人血白蛋白中重金属Al检测方案(原子吸收光谱)

analytikjenaApplication Example -AASAn Endress+Hauser Company 参照2020药典人血白蛋白铝残留量测定法(通则3208)，测定人血白蛋白中金属元素 AI含量。 人血白蛋白富含氨基酸等有机质，成分复杂且粘稠；测试元素 Al 为高温元素，对仪器升温效率要求高；本实验按照药典方法，使用ZEEnit 700P 石墨炉法对稀释后的样品进行测试，样品测试峰形好，基体干扰小；稳定性佳， RSD 为0~2.1%；实验结果准确可靠。 样品和试剂 试剂准备 1.硝酸 GR 沪试； 2.Al标液： 1000ppm，国家有色金属 样品说明： 样品共5个，来自不同厂家人血白蛋白，分别编号为A、B、C、D、E。取样体积1.5mL左右，编号为A~E。 状态：淡黄色粘稠液体。 样品处理： 样品用 0.15mol/L HNO3 稀释25倍，混匀进行测试。测试方法按照药典3208法，使用增量法(单点标准加入法)，加标单点浓度为 5pg/L。 表1校准曲线 Concentration Standard [ug/L] AI Sample 0 Sample+Std.1 5 石墨炉自动进样器： 配置石墨炉自动进样器，可以实现从样品制备到样品分析的整个连续自动化： 自动建立校正曲线 计量极微量的进样体积 自动化、智能化的样品稀释和富集 ■ 独特的取样液面追踪功能 图1.石墨炉自动进样器 自动除 Date：03/11/2020 表2标准加入法校正曲线 0.100_0.0751 0.050S0.0251 0.000 E AI 39928nm峰面积 2 3 ( Analytik Jena AGKonrad-Zuse-Strasse 107745 Jena· Germany ) Date：03/11/2020 仪器方法 表3仪器及方法参数 Parameter Specification积分方式 峰面积积分时间 3.0 s灯电流 5 mA校正模式 塞曼扣背景自动进样器 AS-GF石墨管类型 涂层石墨管 进样量 10 uL 表4方法参数 元素/波长 灰化[C] 原子化[°C] 升温速率[°C/s] 新一代横向加热石墨炉技术： 横向加热石墨管，在管长方向无温度梯度，真正保证石墨管内部温度的均一性： 无冷凝现象，避免灵敏度损失，消除交叉污染，基体干扰 提高原子化效率 有效防止记忆效应 轻松测定高温元素 图2.横向加热石墨管 Analytik Jena AGPhone +49 3641 77 70Date：03/11/2020Konrad-Zuse-Strasse 1Fax +49 364177 9279Author Abbr.Dou Yanhan ChengXuehua07745 Jena· Germanyinfo@analytik-jena.comwww.analytik-jena.com 结果 表5 谱图 表6测试结果 样品编号 测定值 ug/L 样品铝含量 (ug/L) RSD(%)n=2 A 2.246 56.15 0.1 B 0.7002 17.51 1.5 C 1.744 43.60 0.8 D 1.401 35.03 1.2 E 2.027 50.68 2.1 www.analytik-jena.com 计算方法：药典方法：样品AI 含量[ug/L]=5*(S0-B)*25/(S-S0)，仪器标准加入法自动计算。 讨论 (1)虽然Al为高温元素，但本实验中原子化温度使用2450℃即可。这是由于仪器采用横向加热技术，石墨管加热均匀，原子化效率高，同时，也延长了石墨管使用寿命。从样品图谱上看，此原子化温度下，峰形完整、对称，无拖尾、记忆效应小，测试数据非常稳定， RSD 为0~2.1%，结果准确可靠。说明仪器具有良好的耐有机物、耐高盐性能以及抗干扰能力，完全适合此类样品的检测。 (2)样品黏度较大，应当适当稀释，降低测试样品黏度。本实验样品稀释25倍后，摄像头观察，进样针无残留，进样量准确。 (3)Al元素丰度高，易污染，要严控酸、水和容器的污染。 德国耶拿分析仪器股份公司北京代表处：北京市东城区朝阳门北大街8号，富华大厦B座13层 电话：010-65543879， 65543849传真：010-65543265 e-mail： info@analytik-jena.com.cn ( Analytik Jena AGKonrad-Zuse-Strasse 107745 Jena· Germany ) Date：03/11/2020 附录一 人血白蛋白铝离子残留量测定方法，人血白蛋白等制品纯度测定方法增修草案公示稿 一、3208人血白蛋白铝残留量测定法 第一法原子吸收分光光度法(略) (无增修订) 第二法电感耦合等离子体质谱法(增订) 本法系用电感耦合等离子体质谱法测定人血白蛋白制品中铝的残留量。照电感耦合等离子体质谱法(通则0412)测定。 仪器参数的设置应根据选用的电感耦合等离子体质谱仪型号的特点，合理设置仪器参数，并通过开启碰撞反应池等手段消除质谱型干扰。