双黄连口服液中绿原酸、黄岑苷、连翘苷检测方案

2020版药典 双黄连口服液中绿原酸、黄岑苷、连翘苷的含量测定 双黄连口服液具有疏风解表、清热解渴的功效，能够用于治疗外感风热所致的感冒，其主要成分为金银花、黄芩和连翘三种中药，2020版药典要求双黄连口服液测定绿原酸、黄芩苷、连翘苷含量。 大曹三耀技术中心使用普适性的包被型的 CAPCELL PAK C18 MG 对双黄连口服液进行分析，绿原酸、黄芩苷、连翘苷均能得到良好分离，满足2020版药典理论塔板数的要求。 绿原酸的含量测定 绿原酸 系统适用性要求：理论板数按绿原酸峰计算应不低于6000。 图1绿原酸标准品的色谱图 图2双黄连口服液中绿原酸的色谱图 HPLC Conditions 色谱柱： CAPCELL PAK C18 MG S5；4.6mm i.d.×250mm 流动相：甲醇：水：冰醋酸=20：80：1 流速：1.0mL/min 温度：30℃ 检测：PDA324nm 进样量：10uL 浓度：绿原酸40 ug/mL (溶剂为水) 样品处理：量取2mL双黄连口服液，置50mL棕色量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得。 注：峰上所标数字为理论塔板数和分离度。 标准品中绿原酸的理论塔板数为13334，双黄连口服液中绿原酸的理论塔板数为13307，均满足药典不低于6000的要求。双黄连口服液中绿原酸峰与其后杂质峰之间的分离度为2.43，可以得到良好分离。 黄芩苷 系统适用性要求：理论板数按黄芩节峰计算应不低于1500。 图3黄岑苷标准品的色谱图 图4双黄连口服液中黄岑苷的色谱图 HPLC Conditions 色谱柱： CAPCELL PAK C18 MG S5；4.6mm i.d.×250mm 流动相：甲醇：水：冰醋酸=50：50：1 流速：1.0mL/min 温度：30℃ 检测： PDA274nm 进样量： 5uL 浓度：黄芩苷0.1 mg/mL(溶剂为50%甲醇) 样品处理：量取1mL双黄连口服液，置50mL量瓶中，加50%甲醇适量，超声处理20min， 放置至室温，加50%甲醇稀释至刻度，摇匀，即得。 注：峰上所标数字为理论塔板数。 标准品中黄芩苷的理论塔板数为2895，双黄连口服液中黄芩苷的理论塔板数为4332，均满足药典不低于1500的要求。双黄连口服液中黄芩苷峰前后没有基质干扰。 连翘苷的含量测定 连翘苷 系统适用性要求：理论板数按连翘苷峰计算应不低于6000. 图5连翘苷标准品的色谱图 图6双黄连口服液中连翘苷的色谱图 HPLC Conditions 色谱柱： CAPCELL PAK C18 MG S5； 4.6mmi.d.×250mm 流动相：乙腈：水=25：75 流速：1.0mL/min 温度：30℃ 检测： PDA278nm 进样量：10uL 浓度：连翘车60ug/mL (溶剂为50%甲醇) 样品处理：量取1mL双黄连口服液，加在中性氧化铝柱(100-120目，6g，内径为 1cm)上，用70%乙醇 40mL洗脱，收集洗脱液，浓缩至干，残渣加50%甲醇适量，温热使溶解，转移至5mL量瓶中，并稀释至刻度，摇匀，即得。 注：峰上所标数字为理论塔板数。 标准品中连翘苷的理论塔板数为20140，双黄连口服液中连翘苷的理论塔板数为20346，均满足药典不低于6000的要求。连翘苷峰良良好，双黄连口服液中连翘苷峰前后没有基质干扰。 2020版药典 双黄连口服液中绿原酸、黄岑苷、连翘苷的含量测定双黄连口服液具有疏风解表、清热解渴的功效，能够用于治疗外感风热所致的感冒，其主要成分为金银花、黄芩和连翘三种中药，2020版药典要求双黄连口服液测定绿原酸、黄芩苷、连翘苷含量。 大曹三耀技术中心使用普适性的包被型的CAPCELL PAK C18 MG对双黄连口服液进行分析，绿原酸、黄芩苷、连翘苷均能得到良好分离，满足2020版药典理论塔板数的要求。 绿原酸的含量测定系统适用性要求：理论板数按绿原酸峰计算应不低于6000。 图1 绿原酸标准品的色谱图 图2 双黄连口服液中绿原酸的色谱图 HPLC Conditions 色谱柱：CAPCELL PAK C18 MG S5; 4.6mm i.d.×250mm流动相：甲醇：水：冰醋酸 = 20：80：1流  速：1.0 mL/min温  度：30 ℃检  测：PDA 324 nm进样量：10 µL浓  度：绿原酸40 μg/mL（溶剂为水）样品处理：量取2mL双黄连口服液，置50mL棕色量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得。注：峰上所标数字为理论塔板数和分离度。标准品中绿原酸的理论塔板数为13334，双黄连口服液中绿原酸的理论塔板数为13307，均满足药典不低于6000的要求。双黄连口服液中绿原酸峰与其后杂质峰之间的分离度为2.43，可以得到良好分离。 黄岑苷的含量测定 系统适用性要求：理论板数按黄芩节峰计算应不低于1500。 图3 黄岑苷标准品的色谱图 图4 双黄连口服液中黄岑苷的色谱图 HPLC Conditions 色谱柱：CAPCELL PAK C18 MG S5; 4.6mm i.d.×250mm流动相：甲醇：水：冰醋酸 = 50：50：1流  速：1.0 mL/min温  度：30 ℃检  测：PDA 274 nm进样量：5 µL浓  度：黄芩苷0.1 mg/mL（溶剂为50%甲醇）样品处理：量取1mL双黄连口服液，置50mL量瓶中，加50%甲醇适量，超声处理20min，放置至室温，加50%甲醇稀释至刻度，摇匀，即得。注：峰上所标数字为理论塔板数。 标准品中黄芩苷的理论塔板数为2895，双黄连口服液中黄芩苷的理论塔板数为4332，均满足药典不低于1500的要求。双黄连口服液中黄芩苷峰前后没有基质干扰。 连翘苷的含量测定 系统适用性要求：理论板数按连翘苷峰计算应不低于6000。图5 连翘苷标准品的色谱图 图6 双黄连口服液中连翘苷的色谱图 HPLC Conditions 色谱柱：CAPCELL PAK C18 MG S5; 4.6mm i.d.×250mm流动相：乙腈：水 =25：75流  速：1.0 mL/min温  度：30 ℃检  测：PDA 278 nm进样量：10 µL浓  度：连翘苷60 μg/mL（溶剂为50%甲醇）样品处理：量取1mL双黄连口服液，加在中性氧化铝柱（100-120目，6g，内径为1cm）上，用70%乙醇40mL洗脱，收集洗脱液，浓缩至干，残渣加50%甲醇适量，温热使溶解，转移至5mL量瓶中，并稀释至刻度，摇匀，即得。注：峰上所标数字为理论塔板数。 标准品中连翘苷的理论塔板数为20140，双黄连口服液中连翘苷的理论塔板数为20346，均满足药典不低于6000的要求。连翘苷峰形良好，双黄连口服液中连翘苷峰前后没有基质干扰。