食品中4-甲基咪唑检测方案(旋涡混合器)

4-甲基咪唑（4-MI）是一种有致癌风险的污染物，常作为生产焦糖色素的副产物出现在食品中。 本方案参照国标GB 5009.282-2020，采用Copure®MCX小柱，以百香果汁及蜂蜜为基质样品，建立了不同基质中4-甲基咪唑的液相色谱-串联质谱测定法，低、中、高三水平的加标都能获得满意结果。 样品提取 准确称取均匀的样品2.0 g（精确至0.001 g）于50 mL离心管中，加入2 %甲酸水溶液至20 mL，混匀，10000 r/min离心5 min，上清液待净化。 样品净化 活化：依次用5 mL甲醇，5 mL水活化固相萃取小柱。 上样：取待净化样品10 mL过柱，弃掉流出的液体。 淋洗和洗脱：分别加入2 mL 2 %甲酸水、5 mL水、5 mL甲醇淋洗固相萃取小柱，弃去流出的液体；加入8 mL 5 %氨水甲醇洗脱固相萃取小柱，收集洗脱液。 重新溶解：45 ℃下氮吹至近干，加入乙腈-5 mmol/L乙酸铵（9+1）溶液1 mL复溶，涡旋30s，过0.22μm有机系滤膜，上机测试。 本方案所使用仪器：BN24智能水浴氮吹仪 (​http:​/​​/​mp.weixin.qq.com​/​s?__biz=MjM5MDg1MzAwOQ==&mid=2652272470&idx=3&sn=b6a5d17c6958a6dff1c717f95bdc8af5&chksm=bd5ca5a88a2b2cbe7d9338a816b2a1cf7d040cd0ea425855e2f40970496babf94394411c1e57&scene=21" \l "wechat_redirect​) 点击图片可跳转至对应文章链接 标准曲线溶液的制备  取适量标液，用乙腈-5 mmol/L乙酸铵（9+1）溶液稀释成浓度分别为10 μg/L、20 μg/L、50 μg/L、100 μg/L、200 μg/L、400 μg/L的标准上机溶液。 仪器条件 1）色谱条件 仪器：UPLC-MS/MS (Thermo Fisher TSQ Endura) 色谱柱：GOWON HILIC (2.1 mm×100 mm，2.7 μm) 流动相：A：5 mmol/L乙酸铵   B：乙腈 洗脱方式：梯度洗脱，见表1 流速：0.6 mL/min 柱温：35℃ 进样量：5 μL 表1 梯度洗脱程序 2）质谱条件 离子源：HESI 电喷雾电压：3500 V 鞘气压力：35 arb 辅气压力：5 arb       离子传输管：380 ℃ 辅气温度：350 ℃ 表2 组分名称、保留时间 及特征离子一览表（*为定量离子） 实验结果 表3  4-甲基咪唑加标回收实验结果 图1 百香果汁中添加水平为100.0 μg/kg时 4-甲基咪唑的离子流图 图2 蜂蜜中添加水平为100.0 μg/kg时 4-甲基咪唑的离子流图 订购信息 4-甲基咪唑（4-MI）是一种有致癌风险的污染物，常作为生产焦糖色素的副产物出现在食品中。 本方案参照国标GB 5009.282-2020，采用Copure®MCX小柱，以百香果汁及蜂蜜为基质样品，建立了不同基质中4-甲基咪唑的液相色谱-串联质谱测定法，低、中、高三水平的加标都能获得满意结果。样品提取准确称取均匀的样品2.0 g（精确至0.001 g）于50 mL离心管中，加入2 %甲酸水溶液至20 mL，混匀，10000 r/min离心5 min，上清液待净化。 样品净化活化：依次用5 mL甲醇，5 mL水活化固相萃取小柱。上样：取待净化样品10 mL过柱，弃掉流出的液体。淋洗和洗脱：分别加入2 mL 2 %甲酸水、5 mL水、5 mL甲醇淋洗固相萃取小柱，弃去流出的液体；加入8 mL 5 %氨水甲醇洗脱固相萃取小柱，收集洗脱液。重新溶解：45 ℃下氮吹至近干，加入乙腈-5 mmol/L乙酸铵（9+1）溶液1 mL复溶，涡旋30s，过0.22μm有机系滤膜，上机测试。本方案所使用仪器：BN24智能水浴氮吹仪标准曲线溶液的制备 取适量标液，用乙腈-5 mmol/L乙酸铵（9+1）溶液稀释成浓度分别为10 μg/L、20 μg/L、50 μg/L、100 μg/L、200 μg/L、400 μg/L的标准上机溶液。仪器条件1）色谱条件仪器：UPLC-MS/MS(Thermo Fisher TSQ Endura)色谱柱：GOWON HILIC(2.1 mm×100 mm，2.7 μm)流动相：A：5 mmol/L乙酸铵   B：乙腈洗脱方式：梯度洗脱，见表1流速：0.6 mL/min柱温：35℃进样量：5 μL表1 梯度洗脱程序 2）质谱条件离子源：HESI电喷雾电压：3500 V鞘气压力：35 arb辅气压力：5 arb      离子传输管：380 ℃辅气温度：350 ℃表2 组分名称、保留时间及特征离子一览表（*为定量离子）实验结果                                         表3  4-甲基咪唑加标回收实验结果图1 百香果汁中添加水平为100.0 μg/kg时4-甲基咪唑的离子流图                                         图2 蜂蜜中添加水平为100.0 μg/kg时                                                      4-甲基咪唑的离子流图订购信息