浆果中杀虫剂残留检测方案(液质联用仪)

实验方法仪器设备 结论版权所有 ◎2016， PerkinElmer， Inc. 保留所有权利。PerkinElmer@是PerkinElmer， Inc. 的注册商标。其他所有商标均为其各自持有者或所有者的财产。 引言 杀虫剂在农业中应用广泛，用于保护植物免受各种虫害和提高作物产量。但大量使用杀虫剂会危害人体健康。因此全世界都制定 有严格的法规，限定其在食品中的最高残留限值。在常规使用的实验方法中， LC/MS/MS 以其具有高灵敏度、高可靠性和精度的特点，已成为一种首选方法。 本研究使用独特的层流 UPLC-ESI-MS/MS 三极四杆质谱仪对4种品牌的非有机浆果中的40种杀虫剂进行确证和定量分析。结果表明，QuEChERs分离方法可快速可靠地分离深色的浆果样品中的杀虫剂残留。 使用珀金埃尔默公司 Altus@ A-30 UPLC@系统进行色谱分离，使用珀金埃尔默公司 QSightTM 220 MS/MS 组合双离子源进行检测。使用 Simplicity3QTM 软件平台采集和处理数据。 方法参数 液相方法和质谱离子源参数如表1所示。 表1.液相方法和质谱条件 柱温：40℃ ESI电压： 5000V 干燥气体： 120 HSID 温度： 200°C 入口电压： 30V 源温度： 325°C 雾化气体： 350 检测模式： MRM模式 溶剂、标准物及样品制备 浆果样品来自加拿大安大略省的当地杂货店。杀虫剂标准物来自ULTRA Scientific (North Kingstown， RI).)使用的所有溶剂、试剂和稀释液都为 HPLC 级纯度。 使用 Supra-dTM QuEChERS 工具包 (AOAC 2007.01 方法)制备样品。使用高速混合器将样品匀浆，然后称量10g匀浆后的样品，将其转移至装有6gMgSO4和1.5g醋酸钠的50 mL离心管中。然后加入10mL冷乙腈，涡旋搅拌，直至将盐完全混合。将溶液以3500 rpm的速度离心分离5分钟，然后将4mL上清液转夜至15 mL清洗管 (AOAC 2007.01 清洗包)中，涡旋搅拌3分钟，再离心分离5分钟。 将 0.1mL 上清液转移至 1.5 mL的离心管，使用流动相A稀释10倍。以 4000rpm 的速度离心分离5分钟。将得到的上清液转移至1.5mL 的LC进样瓶中，直接进行 LC/MS/MS 分析。 优化 MS/MS 参数 对包括气体流量、源温度等参数进行优化，实现最佳灵敏度。将Q1和Q2四杆谱峰宽度设置为0.7 amu。多反应监控模式(MRM)条件如表2所示。 表2.用于检测杀虫剂化合物相关的 MS 参数(部分清单) 化合物 前体离子 产物离子1 CE1 产物离子2 CE2 草脱净 216.1 174.1 15 132.0 20 嘧菌酯 404.1 372.1 18 344.1 34 联苯肼酯 301.1 198.0 16 170.0 20 啶酰菌胺 343.0 307.0 25 140.0 28 嘧菌环胺 226.0 93.0 48 108.0 34 氟啶虫酰胺 230.1 203.1 20 174.0 20 噻螨酮 353.0 228.0 20 168.0 34 唑菌胺酯 388.0 194.0 16 163.0 36 嘧霉胺 200.0 107.0 33 82.0 32 噻虫嗪 292.0 211.0 18 181.1 28 结果和讨论 图1为在MRM 模式下分析的1 ng/mL杀虫剂样品色谱图。即使浓度明显低于法规管控限值，检测的所有杀虫剂都仍然呈现良好的信噪比。 方法大于3个浓度数量数的线性结果良好 (R≥0.99)多数分析物为 0.1-100 ng/mL 校准曲线如图2所示。多数分析物的定量限(LOQ) 都为0.1mL， 明显低于10mL的法规管控限值。 通过在三种不同浆果的样品(树莓、黑莓和蓝莓)中加标10 ug/kg 的杀虫剂，测定杀虫剂的回收率。测定每种浆果/分析物组合的平均回收率率重现性(RSD)，结果表明浆果/分析物中的在70-115%，同时重现性<20%。从当地的杂货店购买浆果样品，使用所开发的方法检测杀虫剂残留。图3-5为目标杀虫剂呈现阳性结果的浆果样品色谱图。这些杀虫剂的计算浓度如表3所示，范围从4.5到 44.7ug/kg 不等。 图1.标准溶液中的 10ng/mL 的杀虫剂 MRM 色谱图 图2.各浓度水平 (ng/mL)进样6次的噻螨酮(a)、唑菌胺酯(b)和噻虫嗪(c)校准曲线 图3.从品牌A蓝莓中检测到的杀虫剂，分别为氟啶虫酰胺(a)、噻虫嗪(b)、嘧霉胺(c)和联苯肼酯(d) 图4.从品牌B蓝莓中检测到的杀虫剂，分别为啶定菌胺(a)、嘧菌环胺(b)、唑菌胺酯(c)和噻螨酮(d) 图5.从品牌D蓝莓中检测到的杀虫剂，只检测到噻螨酮 表3.浆果样品中发现的杀虫剂概况 杀虫剂 浓度 (ug/kg) 蓝莓(品牌A) 唑菌胺酯 11.8 氟啶虫酰胺 9.7 联苯肼酯 12.6 噻虫嗪 9.5 嘧霉胺 11.8 蓝莓(品牌B) 嘧菌环胺 16.8 唑菌胺酯 23.2 啶酰菌胺 51.1 噻螨酮 4.5 蓝莓(品牌C) N/A 蓝莓(品牌D) 噻螨酮 447.3 使用珀金埃尔默公司的 Altus UPLC系统和QSight 220三极四杆质谱仪开发出一种用于分析浆果中多种杀虫剂残留物的LC/MS/MS 方法。 ( 这些结果表明：本方法适用于高效检测和定量分析低于 10 ppb的杀虫剂，该浓度是欧盟指令第91/414/EEC 设 定的管控限值。 ) 本研究采用的简易/常规样品制备方法具有以下优点：1.使用水稀释 QuEChERS 提取物，使样品提取物与典型的反相分离相比更相容，可减少溶剂效应；2.稀释还有助于降低可能的基质影响，使得结果更准确和重现性更高。 珀金埃尔默企业管理(上海)有限公司 地址：上海张江高科技技区张衡路1670号邮编：201203电话：021-60645888传真：021-60645999www.perkinelmer.com.cn 要获取全球办事处的完整列表，请访问http：//www.perkinelmer.com.cn/AboutUs/ContactUs/ContactUs 杀虫剂在农业中应用广泛，用于保护植物免受各种虫害和提高作物产量。但大量使用杀虫剂会危害人体健康。因此全世界都制定有严格的法规，限定其在食品中的最高残留限值。在常规使用的实验方法中，LC/MS/MS 以其具有高灵敏度、高可靠性和精度的特点，已成为一种首选方法。本研究使用独特的层流UPLC-ESI-MS/MS 三极四杆质谱仪对4 种品牌的非有机浆果中的40 种杀虫剂进行确证和定量分析。结果表明，QuEChERs 分离方法可快速可靠地分离深色的浆果样品中的杀虫剂残留。