添加剂中蛋白质检测方案(定氮仪)

SinEO新仪K-332-201812 K-332-201812 凯氏定氮仪测定功能性添加剂中蛋白质的含量 1前言 功能性添加剂主要成分为酪蛋白酸钠和黄原胶、单甘酯、卡拉胶等。酪蛋白酸钠以脱脂奶粉为原料，用凝乳酶或酸(盐酸、硫酸等)沉淀法制得生酪蛋白，经脱水、膨润、中和，再喷雾干燥或冻干制得。酪蛋白酸钠含有人体所需的各种氨基酸，营养价值很高，也可作为营养强化剂食用。本实验原理为样品与浓硫酸和硫酸铜、硫酸钾一同加热消化，使蛋白质分解，分解的氨与硫酸结合生成硫酸铵，然后碱化蒸馏使氨游离，用硼酸吸收后以硫酸标准滴定溶液滴定，最后计算得出蛋白质的含量。 2仪器与试剂 2.1仪器 K1100F全自动凯氏定氮仪， SH420F石墨消解仪 2.2试剂 浓硫酸， 20g/L硼酸溶液，溴甲酚绿-甲基红混合指示剂，40%氢氧化钠。 3实验方法 3.1取样 称取样品0.3g(精确值0.1mg)左右，使用称量纸包好放入消化管内。加入混合催化剂3gK2SO4、(0.2gCuSO4， 加入12ml浓硫酸。 3.2消解 利用石墨消解炉进行消解，将消化管放在石墨炉上，盖上排气罩，连接废气吸收系统，消化完毕后，将消化管取下冷却至室温。消化过程采用曲线升温模式，设定消解参数： 阶段 温度/℃ 保持/min 1 230 20 2 350 20 3 420 90 3.3测试 将消化管放置于定氮仪上。定氮仪设置程序如下： 硼酸 稀释水 碱液 蒸馏量 蒸汽流量 滴定酸浓度(mol/L) 25mL 30mL 40mL 5min 100% 0.1028 4结果与讨论 4.1实验结果 编号 样品重量g 蛋白含量% 平均值 RSD% 样品1 0.301 28.572 28.565 0.05 0.304 28.575 0.302 28.549 样品2 0.306 27.297 27.314 0.367 0.300 27.224 0.300 27.422 4.2结论 以上实验数据显示，使用K1100F凯氏定氮仪测定功能性添加剂中的粗蛋白质数据平行性明显优于《GB 5009.5-2016食品安全国家标准食品中蛋白质含量测定》标准要求的绝对差值不得超过算术平均值的10%。 ( 参考文献 ) [1] GB 5009.5-2016食品安全国家标准食品中蛋白质的测定[S]. 注意事项 测试样品为粉末状固体，为了保证取样均匀性，取样前应将样品充分混合均匀。 -- -- 1 前言功能性添加剂主要成分为酪蛋白酸钠和黄原胶、单甘酯、卡拉胶等。酪蛋白酸钠以脱脂奶粉为原料，用凝乳酶或酸(盐酸、硫酸等)沉淀法制得生酪蛋白，经脱水、膨润、中和，再喷雾干燥或冻干制得。酪蛋白酸钠含有人体所需的各种氨基酸，营养价值很高，也可作为营养强化剂食用。本实验原理为样品与浓硫酸和硫酸铜、硫酸钾一同加热消化，使蛋白质分解，分解的氨与硫酸结合生成硫酸铵，然后碱化蒸馏使氨游离，用硼酸吸收后以硫酸标准滴定溶液滴定，最后计算得出蛋白质的含量。2 仪器与试剂2.1仪器K1100F全自动凯氏定氮仪，SH420F石墨消解仪2.2试剂浓硫酸，20g/L硼酸溶液，溴甲酚绿-甲基红混合指示剂，40%氢氧化钠。