黑豆中粗蛋白检测方案(定氮仪)

K303-201712 海能仪器：凯氏定氮仪测定黑豆中粗蛋白的含量 1前言 黑豆营养丰富，含有蛋白质、脂肪、维生素、微量元素等多种营养成分，同时又具有多种生物活性物质。黑豆浆不像黄豆性冷，喝多了也不会拉肚子，还能提供食物中粗纤维，促进消化，防止便秘发生。本实验原理为粉碎的黑豆粉与浓硫酸和硫酸铜、硫酸钾一同加热消化，使蛋白质分解，分解的氨与硫酸结合生成硫酸铵，然后碱化蒸馏使氨游离，用硼酸吸收后以硫酸标准滴定溶液滴定，根据酸的消耗量乘以换算系数，即为蛋白质的含量。 2仪器与试剂 2.1仪器 K1100F 全自动凯氏定氮仪， SH420F石墨消解仪 2.2试剂 硫酸(分析纯)，20g/L硼酸溶液，溴甲酚绿-甲基红混合指示剂，40%氢氧化钠，混合催化剂压片(3gK2SO4、4、00.2gCuSO4)，， 0.1mol/L 硫酸标准滴定液。 35实验方法 3.1取样 样品粉碎，过筛，在110℃鼓风干燥箱内干燥1-2h， 准确称取样品0.5g(精确值0.1mg)左右，加入消化管。再加入混合催化剂 3gK2SO4、0.2gCuSO4， 加入10mL浓硫酸。 3.2消解 利用石墨消解炉进行消解，将消化管放在石墨炉上，盖上排气罩，连接废气吸收系统，消化完毕后，将消化管取下冷却至室温。消化过程采用曲线升温模式，设定消解参数： 阶段 温度/℃ 保持/min 1 230 20 2 350 20 3 420 90 3.3测试 将消化管放置于定氮仪上。定氮仪设置程序如下： 硼酸 稀释水 碱液 蒸馏量 蒸汽流量 滴定酸浓度( mol/L) 25mL 30mL 40mL 5min 100% 0.1028 4 结果与讨论 4.1实验结果 名称 样品重量g 氮含量% 蛋白含量% 平均值% RSD% 黑豆 0.5077 6.6558 41.5988 41.7283 0.28 0.5049 6.6998 41.8738 0.5083 6.6703 41.6894 0.5052 6.6802 41.7513 4.2结论 以上数据显示，使用K1100F 凯氏定氮仪测定黑豆中的蛋白质含量，所得结果误差均在允许范围之内。 ( 参考文献 ) [1] GB/T 5009.5-2016 食品安全国家标准食品中蛋白质含量检测[S] 注意事项 实验样品为粉碎后的黑豆粉，为粉末状固体，取样前应将样品充分混合均匀。 -- -- 1 前言1 前言黑豆营养丰富，含有蛋白质、脂肪、维生素、微量元素等多种营养成分，同时又具有多种生物活性物质。黑豆浆不像黄豆性冷，喝多了也不会拉肚子，还能提供食物中粗纤维，促进消化，防止便秘发生。本实验原理为粉碎的黑豆粉与浓硫酸和硫酸铜、硫酸钾一同加热消化，使蛋白质分解，分解的氨与硫酸结合生成硫酸铵，然后碱化蒸馏使氨游离，用硼酸吸收后以硫酸标准滴定溶液滴定，根据酸的消耗量乘以换算系数，即为蛋白质的含量。2 仪器与试剂2.1仪器K1100F全自动凯氏定氮仪，SH420F石墨消解仪2.2试剂硫酸（分析纯），20g/L硼酸溶液，溴甲酚绿-甲基红混合指示剂，40%氢氧化钠，混合催化剂压片（3gK2SO4、0.2gCuSO4），0.1mol/L硫酸标准滴定液。