土鸡蛋中斑蝥黄检测方案(液相色谱仪)

「应用纪要]WatersTHE SCIENCE OF WHAT'S POSSIBLE. 「应用纪要] 使用UPLC-MS/MS法快速检测土鸡蛋中添加剂斑蝥黄 黄德凤，李建辉，秦雨虹，张婷婷 应用优势 UPLC的高效分离可以在4分钟内完成样品分析。 Xevo TQ-S micro的高灵敏度让样品处理过程更简单。液液萃取净化结合稀释进进，在简化样品处理的情况下获得足够好的回收率。 沃特世解决方案 ACQUITY UPLCI-Class系统 Xevo°TQ-S Micro质谱仪 关键词斑蝥黄，鸡蛋 实验方法 超高效液相色谱分离条件 色谱系统： ACQUITY UPLCI-Class 色谱柱： ACQUITY UPLCBEHC.18， 2.1x50mm，1.7um 柱温： 45°C 流速： 0.5 mL/min 流动相A： 含有0.1%甲酸的水溶液 流动相B： 含有0.1%甲酸的乙腈溶液 运行时间： 4 min 进样量： 1pL 时间 (min) 流速 (mL/min) A% B% 线性 0.00 0.5 90 10 6 0.20 0.5 90 10 6 1.2 0.5 10 90 6 3.00 0.5 10 90 6 4.00 0.5 90 10 1 表1.流动相梯度。 质谱条件 质谱系统： Xevo TQ-S Micro 电离模式： ESI+ 电喷雾电压： 3.5 kv 脱溶剂气温度： 500°C 离子源温度： 150°C 脱溶剂气流速： 1000 L/hr 锥孔气流速： 70 L/hr 化合物 英文名称 母离子子离子 锥孔电压V 碰撞 能量V m/z m/z 133.1 20 33 斑蝥黄 Canthaxanthin 565.4 203.1 20 20 样品制备 样品处理流程参照SN/T 2327-2009执行。 取生鸡蛋煮熟，冷却后剥开并搅觉，作为待测样品； 准确称取样品1.00g至50mL离心管，加入标准品后搅拌并静止1小时；准确加入15mL乙腈并漩涡1分钟；转移到离心机并10000转/分钟离心5分钟； 取5mL上清液混入5mL正己烷，漩涡1分钟。10000转/分钟离心5分钟；取适量下层乙腈溶液过0.45 um滤膜，取滤液1mL上LC-MS/MS测试 实验结果 回收率测试 取鸡蛋样品进行添加回收率测定，分别添加20.0 ug/kg和2.0 pg/kg两个浓度水平。按所建立的方法进行样品处理及及定，空白基基匹配标准曲线，外标法定量。高、低添加水平的回收率分别为95.9%和68.1%。 基质匹配校准曲线及重现性 用空白基质配置斑蝥黄标准曲线，线性范围0.01-10.0pg/L，标准曲线测试重复性，每个浓度点重复测试9次，线性相关系数r²=0.9994，标准曲线各点%Dev<20%， 符合定量要求。 讨论 按本方法对随机购买市售鸡蛋样品进行了检测，检出了含量0.70 pg/kg的斑蝥黄。 图3.鸡蛋中含量0.70 pg/kg的斑蝥黄色谱图。 结论 在标准SN/T2327-2009中使用ACQUITYUPLC接Quattro Premier XE质谱检测斑蝥黄的基础上，使用ACQUITY UPLCI-Class系统连接Xevo TQ-S micro对方法进行验证。证明了该方法在Waters更多设备上的适用性。 采用液液萃取结合溶剂稀释法对样品进行处理，无需氮吹，省时省力。Xevo TQ-S micro的高灵敏度保证了检出结果的准确性。 ACQUITY UPLCI-Class超高效液相色谱运行仅需时间4 min即可完成方法检测。 ( 参考文献 ) ( 1.SN/T2327-2009，进出口动物源性食品中斑蝥黄、虾青色的检测方法。 ) 扫一扫，关注沃特世微信 Waters 沃特斯中国有限公司 沃特世科技(上海)有限公司 THE SCIENCE OF WHAT'S POSSIBLE. 北京：010-52093866 上海：021-61562666 广州：020-28296555 香港：852-29641800 Waters禾The Science of What’s Possible是沃特世公司的商标。 免费售后服务热线：800(400) 8202676WWww.waters.com 使用UPLC-MS/MS法快速检测土鸡蛋中添加剂斑蝥黄 所有其他的商标属于各自的所有者。C特世公司 简介 在今年的3•15国际消费者权益日消费者之友专题晚会上，曝光了“土鸡蛋”添加 了“斑蝥黄”添加剂染色，社会大众及国家相关检测机构开始高度关注该化合物 的监督检验。“斑蝥黄”又叫角黄素，是一种天然存在于甲壳、鱼类、藻类等生物体内的类胡萝 卜素。它是一种橙红色的色素，稳定性比较好，常用于饮料、酱料、肉类等食物的 调色，可让蛋黄颜色更鲜红，让动物肉的色泽更红润。目前GB方法1中使用LC-UV和LC-MS/MS两种方式检测动物源性食品中的斑蝥黄。标准当中使用 WatersACQUITY UPLC接Quattro Premier XE质谱检测斑蝥黄。本文旨在使用 Waters ACQUITY UPLCI-Class接Xevo TQ-S Micro对标准进 行验证，证明该方法在 Waters更多设备上的适用性。 样品处理方法参照SN/T 2327-2009执行，使用液液萃取净化，同时结合Xevo TQ-S Micro的高灵敏度，使用了溶剂稀释方法，避免了标准当中长时间的浓缩过程带来的回收率损失。ACQUITY UPLC I-Class建立高效的分离方法，斑蝥黄反式、顺式异构体的保留时间分别约为2.60min、2.89min，标准品色谱图见图 1。 检测结果采用基质匹配外标法定量，分析鸡蛋中的斑蝥黄。测试了系统重现性和 样品加标回收率，并对实际样品中的斑蝥黄含量进行检测。结论 在标准SN/T 2327-2009中使用ACQUITY UPLC接Quattro Premier XE质谱检测斑蝥黄的基础上，使用 ACQUITY UPLC I-Class系统连接Xevo TQ-S micro对方法进行验证。证明了该方法在Waters更多设备上的 适用性。采用液液萃取结合溶剂稀释法对样品进行处理，无需氮吹，省时省力。Xevo TQ-S micro的高灵敏度保证了检 出结果的准确性。ACQUITY UPLC I-Class超高效液相色谱运行仅需时间4 min即可完成方法检测。