银杏叶提取物中黄酮苷类成分的含量检测方案(二手分析仪器)

超高效液相色谱(UPLC) 法同时测定银杏叶提取物中11种黄酮苷类成分的含量 赵一懿'，郭洪祝"，王京辉'，傅欣饮'，陈有根' (1.北京市药品检验所，北京100035) 摘要 目的：建立同时测定银杏叶提取物中11种黄酮苷类成分含量的超高效液相色谱方法。方法：采用UPLC-UV法， 色谱柱为 Agilent ZORBAX Eclipse Plus Cia (50mmX4. 6mm，，1.8Hm)， 流动相A为乙腈，流动相B为0.4%磷酸，梯度洗脱，检测波长为 360nm，流速为0.6ml·min"。结果： 11 种黄酮苷在文中所述进样量范围内线性良好，加样回收率分别为 98.48%(RSD=1.84%，n=9)， 99.98%(RSD=1.33%， n=9)， 95.81%(RSD=0.56%， n=9)， 99.49%(RSD=1.14%， n=9)， 100.34% (RSD=1.03%， n=9)， 98.05% (RSD=1.52%， n=9)，99.11%(RSD=1.93%， n=9)， 99.57%(RSD=1.62%， n=9)， 97.56%(RSD=1.80%， n=9)， 100.99%(RSD=2.03%，n=9)， 101.61%(RSD=0.82%， n=9)。44批银杏叶提取物样品中各黄酮苷类成分的含量存在差异。结论：本方法简便快速，结果准确可靠，灵敏度高，重复性好，能够较为精确全面地反映银杏叶提取物中黄酮苷类成分的含量，，可用于其质量控制研究。 关键词：银杏叶提取物：11种黄酮苷； UPLC法含量测定 ( 基金项目：北京市科技计划“研发攻关类”专题.编号：207000200540712 ) 作者简介：赵一懿，女，硕士 通讯作者： 郭洪祝，男，主任药师，博士生导师 Tel： (010)-83226434 E-mail： guohz@bidc.org.cn Simultaneous Determination of Eleven Flavonoid Glycosides in Ginkgobiloba Extract by Ultra Performance Liquid Chromatography Method ZHAO Yi-yi'， GUO Hong-zhu"， WANG Jing-hui’， FU Xin-tong'， CHEN You-gen' (1. Beijing Institute for Drug Control， Beijing 100035， China) Abstrat Objective： To establish an UPLC method for the determination of eleven flavonoidglycosides in Ginkgo biloba extract. Method： An UPLC method was established for the first timeto simultaneously qualify the eleven major flavonoid glycosides in Ginkgo biloba extract， theanalyses was performed on an Agilent ZORBAX Eclipse Plus Cis column (50mm×4.6mm， 1.8mm)， themobile phase A was acetonitrile， the mobile phase B was 0.4% phosphate， as gradient elute atthe flow rate of 0.6 ml · min"， the detection was carried out at 360 nm. Results： The resultshowed that eleven flavonoid glycosides had good linears with good average recovery， respectively.Conclusion： The method is simple， rapid， accurate， reliable， high sensitive， and can be regardedas the quantity control method of Ginkgo biloba extract. Key words： Ginkgo biloba extract； eleven flavonoid glycosides； UPLC method 银杏叶为银杏科银杏属植物银杏 Ginkgo bilobaL. 