 准确角取1g(精确至0.001g)试样置于50mL具塞离心管中，加入混合同位素内标液，准确加入5.0mL0.1%甲酸水溶液，迅速混匀，置于水浴超声20 min， 涡旋振荡5 min， 再准确加入10.0mL乙腈，混匀，于水浴超声10 min， 10000r/min常温离心10 min， 静置30 min后取上清液待净化。 净化 吸取约3.0mL上述离心上清液，过PRIMEHLB(P/N：186008057)固相萃取柱，收集续滤液后，过0.2umGHP滤膜(WAT097962)，装入2mL样品瓶(溶液澄清)，供液相色谱-串联质谱仪测定用。 本实验采用Torus DEA色谱柱来分析婴幼儿配方乳粉中高氯盐盐和氯酸盐的含量，将标准BJS201706方法中用到的甲醇提取液换成了乙乙后，过PRIMEHLB固相萃取柱后，得到了更好的净化效果，同时也满足该方法中关于灵敏度，准确度及重现性的要求。 项目背景 用户反映按照BJS201706方法推荐使用的复合离子交换柱分析检测奶粉中的高氯酸盐和氯酸盐时，出现保留时间漂移，基质干扰严重以至于氯酸盐无法检测等问题。 按照BJS201706方法推荐的前处理方法，使用甲醇为提取液，净化后的样液放置过夜后，瓶底有晶体析出，净化效果不好。 参考Waters总部2017年发表的<解决食品中离子型极性农药的分析难题>应用海报，优化了流动相及梯度条件，使得高氯酸盐及氯酸盐的灵敏度和定定限都可以达到BJS201706标准要求。 仪器条件 色谱条件 仪器系统： ACQUITY UPLCI-Classsystem 色谱柱： Torus DEA Column，130A1.7 um， 2.1×100 mm(P/N：186007616) 流动相A： 乙腈 流动相B： 20mM甲酸铵缓冲液(pH=3.0) 流 速： 0.45 mL/min 柱 温： 35°C 进样量： 1pL 质谱条件质谱系统：Xevo TQ-S Micro 质谱仪电离模式：ESI-电离电压：0.75 KV脱溶剂气：流量1000 L/hour温度：500°C MRM 检测参数见右表： Compound Name Parent (m/z) Daughter (m/z) Auto D Dwell(s) Cone (V) Collision (V) 1 CI03- 82.9681 66.9031 回 0.130 56 16 2 CI03- 85.0000 69.0000 回 0.130 56 16 3 CI03-IS 89.0000 71.0000 回 0.130 56 16 Compound Name Parent(m/z) Daughter(m/z) Auto D Dwell (s) Cone (V) Collision(V) 1 CI04- 98.9681 82.9183 回 0.130 62 20 2 CIO4- 101.0000 85.0000 回 0.130 62 20 3 CIO4-IS 107.0000 89.0000 0.130 62 20 表中： CIO定量离子对为：82.9681>66.9031 CIO定量离子对为：98.9681>82.9183 实验结果与讨论 标准品谱图及线性 图1.1ng/mL标样CIO色谱图。 图2.1ng/mL标样CIO色谱图。 CIO，在0.5-50ng/mL浓度之间，相关系数R²>0.997。 图3.CIO标准曲线(同位素内标法)。 CIO在0.5-50ng/mL浓度之间，相关系数R²>0.999。 图4.CIO标样结果：标准曲线(同位素内标法)。 方法回收率 本方法在空白样品中加标75、150 ug/kg添加浓度时，回收率在80%~110%之间。 净化效果比较 将提取液中的甲醇换成乙腈后，再过PRIMEHLB小柱，经此改进，品品溶液放置几天仍保持澄清，未出现沉淀物，如下图： 重现性 样本连续6针进样重现性结果如下图所示，含量重现性CIO：RSD为5.8%， CIO：RSD为2.1%；RT重现性：CIO：和CIORSD均<0.1%，未出现保留时间漂移的现象。 Compound Number of Samples Mean Std.Dev. %RSD Bias XCIo4- 6 1.5934 0.0342 2.1474 1.5934 Xci03- 6 1.8290 0.1062 5.8082 1.8290 XCI03-IS 6 1.0007 0.0098 0.9776 0.0007 XcI04-IS 6 1.2490 0.0102 0.8130 0.2490 Sample ID Sample Name Sample_D1127_1_PHLB+GHPIS1 20190228_115 D Sample_D1127_1_PHLB+GHPIS_2 20190228116 D Sample_D1127_1_PHLB+GHPIS_3 