，一般参考条件：射频功率为1400-1600W， 采样深度6-10mm， 雾化器/载气流速0.65-1.30L/min，载气补偿气流速 0-0.65 L/min，蠕动泵转速0. L rps，模气模式，积分时间0.3-1.5秒，重复次数为3次。 试剂5%(v/v)硝酸溶液量取硝酸(65%-68%)25m1，用超纯水稀释至500m1，混匀，即得。 内标溶液的制备精密量取标准品适量，用5%硝酸溶液稀释制成适宜的浓度，使进样浓度为 50ug/L。 标准品溶液的制备精密量取铝标准品适量，用5%硝酸溶液稀释制成1000pg/L的溶液，作为铝标准品贮备液。精密量取铝标准品贮备液适量，用5%硝酸溶液分别稀释制成Oug/L、2.5ug/L、5ug/L、I0pg/L、20pg/L、40pg/L的溶液。 供试品溶液的制备精密量取供试品1ml， 加5%硝酸溶液9m1，涡旋混匀后静置4小时以上，以每分钟4000转离心30分钟，取上清液用 0.45um 滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液。 测定法分别取标准品溶液，供试品溶液和内标溶液注入电感耦合等离子体质谱仪，记录铝元素及内标元素的响应值。 以标准品溶液铝浓度为横坐标，对其相应铝元素与内标元素响应值的比值为纵坐标作直线回归，求得直线回归方程，直线回归相关系数应不低于0.999； 将测得的供试品溶液铝元素与内标元素响应值的比值带入直线回归方程，计算供试品溶液中铝残留量，再乘以稀释倍数，即为供试品中铝残留量。 【附注】 (1)本测定法应避免接触玻璃器皿。 (2) 接触的耗材在使用前应用超纯水荡洗。 (3)尽量减少环境中带入铝污染。 (4)应尽量选择低本底的硝酸试剂。 (6)本法为在线添加内标。如采用手动添加内标，应在标准品溶液和供试品溶液的制备时同时添加内标，使内标进样浓度为 50pg/L。 起草单位：上海市食品药品检验所 复核单位：广东省药品检验所 Date：03/11/2020 附录二 3208人血白蛋白铝残留量测定法 本法系用原子吸收分光光度法测定人血白蛋白制品中铝的残留量。测定法按表1精密量取供密品、100ng/ml标准铝溶液(精密量取100ug/ml标准铝溶液0.1ml， 置100ml量瓶中，用0.15mol/L硝酸溶液稀释至刻度)，分别制备空白对照溶液、供试品溶液和标准铝加供试品品混合溶液。照原子吸收分光光度法(通则0405)测定，选择铝灯，测定波长为309.3nm， 狭缝为0.7nm。按表2设置石墨炉的干燥、灰化、原子化等炉温程序，精密量取空白对照溶液、供试品溶液和标准铝加供试品的混合溶液各30pl，分别注入仪器，读数。按下式计算： 按下式计算： 式中 B为空白对照溶液读数； S。为供试品溶液读数； S 为标准铝加供试品的混合溶液读数； 20为标准铝加供试品的混合溶液中标准铝的含量，ug/L； 12.5为供试品稀释倍数。 表1 空白对照、供试品及混合溶液的制备 空白对照溶液 供试品溶液 混合溶液 供试品/ml 标准铝溶液 (100ng/ml)/ml 0.15mol/L HNO/ml| 一 2.5 0.2 2.3 0.2 0.51.8 表2：炉温控制程序 程度 步骤 温度/℃ 时间/秒 爬坡时间+保持时间 12345 预热干燥灰化原子化清除 80220120026002650 0+10 120+5 10+20 0+5 0+5 【附注】 (1)供试品和标准铝取量可根据仪器性能进行适当调整，使读数在所用仪器可准确读数范围内。(2)表2列出的炉温控制程序可根据仪器性能做适当调整。 (3)尽量避免使用玻璃容器。 ( Analytik Jena AGKonrad-Zuse-Strasse 107745 Jena· Germany ) Date：03/11/2020 Phone +ax +nfo@analytik-jena.comwww.analytik-jena.comAuthor Abbr.Dou Yanhan ChengXuehua Phone +ax +nfo@analytik-jena.comwww.analytik-jena.comAnalytik Jena AGKonrad-Zuse-Strasse Jena· GermanyAuthor Abbr.Dou Yanhan ChengXuehua （1）虽然Al为高温元素，但本实验中原子化温度使用2450℃即可。这是由于仪器采用横向加热技术，石墨管加热均匀，原子化效率高，同时，也延长了石墨管使用寿命。从样品图谱上看，此原子化温度下，峰形完整、对称，无拖尾、记忆效应小，测试数据非常稳定，RSD为0~2.1%，结果准确可靠。说明仪器具有良好的耐有机物、耐高盐性能以及抗干扰能力，完全适合此类样品的检测。（2）样品黏度较大，应当适当稀释，降低测试样品黏度。本实验样品稀释25倍后，摄像头观察，进样针无残留，进样量准确。（3）Al元素丰度高，易污染，要严控酸、水和容器的污染。