的干燥叶，该植物仅此一属一种，是中国特有品种。目前，大量的研究资料表明，银杏叶提取物能改善心脑血液循环，扩张心脑血管，改善血液流量，清除自由基，对心血管系统疾病、神经系统疾病等均有较好的疗效"。 银杏叶提取物中所含主要有效成分为黄酮类及萜类内酯类化合物。迄今为止，国内外针对银杏叶提取物的质量控制方法主要针对银杏内酯和银杏黄酮，由于黄酮类化合物难以得到原型物质，针对该类成分的分析，通常采用经过酸水解后分析苷元的方式，间接地反映原型苷，这样只能提供一个大致的轮廓， 对 各个黄酮苷类成分的真实情况难以体现。 本研究在对银杏叶提取物中黄酮苷类成分进行系统分离，得到一系列原型化合物实体基础上，采用超高效液相色谱技术建立了银杏叶提取物中11种黄酮苷类成分的含量测定方法，进而对收集的44批银杏叶提取物样品进行测定。经方法学考察，所建立的方法精密度、稳定性、重复性、准确度良好，可准确反映银杏叶提取物中各黄酮苷类成分的含量，不仅能够反映提取物的内在品质，还能对以银杏叶加工制成的制剂的质量控制具有重要的参考意义。 1仪器与试药 Waters Acquity Ultra Performance LC (UPLC)型超高效液相色谱仪(美国Waters公司)，包括在线真空脱气机、二元超高压溶剂系统、自动进样办温样本管理器、PDA检测器、Empower 2色谱工作站；十万分 之一电子天平(A CP 225D型)(德国Sartorius公司)； Cascada LS型超纯水制备仪(美国Pall公司)。对照品：芦丁(纯度90.5%，批号100080-200707)，购自中国药品生物制品检定所；皮素-3-0-(2'，6''-a-L-二鼠李糖)-B-D-葡萄糖(QRGR)、檞皮素-3-0-a-L-鼠李糖-2''-(6''’-对香豆基)-B-D-葡萄糖-7-0-B-D-葡萄糖苷(GQRcG)、檞皮素-3-0-(2''-β-D-葡萄糖)-a-L-鼠李糖苷(QRG)、山柰酚3-0-芸香糖苷(KGR)、异鼠李素-3-0-芸香糖苷(IGR)、芹菜素-7-0-β-D-葡萄糖苷(GA)、丁香亭3-0-芸香糖苷(SGR)、山山酚-3-0-(2’-β-D-葡萄糖)-a-L-鼠李糖苷(KRG)、皮素-3-0-a-L-鼠李糖-2''-(6'''-对香豆酰基)-β-D-葡萄糖苷(QRcG)、山柰酚-3-0-a-L-鼠李糖-2''-(6''’-对香豆酰基)-β-D-葡萄糖苷(KRcG)均由本实验室制备，经RP-HPLC、UV 和 NMR检测纯度分别为99%， 98%， 98%， 95%， 94%，96%， 93%， 96%， 99%和98%，化合物结构式见图1。共收集44批银杏叶提取物样品。乙腈(色谱纯， TediaCompany Inc)、甲醇(色谱纯， Honeywell Burdick & Jackson)； 其它试剂均为分析纯。 图1银杏叶提取物中11种黄酮苷类成分化学结构 Fig. 1 Chemical structures of eleven flavonoid glycosides of Ginkgo biloba extract 2方法与结果 2.1色谱条件 色谱柱： Agilent ZORBAX Eclipse Plus C18 ( 50mm×4. 6mm， 1.8wm)： 以流动相A：\：乙腈、流动相B：0.4%磷酸，进行梯度洗脱(0~12 min， A 保持 14%； 12~17 min， 14%-16% A； 17~24 min， 16%--20% A： 24~26min，20%--21%A； 26~30 min， A 保持21%；30~40 min， 21%--50% A； 40~40.1 min， 50%—14%A； 40.1~50min， A保持14%)；流速每分钟为 0.6ml；检测波长为360nm；柱温40℃；进样量为2Hl；理论板数按芦丁峰计算应不低于10000。样品色谱图见图2。 