中药样品中丹参检测方案(液相色谱仪)

Acchrom·Tech华谱科仪华谱科仪(北京)科技有限公司 华谱科仪(北京)科技有限公司 华谱科仪 S6000 液相色谱中药材丹参的分析报告 一、实验背景 本文参照2020版《中国药典》记载的中药材丹参液相色谱分析方法，进行供试品的制备，并分别测试华谱 Alphasil VC-C18(4.6x250 mm，5 um)色谱柱能否实现丹参样羊中隐丹参酮、丹参酮I、丹参酮IIA 和丹酚酸B与杂质峰的分离。 2020版《中国药典》规定，丹参中药材液相色谱分离结果理论板数按丹参酮IIA色谱峰计算，应不低于60000；按丹酚酸B色谱峰计算，应不低于6000。 以丹参酮 IIA对照品为参照，隐丹参酮、丹参酮Ⅰ的相对保留时间应在规定值的±5%范围之内。规定相对保留时间见下表。 名称 相对保留时间 隐丹参酮 0.75 丹参酮I 0.79 丹参酮IIA 1.00 二、试验方案及结果 1.样品制备 参照2020版《中国药典》丹参中药材相关的供试品制备方法。 隐丹参酮、丹参酮I、丹参酮 IIA 的供试品制备： 供试品溶液的制备：取本品粉末(过三号筛)约0.3g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50mL，密塞，称定重量，超声处理(功率140W，频率42 kHz) 30分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。 丹酚酸B的供试品制备： O 供试品溶液的制备：取本品粉末(过三号筛)约0.15g， 精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇-水(8：2)混合溶液50 mL，密塞，称定重量，超声处理(功率140W，频率42 kHz)30分钟，放冷，再称定重量，用甲醇-水(8：2)混合溶液补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液5mL， 移至10mL量瓶中，加甲醇-水(8：2)混合溶液稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。 三、结果与讨论 隐丹参酮、丹参酮I、丹参酮IIA的检测 色谱条件 仪 器：华谱 S6000 高效液相色谱仪 色谱柱： Alphasil VC-C18 ， 4.6x250 mm， 5 um 流动相：A：0.02%磷酸溶液；B：乙腈(药典条件，梯度洗脱) 柱 温：20℃ 检测波长：270 nm 流 速：1.0 mL/min 进样样： 10uL 图1 Alphasil VC-C18 重现药典方法分析丹参供试品结果色谱图 图1为全多孔色谱柱 Alphasil VC-C18 按照药典方法分析丹参样品结果，经计算，隐丹参酮、丹参酮Ⅰ的相对保留时间分别为0.78和0.82，丹参酮IIA的理论塔板数为116154，满足药典要求。 表1 丹参供试品溶液药典方法数据表 名称 保留时间 相对保留 USP 拖尾 USP分离 理论塔板数 (min) 时间 度 隐丹参酮 16.98 0.78 0.97 2.48 60577 丹参酮I 18.03 0.82 0.99 3.78 75408 丹参酮IIA 21.88 1.00 0.99 6.39 116031 丹酚酸B的检测 色谱条件 仪 器：华谱 S6000 高效液相色谱仪 色谱柱： Alphasil VC-C18 ， 4.6×250 mm， 5 um 流动相：乙腈-0.1%磷酸溶液(22：78) 柱 温：20℃ 检测波长：286nm 流 速：1.2mL/min 进样量：10uL 图2 Alphasil VC-C18 重现药典方法分析丹参供试品结果色谱图 图2为全多孔色谱柱Alphasil VC-C18 按照药典方法分析丹参样品结果，经计算，丹酚酸B的理论塔板数为16450，满足药典要求。 四、结论 结果表明，华谱 Alphasil VC-C18(4.6×250 mm， 5 um)色谱柱实现丹参样品中隐丹参酮、丹参酮I、丹参酮 IIA和丹酚酸B与杂质峰的分离。。目标峰峰形良好，隐丹参酮、丹参酮Ⅰ的相对保留时间分别为0.78和0.82，按丹参酮IIA 色谱峰计算的理论板数为116154；丹酚酸B保留时间为38.64分钟，按丹酚酸B色谱峰计算的理论板数为16450，均满足药典要求。 联系我们 关注我们 ( www.acchrom-tech.com 华谱科仪(北京)科技有限公司 热线电话：010-8410-9313 ) 邮箱： marketing@acchrom-tech.com O o 可以实现丹参样品中隐丹参酮、丹参酮I、丹参酮IIA和丹酚酸B与杂质峰的分离。目标峰峰形良好，隐丹参酮、丹参酮I的相对保留时间分别为0.78和0.82，按丹参酮IIA色谱峰计算的理论板数为116154；丹酚酸B保留时间为38.64分钟，按丹酚酸B色谱峰计算的理论板数为16450，均满足药典要求