20190228_117 D Sample_D1127_1_PHLB+GHP_IS_4 20190228118 0 Sample_D1127_1_PHLB+GHP_IS_5 20190228_119 Sample_D1127_1_PHLB+GHP_IS_6 20190228_120 CIO3- #1 Name Sample Text Type Quan Trace RTI Acq.Time Acq.Date 1 1 20190228_115 Sample_D1127_1_PHLB+GHP_IS_1 QC 82.968>66.903 3.720 18：18：28 28-Feb-19 2 2 20190228_116 Sample_D1127_1_PHLB+GHP_IS_2 QC 82.968>66.903 3.727 18：25：03 28-Feb-19 3 3 20190228_117 Sample_D1127_1_PHLB+GHP_IS_3 QC 82.968>66.903 3.733 18：31：39 28-Feb-19 4 4： 20190228_118 Sample_D1127_1_PHLB+GHP_IS_4 QC 82.968>66.903 3.727 18：38：14 28-Feb-19 5 5 20190228_119 Sample_D1127_1_PHLB+GHP_IS_5 QC 82.968>66.903 3.727 18：44：50 28-Feb-19 6 62 20190228_120 Sample_D1127_1_PHLB+GHP_IS_6 QC 82.968>66.903 3.727 18：51：25 28-Feb-19 CI04- #Name Sample Text Type Quan Trace RTI Acq.Time Acq.Date 1 1 20190228_115 Sample_D1127_1_PHLB+GHP_IS_1 QC 98.968>82.918 1.776 18：18：28 28-Feb-19 2 2 20190228_116 Sample_D1127_1_PHLB+GHP_IS_2 QC 98.968>82.918 1.776 18：25：03 28-Feb-19 3 3 20190228_117 Sample_D1127_1_PHLB+GHP_IS_3 QC 98.968>82.918 1.776 18：31：39 28-Feb-19 4 4 20190228_118 Sample_D1127_1_PHLB+GHP_IS_4 QC 98.968>82.918 1.776 18：38：14 28-Feb-19 5 5 20190228_119 Sample _D1127_1_PHLB+GHP_IS_5 QC 98.968>82.918 1.776 18：44：50 28-Feb-19 6 6 20190228_120 Sample_D1127_1_PHLB+GHP_IS_6 QC 98.968>82.918 1.776 18：51：25 28-Feb-19 ( 讨论 ) ■PRIME HLB小柱(PN：186008057，6cc/200mg)具有很好的去磷脂，脂肪的作用，过柱后的供式品溶液减少了污染色谱柱的风险，同时也大大降低基质效应。 Torus DEA色谱柱作为HILIC机理色谱柱使用，须按Hilic柱的方法测柱效，而且须用50mM以上浓度的缓冲盐作为水相流动相测试，用后保存在95：5(V：V)=乙腈：水中。 此色谱柱原为UPC²色谱柱，故初次用作高氯酸盐，氯酸盐测试时，应使用适当的流动相将其转换为HILIC模式。详见沃特世发布的(2018年1月720006156ZHLM-PDF)。 扫一扫，关注沃特世微信 Waters 沃特斯中国有限公司 沃特世科技(上海)有限公司 THE SCIENCE OF WHAT'S POSSIBLE. 北京：010-52093866 上海：021-61562666 广州：020-28296555 香港：852-29641800 免费售后服务热线：800(400)820 2676Www.waters.com 婴幼儿配方乳粉中高氯酸盐，氯酸盐检测的应用纪要 婴幼儿配方乳粉中高氯酸盐，氯酸盐检测的应用纪要 简介本实验采用Torus DEA色谱柱来分析婴幼儿配方乳粉中高氯酸盐和氯酸盐的含 量，将标准 BJS 201706方法中用到的甲醇提取液换成了乙腈后，过 PRIME HLB固 相萃取柱后，得到了更好的净化效果，同时也满足该方法中关于灵敏度，准确度及重现性的要求。结论参考Waters总部2017年发表的<解决食品中离子型极性农药的分析难题>应用海报,优化了流动相及梯度条件，使得高氯酸盐及氯酸盐的灵敏度和定量限都可以达到BJS 201706标准要求。