图2银杏叶提取物特征图谱 Fig. 2 LPLC chromatogram of Ginkgo biloba extract 2.2溶液制备 2.2.1对照品溶液 精密密取 QRGR、GQRcG、Rutin、QRG、KGR、IGR、GA、SGR、KRG、QRcG、KRcG 11种黄酮苷类化合物勿量，加甲醇制成每lml分别含0.043mg/ml、、0.03775mg/ml、0.08824mg/ml、0.0744mg/ml、0.09408mg/ml、0.07488mg/m1、0.00616mg/ml、0.01012mg/m1、0.04548mg/ml、 0.09272mg/ml、0.09072mg/ml的容液即得。 2.2.2供试品溶液 精密称取本品0.035g， 精密加入21%乙腈 10ml， 超声处理10分钟，用微孔滤膜(0.45Hm)滤过，取续滤液，即得。 2.3方法学考察 2.3.1线性关系 精密吸取各对照品溶液0.5u1，1.0u1， 2.0u1， 3.0u1， 4.0、5.0pl， 注入液相色谱仪，记录峰面积，以各对照品进样量(g)为横坐标，峰面积为纵坐标，绘制标准曲线，结果见表1。 表1 11种黄酮苷的回归方程、线性范围及最低检测限和最低定量限 Tab 1 The linear range， the regression equations， LOD and LOQ of eleven flavonoid glycosides (n=6) 2.3.2最低检测限(LOD) 和最低定量限(L0Q) 分别取QRGR、GQRcG、Rutin、QRG、KGR、IGR、GA、SGR、KRG、QRcG、KRcG 11种黄酮苷类对照品溶液以不同比例稀释后测定，以信噪比3为最低检测限，信噪比10为最低定量限，结果见表1。 2.3.3精密度试验 精密吸取同一供试品溶液(A厂生产， 批号T319013)进样2u1，连续重复进样6次， QRGR、GQRcG、Rutin、QRG、KGR、IGR、GA、SGR、KRG、QRcG、KRcG 峰面积的 RSD 分别为 1.35%、0.21%、0.43%、0.69%、0.96%、0.39%、0.83%、0.40%、0.61%、0.85%、0.61%，各相对标准偏差(RSD)均小于2.0%，表明仪器精密度良好。 2.3.4稳定性试验 精密吸取同一供试品溶液(A厂生产，批号 T319013)2u1，分别于配制后0、2、4、8、24、48小时，依法测定， QRGR、GQRcG、Rutin、QRG、KGR、IGR、GA、SGR、KRG、QRcG、KRcG峰面积的RSD 分别为 0.51%、0.35%、0.25%、0.93%、0.51%、0.83%、0.76%、0.43%、0.40%、0.31%、0.24%，各相对标准偏差(RSD)均小于2.0%，表明供试品溶液在48小时内基本稳定。 2.3.5重复性试验 按供试品溶液的制备方法，对同一批样品(A厂生产，批厂T319013)6份进行测定， QRGR、GQRcG、Rutin、QRG、KGR、IGR、GA、SGR、KRG、QRcG、KRcG含量分别为 18.30 mg/g、11.06 mg/g、25.42 mg/g、14.57 mg/g、15.58 mg/g、16.34 mg/g、1.20 mg/g、2.49 mg/g、17.64 mg/g36.93 mg/g、22.43mg/g，其 RSD 分别为 1.71%、1.04%、0.26%、0.36%、1.16%、0.38%、1.35%、1.54%、0.75%、0.30%、0.73%。 2.3.6准确度试验 采用加样回收法，取“重复性试验”项下的供试品，研细，各取0.017g、0.035g和0.07g，分别精密加入一定量的对照品溶液，按供试品溶液项下的制备方法操作，制成低、中、高三个浓度(50%、100%、200%)供试品溶液共9份，精密吸取供试品溶液2u1，按上述色谱条件测定， QRGR、GQRcG、Rutin QRG、KGR、IGR、GA、SGR、KRG、QRcG、KRcG三个浓度测定结果的平均回收率均小于2%，结果表明本方法具有良好的准确度，数据见表2。 表211种黄酮苷回收率测定结果* Table 2Recoveries of the eleven flavonoid glycosides° 2.3.7 样品含量测定 精密吸取各供试品溶液2u1， 注入液相色谱仪，依法测定，外标法计算各供试品中11种黄酮醇苷的含量，结果见表3. 