成人全血中免疫分型检测方案(流式细胞仪)

Luminex 利用(GuavaQ easyCyteQ微毛细管流式细胞仪进行免疫分型分析 免疫细胞分型无论是在科学研究还是临床诊断过程中都有着极为重要的应用价值。流式细胞仪是进行免疫分型研究中最为常见的方法。 Guava easycyte 微毛细管流式细胞仪仅需微量样本即可完成多色淋巴细胞分群。 1.实验步骤如下： 1)取10ul成人全血； 2)与抗体混合，包括 CD45， CD3， CD4， CD8， CD16， CD56， CD19， CD45RA和 CD62L八种抗体，室温孵育20分钟； 3)加入180pl裂解液，室温反应15分钟； 4)上机检测； 2.数据获取及分析： 利用 SSC 和 ant-CD45 抗体圈选出CD45+的淋巴细胞，并进一步通过 SSC 和 CD3圈门； 如图所示，各细胞T、B、NK亚群清晰可见，并可对各群细胞亚群进行绝对计数，提供准确检测结果。 免疫细胞分型无论是在科学研究还是临床诊断过程中都有着极为重要的应用价值。流式细胞仪是进行免疫分型研究中最为常见的方法。Guava easycyte微毛细管流式细胞仪仅需微量样本即可完成多色淋巴细胞分群。实验步骤如下：1）取10 μl 成人全血；2）与抗体混合，包括 CD45，CD3，CD4，CD8，CD16，CD56，CD19，CD45RA和CD62L八种抗体，室温孵育20分钟；3）加入180 μl 裂解液，室温反应15 分钟；4) 上机检测；5）数据获取及分析：利用SSC和ant-CD45抗体圈选出CD45+的淋巴细胞，并进一步通过SSC和CD3 圈门；T 细胞（CD3+，CD45+）用CD4 vs.CD8 圈门，并根据CD45RA和CD62L染色结果将CD4+和CD8+ 的T细胞区别为原始和记忆细胞。为分辨NK细胞和B细胞，CD3- 的细胞进一步分为CD19+的B细胞和CD16+/CD56+的NK细胞。如图3中各细胞T、B、NK亚群清晰可见，并可对各群细胞亚群进行绝对计数，提供准确检测结果。