朱砂中汞检测方案(液质联用仪)

analytikjenaAn Endress+Hauser CompanyApplication Example -PlasmaQuant MS analytikjenaAn Endress+Hauser Company 制药应用 HPLC-ICP-MS 法测试朱砂中的二价汞 参照药典公示稿汞和砷元素形态及其价态测定法(通则2322)，， 测定未砂中二价汞含量。 背景介绍 朱砂，中药名。为硫化物类矿物辰砂族辰砂，主含硫化汞(HgS)。为粒状或块状集合体，呈颗粒状或块片状。鲜红色或暗红色，条痕红色至褐红色，具光泽。用于心悸易惊，失眠多梦，癫痫发狂，小儿惊风，视物昏花，口疮，喉痹，疮疡肿毒。 朱砂为汞的化合物，而汞与蛋白质中的疏基有特别的亲合力，高浓度时，可抑制多种酶和活动。进入体内的汞，主要分布在肝肾，而引起肝肾损害，并可透过血脑屏障，直接损害中枢神经系统。故而不宜大量服用，也不宜少量久服朱砂。 2019年9月，国家药典委员会发布关于雄黄、朱砂国家药品标准修订草案的公示，公示稿中增加了朱砂中二二汞的检测方法：按照通则2322测定，即高效液相色谱-电感耦合等离子体质谱法测定。 方法中规定限值：以二价汞计，不得过 0.10%。 ( Analytik Jena AG Konrad-Zuse-Strasse 1 07745 Jena·Germany ) Application Example -PlasmaQuant MS 样品和试剂 样品处理： 取本品粉末(过五号筛)约30mg， 精密称定，置250ml塑料量瓶中，一式2份，一份加人工胃液约200ml，另一份加人工肠液约200ml，摇匀，置37℃水浴中超声处理(功率300W，频率45kHz) 2小时(每隔15分钟充分摇匀一次)，放冷，分别用相应溶液稀释至刻度，摇匀，取适量至50ml塑料离心管中，静置20~24小时，用洗耳球轻轻吹去上层表面溶液，吸取中层溶液约15ml (吸取时应避免带入颗粒)，用微孔滤膜(10pm)滤过，精密量取续滤液2ml， 置10ml塑料量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得。同法制备试剂空白溶液。 表1校准曲线 Standard Concentration [ug/L] 氯化汞、甲基汞、乙基汞 Std.1 0.5 Std.2 1 Std. 3 5 Std. 4 10 Std.5 20 Std. 6 50 注：甲基汞、乙基汞标准溶液购自中国计量科学研究院。 仪器方法 表 2 PlasmaQuant MS & HPLC配置参数 参数 说明 功率(kW) 1.40 等离子体气(L/min) 9.0 辅助气(L/min) 1.50 雾化气 (L/min) 1.0 泵速(rpm) 30 进样深度(mm) 5 色谱柱 德国迈克Reprosil-Pur C18-AQ色谱柱 进样体积 ul 50 流速ml/min 1 运行时间 min 9 流动相 10mM乙酸铵(95)-甲醇流动相(5)，等度分离 图1专利的集成式碰撞反应池(iCRC)技术 图2专利的90°3D离子反射镜 Reflexlon 结果 表3测试结果 样品 元素 测定值(ug/L) 平行样RSD(%) 样品总量(%) 药典限量(%) 方法检出限(%) 加标20ug/L回收率(%) 朱砂 (人工胃液处理) 二价汞 16.62 3.46 0.07 0.10 0.0002 91.5 甲基汞 <0.05 1.98 <0.0002 --- 0.0002 100.1 乙基汞 <0.07 2.12 <0.0003 --一 0.0003 96.4 朱砂 (人工肠液处理) 二价汞 11.63 2.36 0.05 0.10 0.0002 90.0 甲基汞 <0.05 3.25 <0.0002 --- 0.0002 96.9 乙基汞 <0.07 2.97 <0.0003 0.0003 106.7 备注：测定值为平行样品的平均值样品含量=测定值*定容体积/称样量 回收率=(加标含量-测定值)/加标量*100% 方法检出限=3倍噪声对应的浓度*定容体积/称样量 图3 iCRC可使用He、H2气，非高真空部分对气体纯度要求低，可用在线H2发生器，大大节约气体成本 元素/质量数 曲线 二价汞 [c/s.s]. Hg2+-1.645 min，信号1 R=0.9999 2000000 1500000 1000000 500000 0- 10 20 30总量 40 50 [ug/L] ( Analytik Jena AG Konrad-Zuse-Strasse 1 07745 Jena·Germany ) 乙基汞 [c/s.s]， EtHg- 4.902 min， 信号1 R=0.9998 2500000 2000000- 11500000 1000000- 500000- 10 20 30 40 50 [ug/L] 总量 图43种汞形态的标准曲线色谱图 图5 20ppb标准溶液3次重复色谱图 讨论 ---本次实验参照2020药典公示稿：汞和砷元素形态及及价态测定法(通则2322)， 测定中药朱砂中二价汞含量。 ---样品测试双平行，并且做了加标回收实验。从数据来看，标准曲线线性良好，R值均可达到0.999；平行样品重复性好，样品加标回收率在90-107%之间，符合且远优于药典9101分析方法指导原则要求。 ---方法检出限(二价汞0.002%)远低于药典限量值0.1%，并且本方法同时分离了3种汞形态，在满足二价汞的分析需求基础上，可以扩展分析3种砷形态。从色谱图上看，3种形态峰型分离完整，标准溶液3次重复谱图重叠一致，重复性良好。 ( 德国耶拿分析仪器股份公司北京代表处：北京市东城区朝阳门北大街8号，富华大厦B座13层 电话：010-65543879， 65543849 传 真 ：010-65543265 e-ma i l： inf o @analytik-jena.com.cn ) ( Analytik Jena AG Konrad-Zuse-Strasse 1 07745 Jena · Germany ) Analytik Jena AGKonrad-Zuse-Strasse Jena· GermanyPhone ++ax +nfo@analytik-jena.comwww.analytik-jena.comDate： Phone ++ax +nfo@analytik-jena.comwww.analytik-jena.comDate： 1、本次实验参照 2020 药典公示稿：汞和砷元素形态及其价态测定法（通则 2322），测定中药朱砂中二价汞含量。2、样品测试双平行，并且做了加标回收实验。从数据来看，标准曲线线性良好，R值均可达到0.999；平行样品重复性好，样品加标回收率在90%-107%之间，符合且远优于药典9101分析方法指导原则要求；3、方法检出限（二价汞0.002%）远低于药典限量值0.1%，并且本方法同时分离了3种汞形态，在满足二价汞的分析需求基础上，可以扩展分析3种砷形态。从色谱图上看，3种形态峰形分离完整，标准溶液3次重复谱图重叠一致，重复性良好。