表344批银银叶提取物中11种黄酮苷成分的含量(mg/g) Tab 3 The analytical results of eleven flavonoid glycosides in Ginkgo biloba extracts of 44 companies 3.讨论 3.1 实验过程中考察了不同提取溶剂、提取方法、和提取时间对样品提取率的影响，结果发现，超声10分钟提取效果最好；进而采用14%乙醇、14%乙腈作为溶剂进行了考察，发现 14%乙醇对某些样品的溶解性差，因此选用乙腈作为提取溶剂。考虑到提取物在色谱柱中的溶解效果，进一步对乙腈浓度进行考察，选择最佳提取条件。参考梯度表，用14%乙腈、16%乙腈、21%乙腈和24%乙腈分别作为提取溶剂考察，发现21%乙腈提取率最高，故最终选用21%乙腈作为提取溶剂。 3.2 目前，国内外针对银杏叶提取物及其制剂中黄酮苷类成分的含量测定方法都是在酸水解的基础上，采用反相 HPLC 方法测定黄酮苷元含量，再通过折算系数计算总黄酮含含量。此方法过程繁琐；水解程度控制不稳定，易导致结果不准确；更重要的是针对水解后形成的苷元间接地反映原型苷，并不能准确反映银杏叶提取物中黄酮苷类成分的真实含量。此外，迄今为止国际上一般公认的银杏叶提取物 (GBE761)质控指标为黄酮苷24%以上，萜类内酯6%以上，银杏酸 10mg/kg 以下， 是由 Schwabe药厂1991年专利中提出的“。此数值是采用紫外分光光度法以黄酮提取物标准品为对照测定，由于测定的是混合物中的含量，未经分离纯化的样品易受其其成分的干扰，测定误差较大。相比较而言，本文采用 UPLC 技术建立了银杏叶提取物中11种黄酮苷类成分的含量测定方法，以原型化合物外标法精确定量，结合银杏叶提取物黄酮类成分特征图谱(图2)和样品测定总和结果(表3)可以看出，所选取的11种黄酮苷指标成分能较为全 面反映样品中黄酮苷含量，有些提取物样品11种黄酮苷含量总和已接近20%，说明此方法准确真实地反映了银杏叶提取物中黄酮苷类成分的内在质量。 3.3 对44批银杏叶提取物中11种黄酮苷类成分进行含量测定，从表3的测定结果可以看出，无论是含量总和还是各指标成分分别比较，44批样品间含量差异显著，表明用原型黄酮苷化合物作为质控指标反映内在真实质量的重要性。此外，对11种成分含量测定结果分组分析，见图3-5。 图3银杏叶提取物中黄酮苷成分组1 Fig. 3 type one flavonoid glycosides in Ginkgo biloba extracts 图4银杏叶提取物中黄酮昔成分组2 Fig. 4 type two flavonoid glycosides in Ginkgo biloba extracts 图5银杏叶提取物中黄酮苷成分组3 Fig. 5 type three flavonoid glycosides in Ginkgo biloba extracts 可以看出具有相同糖链基团的成分含量在44批样品中分布比例趋于一致，初初推论银银叶提取物中黄酮苷类成分含量与化合物结构具有一定的相关性，样品中某一成分含量的高低与同类其它成分含量的多少一致。进一步分析，图5中有3批样品芦丁含量异常偏高，有人为添加芦丁的可能；图4中有2批样品GQRcG含量较低，与另2个成分含量比例趋势相反，考虑可能与提取工艺及原料药材来源有关。综上分析，从化学成分角度分析评价银杏叶、银杏叶提取物及其制剂的内在质量还需深入研究，对于银杏叶药材、银杏叶植物样本以及相关制剂中黄酮苷成分含量对比分析验证将后续进行。 3.4 本文所建立的基于超高效液相色谱(UPLC)法同时测定银杏叶提取物中11种黄酮苷类成分的含量测定方法，具有快速、简便、准确的特点，未见文献报道。该方法为提高银杏叶提取物及其制剂的质量控制水平，准确全面地评价其内在品质提供了有力的技术依据。 ( REFERENCES ) ( [1] Mahady G B . 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Extract as blatten von Ginkgo biloba， Verfahren zur seine herstellung and den extract enthaltende： Arzneimittel，DE 3940092 [ p]. 