食用菌中糖含量检测方案(生物显微镜)

食用菌风味独特，营养丰富，具有很高的食用价值和药用价值。食用菌中的总糖含量是其重要的质量指标。 GB/T 15672-2009中规定了食用菌中总糖含量的测定方法，其原理是：食用菌中水溶性糖和水不溶性多糖经盐酸溶液水解后转化成还原糖，水解物在硫酸的作用下，迅速脱水生成糖醛衍生物，并与苯酚反应生成橙黄色溶液，反应产物在490nm处比色，采用外标法定量。 实验仪器和设备： 1、分析天平：感量0.1 mg。 2、鼓风干燥箱：温度精度±2℃。 3、干燥器。 4、粉碎机：备有1mm孔径的金属网筛。so 5、涡旋振荡器。 6、恒温水浴锅：温度精度±1℃。 7、可见分光光度计。 实验方法： (1)样品前处理 干样：剪刀剪成小块，80℃干燥箱烘干至发脆，置于干燥器冷却，粉碎，过0.9mm筛。未能过筛部分再次粉碎或经钵内研磨后再此过筛，直至全部样品过筛为止。过筛后的样品装入清洁的广口瓶内密封保存，备用。 鲜食用菌：手撕或刀切成小块，50℃鼓风干燥箱6小时以上，带样品半干后再逐步提高温度至80℃， 烘干至发脆，置于干燥器冷却，粉碎后的操作同干样的制备。 (2)试样测试液的制备 0.25g试样于250mL蒸馏瓶+50mL水+15mL浓盐酸，连接冷凝回流，置100℃水浴中水解3小时，冷却后过滤，再用蒸馏水洗涤残渣，合并濾液及洗液，用水定容至250mL， (3)标准曲线的绘制： 分别吸取100 mg/L的葡萄糖标准溶液0，0.2mL， 0.4mL，0.6mL， 1.0mL于10mL具塞比色管，蒸馏水补至1.0mL。向试液中加入1.0mL 5%苯酚溶液，然后快速加入5.0mL浓硫酸，反应液静止放置10min。使用涡旋振荡器使反应液混合，然后将试管置于30℃水浴中反应20min。取适量反应液在490nm处测吸光度。以葡萄糖质量浓度为横坐标，吸光度值为纵坐标，制定标准曲线。 (4)测定 准确吸取试样测试液0.2mL于10mL具塞比色管中，用蒸馏水补至1.0 mL， 按步骤(3)操作，以空白溶液调零，测得吸光度，以标准曲线计算总糖含量。 (5)空白试验 空白试验需与测定平行进行，用同样的方法和试剂，但不加试料。 (6)结果计算 试料中总糖含含以质量分数w计，数值以百分率(%)表示，按式(1)计算。 式中： Vn一品定容体积，单位为毫升(mL)； V——比色测定时所移取样品测定液的体积，单位为毫升(mL)； m——从标准曲线上查得样品测定液中的含糖量，单位为微克(pg)； m?——样品质量，单位为克(g)； (nw——样品含水量，%。 计算结果以葡萄糖计，表示到小数点后一位。 精密度： 在重复性条件下获得的两次独立测试结果的绝对差值不大于这两个测定值的算术平均值的10%，以大于这两个测定值的算术平均值的10%的情况下不超过5%为前提.    食用菌风味独特，营养丰富，具有很高的食用价值和药用价值。食用菌中的总糖含量是其重要的质量指标。GB/T 15672-2009中规定了食用菌中总糖含量的测定方法，其原理是：食用菌中水溶性糖和水不溶性多糖经盐酸溶液水解后转化成还原糖，水解物在硫酸的作用下，迅速脱水生成糖醛衍生物，并与苯酚反应生成橙黄色溶液，反应产物在490nm处比色，采用外标法定量。 实验仪器和设备： 1、分析天平：感量0.1 mg。2、鼓风干燥箱：温度精度 ±2℃。3、干燥器。4、粉碎机：备有1mm孔径的金属网筛。5、涡旋振荡器。6、恒温水浴锅：温度精度 ±1 ℃。7、可见分光光度计。孙庆磊 17615852702