动物组织中喹诺酮类残留物检测方案(对照品)

动物组织中喳诺酮类残留量的测定方法实验 组织中喹诺酮类残留物主要是原形药物，故一般选择原形药物作指示残留。多数代谢产物代谢较快，如脱甲基产物，可能主要存在于排泄物中，一些喹诺酮类的代谢产物，如脱甲基二氟沙星、脱乙基恩诺沙星（即环丙沙星）仍具有较强的生物活性，应列入总残留物 实验材料: 动物组织 试剂、试剂盒: 乙酸-乙腈 正己烷 磷酸盐-三乙胺缓冲液 仪器、耗材: 相色谱条件色谱柱 离心管 注射器 实验步骤: 1. 前处理 称取约2 g解冻试样，切成薄片并放入50 mL离心管中，加入20 mL 1%乙酸-乙腈溶液，均质1 min后放入超声波池中超声3 min， 4500 r/min离 心5 min，将上清液小心移入100 mL塑料离心管中，离心残渣用20 mL 1%乙酸-乙腈溶液再提取一次，合并上清液。 将合并后的上清液用乙腈饱和正己烷25 mL脱脂净化，弃去上层溶液，下层液移至100 mL烧瓶中，于40 ℃水浴中旋转蒸发近干，用氮气吹干。在残渣中加入1 mLHPLC流动相，快速混匀和超声3 min溶解残渣。将溶解液转移至1 mL —次 性注射器中，通过注射器滤膜（0.45 um）过滤至HPLC进样小瓶中，进行HPLC 测定分析。 2. 仪器参数液 相色谱条件色谱柱：4.0 mm × 250 mm× 5 um， Hyprsil ODS； 柱温：30 ℃； 洗脱模式1: 0.01 mol/L磷酸盐-三乙胺缓冲液（pH3.0）（0.68 mL磷酸用水稀释至1 L，再用三乙胺调节酸度至pH3.0）。磷酸盐-三乙胺缓冲液-乙腈（80 + 20）混合，流速：1 mL/min。 洗脱模式2: 梯度洗脱，流速 0.8 mL/min。 组织中喹诺酮类残留物主要是原形药物，故一般选择原形药物作指示残留。多数代谢产物代谢较快，如脱甲基产物，可能主要存在于排泄物中，一些喹诺酮类的代谢产物，如脱甲基二氟沙星、脱乙基恩诺沙星（即环丙沙星）仍具有较强的生物活性，应列入总残留物 实验材料:      动物组织 试剂、试剂盒:      乙酸-乙腈  正己烷   磷酸盐-三乙胺缓冲液 仪器、耗材:  相色谱条件色谱柱  离心管   注射器 实验步骤:1.  前处理 称取约2 g解冻试样，切成薄片并放入50 mL离心管中，加入20 mL 1%乙酸-乙腈溶液，均质1 min后放入超声波池中超声3 min， 4500 r/min离 心5 min，将上清液小心移入100 mL塑料离心管中，离心残渣用20 mL 1%乙酸-乙腈溶液再提取一次，合并上清液。 将合并后的上清液用乙腈饱和正己烷25 mL脱脂净化，弃去上层溶液，下层液移至100 mL烧瓶中，于40 ℃水浴中旋转蒸发近干，用氮气吹干。在残渣中加入1 mLHPLC流动相，快速混匀和超声3  min溶解残渣。将溶解液转移至1 mL —次 性注射器中，通过注射器滤膜（0.45 um）过滤至HPLC进样小瓶中，进行HPLC 测定分析。 2.  仪器参数液 相色谱条件色谱柱：4.0 mm × 250 mm× 5 um， Hyprsil ODS； 柱温：30 ℃； 洗脱模式1: 0.01 mol/L磷酸盐-三乙胺缓冲液（pH3.0）（0.68 mL磷酸用水稀释至1 L，再用三乙胺调节酸度至pH3.0）。磷酸盐-三乙胺缓冲液-乙腈（80 + 20）混合，流速：1 mL/min。 洗脱模式2: 梯度洗脱，流速 0.8 mL/min。