单克隆抗体中氨基酸分析检测方案(柱后衍生装置)

METHOD ABSTRACT/373CATALYST FOR SUCCESS METHOD ABSTRACT/373 PICKERINGLA眼ORATOAIM 单克隆抗体中氨基酸分析 药用多肽和蛋白质是一类快速膨胀的治疗药物，常用于治疗各种疾病，如癌症、代谢与自身免疫类疾病、HIV等。生物药如单克隆抗体源于生物体，通常价格高昂。由于很多生物制剂依照专利生产，市场为节约成本的生物医药做好准备，但是所有的蛋白质包括单克隆抗体具有决定其功能的复杂结构，结构差异改变其生物活性，进而导致药物安全和效力发生变化。 ICHQ6B这个指导性文件为支持新市场应用的生物技术和生物产品提供了一套国际上可接受的参数，建立了原料药、成品药、原材料应遵守的配套标准。 ICH Q6B中测定水解后氨基酸组成可作为表征蛋白质和通过与预期产品基因序列的氨基酸构成对比鉴定蛋白质的一种方法，氨基酸分析的数据也可用来精确的衡量蛋白质含量。 柱后衍生法分析氨基酸是一种非常灵敏、可重复且稳定的方法，已成为实验室内检测生物样品、蛋白质、多肽和食品分析的首选方法， Pickering公司提供氨基酸分析的全套产品包括柱后衍生系统、色谱柱、洗脱液、试剂和标准品，全套使用为任何样品的测试以得到最优结果提供有利条件 方法 分析条件 色谱柱：高效钠离子交换柱 4.6x110 mm， 货号1154110T 流速：0.6mL/min 流动相：参见表1 柱后衍生条件 表1.HPLC梯度程序 TIME NA315，% NA425.% NA640，% RG011，% 0 100 0 0 0 4.0 100 0 0 0 15.0 0 100 0 0 16.0 0 0 100 0 31.0 0 0 100 0 31.1 0 0 0 100 33.0 0 0 0 100 33.1 100 0 0 0 40.0 100 0 0 0 柱后衍生系统： Pinnacle PCX 反应器：0.5mL 试剂： TrioneR 茚三酮 反应器温度：130℃ 流速：0.3mL/min 表2.柱温梯度程序 TIME Temp，C 0 46 4 46 9 70 32 70 33 46 检测器：：UV/VIS 570nm 一级氨基酸440nm二级氨基酸 进样体积：10-50mL 16 图1氨基酸标准品的色谱图 图2IL-17F单克隆抗体水解样品的色谱图 ( *鸣谢Frank N. Konstantinides及AminoAcid s .com 对此项目的贡献 ) 总部 扫描二维码了解德祥 香港九龙观塘巧明街100号友邦九龙大楼36楼3605室Tel： (852) 3910 1500 Fax： (852) 2758 3830 亚太地区 香港办事处 香港九龙观塘鸿图道14-16号 志成工业大厦5楼全层 Street， Phuoc Kien Commune， Nha Be District，Ho Chi Minh City.北区北京办事处 西安办事处北京市东城区南竹竿胡同2号 陕西省西安市长安区郭杜街道文苑中路银河SOHO D座50921室 长安双创中心B座Tel：(010) 8232 7383 Fax： (010) 8232 9551东区上海办事处 武汉办事处上海市长宁区天山路1717号 湖北省武汉市东湖高新佳园路2号SOHO天山广场T2幢1002室 (200050) 高科大厦18楼F1801(430074)Tel： (021) 52610159 Fax： (021) 5261 0122南区广州办事处 长沙办事处广东省广州市黄埔区茅岗南路9号 湖南省长沙市经济技术开发区向阳路1号鱼珠智谷A08-09(510730) 金科时代中心3A-1904(410015)Tel： (020) 3256 8788 Fax： (020) 3256 8700海南办事处海南省海口市蓝天路7号华江大厦12B室(570203)昆明办事处云南省昆明市五华区北京路1079号欣都龙城4栋707室(650041)西区 南宁办事处广西省南宁市市族大道141号成都办事处 中鼎万象东方C座601室(530028)四川省成都市高新区都会路55号3单元25楼2506号重庆办事处重庆市渝北区新溉路保华大道仁安龙城国际1期1栋1单元20-9室(400020) 慧淘科仪SmartLab Hub 德祥集团旗下一站式科研用品采购平台 网址： www.smartlabhub.com.cn邮箱： info@smartlabhub.com.cn 药用多肽和蛋白质是一类快速膨胀的治疗药物，常用于治疗各种疾病，如癌症、代谢与自身免疫类疾病、HIV等。生物药如单克隆抗体源于生物体，通常价格高昂。由于很多生物制剂依照专利生产，市场为节约成本的生物医药做好准备，但是所有的蛋白质包括单克隆抗体具有决定其功能的复杂结构，结构差异改变其生物活性，进而导致药物安全和效力发生变化。ICH Q6B这个指导性文件为支持新市场应用的生物技术和生物产品提供了一套国际上可接受的参数，建立了原料药、成品药、原材料应遵守的配套标准。ICH Q6B中测定水解后氨基酸组成可作为表征蛋白质和通过与预期产品基因序列的氨基酸构成对比鉴定蛋白质的一种方法，氨基酸分析的数据也可用来精确的衡量蛋白质含量。柱后衍生法分析氨基酸是一种非常灵敏、可重复且稳定的方法，已成为实验室内检测生物样品、蛋白质、多肽和食品分析的首选方法，Pickering公司提供氨基酸分析的全套产品包括柱后衍生系统、色谱柱、洗脱液、试剂和标准品，全套使用为任何样品的测试以得到最优结果提供有利条件