尿液中毒品及代谢物检测方案(液质联用仪)

SSL-CA20-266Excellence in Science Excellence in SciencDPIMS-005 岛津企业管理(中国)有限公司-分析中心Shimadzu (China) Co.， LTD. -Analytical Applications CenterEmail： sshzyan@shimadzu.com.cn Tel：86(21)34193996http：//www.shimadzu.com.cn DPiMS-8060 快速检测尿液中毒品及其代谢物 DPIMS-005 摘要：本文使用岛津DPiMS-8060 建立并验证了测定尿液中甲基苯丙胺和氯胺酮及其代谢物的分析方法。本方法基于探针电喷雾离子化的技术手段，样品仅经过稀释，无需复杂前前理，，可在1 min 内完成毒品的准确定性定量测定。本实验对线性范围、精密度、回收率等项目均进行考察。结果表明该方法满足足法学验证要求，具有分析速度快、灵敏度高、重复性好的特点。 关键词： DPiMS-8060 毒品及其代谢物勿尿液 大多数的毒品都经过尿液排泄，尿液是目前在现场筛选吸毒者以及体内毒品确定性试验中最常见的检材。尿液中毒品常见的检测方法有酶联免疫法、胶体金免疫层析法、色谱柱质谱联用法等，其中胶体金免疫层析法应用最为广泛，色谱质谱联用法灵敏度和准确性最高。 岛津DPiMS-8060 使用超细针头在样品表面取极 少量样品，并在针上施加电压，形成纳米液滴和泰勒锥的射流，样品电离过程于ESI模式。 DPiMS-8060 具有样品前处理简单、取样量少、分析速度快、准确度高的特点，是非常有应用前景的分析技术。 本方法针对尿液中甲基苯丙胺和氯胺酮及其代谢物，使用岛津 DPiMS-8060 建立全新、快速、高效的分析方法，准确定量尿液样品中毒品的含量。 实验部分 1.1仪器 本实验使用岛津原位探针离子化质谱仪 DPiMS-8060。具体配置为： 质谱仪：LCMS-8060 离子源：探针电喷雾离子源((PESI) 色谱工作站：LabSolutions Version 5.97 1.2仪器分析条件 离子源条件 取样时间：50 msec 放电电压：2.3kV(+)/-3.0kV(-) 取样位置：46.0mm 探针清洗：0.05 min(+)/0.05 min(-) 离子化时间：160 msec 探针频率：2.78Hz 质谱条件 离子源：PESI 加热块温度：30℃ DL 温度：250℃ MRM参数：见表1 表1 MRM优化参数 No. 名称 CAS 前体离子 产物离子 Q1 Pre Bias(V) CE(V) Q3 Pre Bias(V) 甲基苯丙胺 537-46-2 150.10 91.10* -11 -18 -18 119.15 -11 -14 -26 2 苯丙胺 300-62-9 136.05 119.15 -14 -14 -22 93.05* -14 -17 -18 3 氯胺酮 6740-88-1 238.10 125.05* -12 -25 -22 220.10 -12 -14 -15 4 去甲氯胺酮 79499-59-5 224.05 207.10 -11 -11 -24 (NK) 125.00* -11 -22 -25 5 155.00 92.10* -11 -18 -18 甲基苯丙胺-d5 121.00 -11 -14 -26 6 苯丙-d5 141.20 93.10* -10 -24 -27 124.00 -10 -12 -18 7 氯胺酮-d4 242.00 129.00* -12 -25 -22 224.00 -12 -14 -15 8 228.00 去甲氯胺酮-d4 129.00* -11 -11 -24 (NK-d4) 211.00 -11 -22 -25 注：*为定量离子对 1.3标准配制 分别取毒品标准溶液，用50%异丙醇水溶液稀释，配制混合工作液，放置于4℃冰箱中保存。分别取毒品内标溶液，用50%异丙醇水溶液稀释，配制混合工作液，放置于4℃冰箱中保存。取毒品标准溶液，逐级稀释成浓度为1、2、5、10、50、100、200 ng/mL 的标准曲线工作溶液，其中内标浓度为50 ng/mL。 