1 991. ) 图1银杏叶提取物中11种黄酮苷类成分化学结构 Fig. 1 Chemical structures of eleven flavonoid glycosides of Ginkgo biloba extract QRGR R=0-glc-(rha)， R=0H， R：=0H， R=H， Rs=0H GQRcG R：= 0-rha-glc~coumaroy1， Rz= 0H， Rs=0H， R=H， Rs=0-glc Rutin R=0-gle-rha， R=OH， Rg=0H， R=H， Rs=0H QRG Ri=0-rha-glc， R：=0H， R=0H， R=H， R=0H KGR R：=0-glc-rha， R：=0H， R；=H， R=H， Rs=OH IGR Ri=0-glc-rha， R：=0Me， Rs=H， R=H， Rs=0M[ GA R：= H，R：=0H， Rs=H， Ra=H， Rg=0-glc SGR R：=0-glc-rha， R：=OK， R=0Me， R=0Me， R=0H KRG R=0-rha-glc， R=0H， R=H， R.=H， Rs=0H QRcG R：=0-rha-glc-coumaroyl， Re=OH， R：=0H， R=H， R=0H KRcG R=0-rha-glc-coumaroyl， R=0H， R=H， R=H， Rs=0H 图2银杏叶提取物特征图谱 Fig. 2 UPLC chromatogram of Ginkgo biloba extract 0.08- Ⅰ彬皮素-3-0-(2'，6'-a-L-二鼠李糖)-β-D-葡萄糖苷 (QRGR) 2皮素-3-0-a-L-鼠李糖-2'-(6''-对香豆酰基)-β-D-葡萄糖-7-0-B-D-一萄糖苷 (GQRcG) 3芦丁(Rutin) 4 皮-3-0-(2'’-B-D-葡萄糖)-a-L-鼠李糖苷(QRG) 5 山柰酚-3-0-芸香糖苷(KGR) 6异鼠李素-3-0-芸香糖苷(IGR) 7芹芹素-7-0-β-D-葡萄糖苷(GA) 8丁香亭-3-0-芸香糖苷 (SGR) 9 山柰酚-3-0-(2''-β-D-葡萄糖)-a-L-鼠李糖苷(KRG) 10 皮素-3-0-a-L-鼠李糖-2''-(6'''-对香豆酰基)-B-D-葡萄糖苷(QRcG) 11 山柰酚-3-0-a-L-鼠李糖-2''-(6''-对香豆酷基)-B-D-葡萄糖苷 (KRcG) 表111种黄酮苷的回归方程、线性范围及最低检测限和最低定量限 Compounds Regression equation Range (Hg/ml) LOD(Hg/ml) L0Q(Hg/ml) QRGR y= 1762717 x + 3485 0.9999 21.23-127.35 0.64 1.61 GQRcG y=995254x+1858 0.9997 18.44-110.66 1.51 3.02 Rutin y=2987432 x +3290 0.9999 39.93-399.29 0.38 1.54 QRG y= 2342626 x + 5478 0.9999 7.27-436.04 0.48 1.21 KGR y = 2170784x-116 0.9999 44.59-445.89 0.55 1.09 IGR y=2659854 x+ 150 0.9999 35.36-353.62 0.31 1.24 GA y= 3487127 x + 692 0.9999 2.96-29.62 0.48 0.60 SGR y=3487127 x + 692 0.9999 4.71-47.11 0.51 1.27 KRG y=1775218x-1004 0.9999 4. 35-261.12 0.78 1.95 QRcG y= 1563298x +846 0.9999 45.68-456.83 0.73 1.83 KRcG y=1429585x + 1641 0.9999 44.51-445.12 2.22 6.94 * n=8 表211种黄酮苷回收率测定结果* Table 2 Recoveries of the eleven flavonoid glycosides 成分 样品中的量 加入量 测得总量 平均回收率Average RSD (n=3) (%) (Compounds) Amount in sample(mg ) Added amount (mg) Detected total amount (mg) recovery (%) QRGR 0.1585 0.1821 0.3399 99.60 1.57 0.3062 0.3642 0.6685 99.47 0.44 0.6255 0.7284 1.3273 96.36 0.68 GQRcG 0.0903 0.0960 0.1858 100.49 0.76 0.1452 0.1920 0.3393 101.09 0.22 0.2981 0.3840 0.6759 98.38 0.58 Rutin 0.2241 0.2262 0.4409 95.87 0.41 0.4482 0.4524 0.8824 95.97 0.83 0.8853 0.9048 1.7504 95.61 0.53 QRG 0.1297 0.1210 0.2487 98.36 1.42 0.2594 0.2420 0.5013 99.93 0.38 0.5114 0.4840 0.9962 100.18 0.35 KGR 0.1360 0.1104 0.2469 100.42 1.35 0.2754 0.2208 0.4955 99.68 0.41 0.5491 0.4416 0.9948 100.93 1.01 IGR 0.1416 0.1548 0.2943 98.65 0.80 0.2736 0.3096 0.5806 99.18 1.10 0.5588 0.6192 1.1553 96.34 0.50 GA 0.0107 0.0102 0.0209 100.16 0. 62 0.0204 0.0205 0.0409 100.55 0.08 SGR 0.0407 0.0410 0.0803 96.62 0.43 0.0222 0.0194 0，0419 101.56 0.87 0.0424 0.0389 0.0809 98.88 0.65 0.0848 0.0778 0.1612 98.27 0.16 KRG 0.1555 0.1552 0.3055 96.69 0.89 0.3110 0.3104 0.6102 96.39 0.82 0.6142 0.6208 1.2325 99.60 1.25 QRcG 0.3255 0.3350 0.6638 100.99 1.89 0.6510 0.6700 1.3155 99.17 1.33 KRcG 1.2859 1.3400 2.6634 102.79 1.24 0.1977 0.2096 0.4106 101.57 0.51 0.3955 0.4192 0.8207 101.43 1.00 0.7812 0.8384 1.6351 101.84 1.13 ‘每个浓度平行做3份。 "Triplicate assay at each concentration level. 表344批银杏叶提取物中11种黄酮苷成分的含量(mg/g) Tab 3 The analytical results of eleven flavonoid glycosides in Ginkgo biloba extracts of 44 companies (mg/g) 编号 QRGR GQRcG Rutin QRG KGR IGR GA SGR KRG QRcG KRcG 总和 1 7.84 8.40 18.94 6.52 10.59 10.43 0.98 2.30 10.99 24.08 16.29 117.36 2 11.50 8.90 13.10 8.80 11.36 10.27 0.80 3.02 12.08 28.02 16.22 124.07 3 16.36 12.73 20.87 9.83 16.29 15.98 1.36 2.49 15.81 30.14 22.42 164.29 4 16.27 11.05 19.71 10.97 13.79 14.56 1.13 2.09 15.01 31.87 22.47 158.93 5 2.78 3.23 10.50 7.72 10.23 7.99 1.48 2.47 15.09 59.65 40.42 161.55 6 16.83 13.78 18.36 7.43 16.12 14.86 1.19 2.11 13.42 32.75 27.15 164.00 7 16.34 12.87 20.96 10.03 16.81 16.10 1.42 2.51 15.82 30.41 22.52 165.80 8 16.50 12.82 20.85 10.03 16.53 16.06 1.42 