1.4样品及指控样品制备 取尿液样品，用10%异丙醇水溶液稀释10倍，再加入内标溶液，混合均匀后，取稀释液10 uL至液体样品板，进样分析。 取空白尿液样品，用10%异丙醇水溶液稀释10倍，再分别加入一定体积的标准溶液和内标溶液，混合均匀后，取稀释液10 uL至液体样品板，进样分析。 ■结果与讨论 2.1基质样品典型色谱图 移取10 uL 毒品工作溶液至液体样品板，进样分析得到4种目标物(50ng/mL)的MRM色谱图，见图1。 图1 4种目标分析物的MRM色谱图(50 ng/mL) 2.2线性范围 取毒品标准溶液，用50%异丙醇，逐级稀释成稀度为1、2、5、10、50、100、200ng/mL的标准曲线工作溶液，其中内标浓度为 50 ng/mL。 采用内标法建立校准曲线，四种目标分析物的线性回归方程及相关系数见表2。结果表明四种毒品在线性范围内线性相关性良好。 表2 毒品及代谢物标准曲线参数((线性回归，权重系数为Y=1/C) 化合物 校准曲线 线性范围 (ng/mL) 准确度(%) 相关系数r 甲基苯丙胺 Y=(0.132002)X+(0.0309454) 1-200 94.8-107.2 0.9995 苯丙胺 Y=(0.168855)X+(0.316889) 2-200 92.7-108.9 0.9997 氯胺酮 Y=(0.0619112)X+(0.000108545) 1-200 90.4-110.1 0.9992 去甲氯胺酮 Y=(0.0301515)X+(0.000826675) 1-200 93.8-104.9 0.9988 2.3方法精密度 分别移取浓度为5 ng/mL、50 ng/mL、200 ng/mL的标准溶液于液体样品板中，连续测量6次，计算峰面积的相对标准偏差 (RSD)。结果表明，各浓度水平峰面积的重复性在4.87-11.85%之间，说明本方法精密度良好。 表3精密度(n=6) 化合物 峰面积重复性 (RSD%) 5ng/mL 50 ng/mL 200ng/mL 甲基苯丙胺 6.60 4.87 6.92 苯丙胺 11.85 7.72 5.99 氯胺酮 8.39 5.74 8.43 去甲氯胺酮 8.93 8.21 7.86 2.4加标回收 取空白尿液用50%异丙醇水溶液稀释10倍，添加低、中、高浓度的标准溶液和一定浓度的内标溶液，每个浓度平行测试3次。四种目标分析物的加标回收率见表4，结果显示四种目标分析物的回收率在101.00%-123.78%之间， RSD 在 0.90%-6.44%之间。 表4加标回收率(n=3) 化合物 5ng/mL 10 ng/mL 50ng/mL 回收率/% RDS/% 回收率/% RDS/% 回收率/% RDS/% 甲基苯丙胺 123.78 0.99 121.12 0.90 116.93 1.54 苯丙胺 101.00 3.82 117.47 6.44 120.93 2.54 氯胺酮 113.70 1.90 105.74 0.73 102.09 1.11 去甲氯胺酮 111.40 3.71 108.40 3.33 107.46 2.59 结论 实验使用岛津 DPiMS-8060 建立尿液中毒品及其代谢物的快速定量分析方法。所建方法无需复杂前处理、不依赖液相分离、质谱检测无需消耗雾化气和脱溶剂气。本方法在1 min 内完成毒品及代谢物定量分析。方法采用内标法定量，线性范围内线性关系良好。精密度实验中，目标物各浓度水平峰面积的重复性在4.87-11.85%之间。四种目标分析物的回收率在101.00%-123.78%之间， RSD 在0.90%-6.44%之间。本方法具有方法简便、分析速度快、灵敏度高、重复性好的特点，为尿液中毒品快速筛查打开了一个新的窗口。 岛津应用云 实验使用岛津DPiMS-8060建立尿液中毒品及其代谢物的快速定量分析方法。所建方法无需复杂前处理、不依赖液相分离、质谱检测无需消耗雾化气和脱溶剂气。本方法在1 min内完成毒品及代谢物定量分析。方法采用内标法定量，线性范围内线性关系良好。精密度实验中，目标物各浓度水平峰面积的重复性在4.87-11.85%之间。四种目标分析物的回收率在101.00%-123.78%之间，RSD在0.90%-6.44%之间。本方法具有方法简便、分析速度快、灵敏度高、重复性好的特点，为尿液中毒品快速筛查打开了一个新的窗口。