2.53 15.97 30.45 22.49 165.63 9 13.79 7.59 18.17 8.31 15.89 13.69 1.24 2.07 14.74 22.51 16.13 134.14 10 14.84 8.16 19.35 8.22 16.63 15.42 1.57 2.17 14.80 25.57 18.20 144.94 11 14.69 8.13 19.60 8.17 17.31 15.86 1.67 2.11 15.13 26.24 19.39 148.30 12 8.12 6.07 36.82 6.87 12.66 12.93 0.90 1.72 10.41 21.56 13.73 131.79 13 8.40 6.39 37.96 6.96 12.99 13.22 0.94 1.76 10.63 21.95 13.97 135.17 14 8.02 6.05 36.80 6.61 12.47 12.58 0.83 1.69 10.23 20.97 13.00 129.24 15 15.19 13.64 18.23 7.23 16.43 14.41 1.25 2.30 13.29 31.31 25.74 159.01 16 9. 63 11.14 19.16 5.60 18.72 16.15 1.37 2.40 10.70 26.17 21.37 142.39 17 10.53 11.07 18.47 5.56 18.37 16.18 1.36 2.42 10.97 29.53 25.74 150.21 18 10.23 11.79 19.30 5.46 17.95 15.50 1.24 2.40 10.32 26.54 23.44 144.15 19 9.55 8.09 20.95 7.11 19.59 17.85 1.35 2.77 图3银杏叶提取物中黄酮苷成分组1 Fig. 3 type one flavonoid glycosides in Ginkgo biloba extracts 图4银杏叶提取物中黄酮苷成分组2 Fig. 4 type two flavonoid glycosides in Ginkgo biloba extracts 图5银杏叶提取物中黄酮苷成分组3 Fig. 5 type three flavonoid glycosides in Ginkgo biloba extracts 氨茶碱贴片的制备及家兔脐部给药的药动学研究 郑杭生，高晓宇，王丛瑶，魏颖慧，徐秀玲，叶娇云，李范珠* (浙江中医药大学药学院，浙江杭州310053) 摘要：目的制备氨茶碱贴片，并研究其经脐部给药后家兔体内的药动学特征。方法采用流涎工艺制备氨茶碱贴片，以离体大鼠腹部皮肤为透皮屏障，采用改良 Franz扩散池优选经皮渗透促进剂。健康家兔分别经灌胃氨茶碱溶液、背部与脐部敷贴氨茶氨贴片后， HPLC 法测定体内血药浓度，计算药动学参数，评价药动学特征。结果 3%(w/w)的薄荷脑-丙二醇(1：1)混合渗透促进剂为该贴剂的最佳渗透促进剂，稳态透皮速率为9.08±0.21ugcm"·h。氨茶碱溶液灌胃、贴剂背部与脐部敷贴后家兔体内的主要药动学参数：Cox分别为(13.42±1.10)、(4.53±0.39)、(5.77±0.44) ug mL； taax分别为(1.83±0.29)、 ( 基金项目：浙江省卫生高层次创新人才培养对象、浙江省自然科学基金资助(R207722)、浙江省中医药管理局项目(2007YA003) ) ( 作者简介：高晓宇，女，硕士研究 生 研究方向：药物新剂型与新技术研究 ) ( 通讯作者：李范珠，男，教授，博士生导师研究方向：药物新剂型与新技术研究 ) ( E-mail： lifanzhu@zjtcm.net ) - - 建立了同时测定银杏叶提取物中11种黄酮苷类成分含量的超高效液相色谱法。方法：采用UPLC-UV法色谱柱为Agilent ZORBAX Eclipse Plus C18（50mm-4.6mm,1.8μm），流动相A为乙腈，流动相B为0.4%磷酸，梯度洗脱，检测波长为360那么、，流速为0.6ml/min。结果：11种黄酮苷在文中所述进样量范围内线性良好，44批银杏叶提取物样品中各黄酮苷类成分的含量存在差异。结论：本方法简便快速，加过精确可靠，灵敏度高，重复性好，能够较为全面地反映银杏叶提取物黄酮苷类成分的含量，可用于其质量控制研究。