血清中L-门冬酰胺检测方案(液相色谱仪)

科捷仪器KEJIEINSTRUMENT电话：139-5161-2855网址： www.kj17.com 反相高效液相色谱结合柱前衍生化法测定人血清中L-门冬酰胺 氨基酸是蛋白质的基本结构单位，是人体完成生理功能的必须物质，人类许多疾病的发生和发展与血液循环中氨基酸的变化有密切联系。因此，血液中氨基酸水平在临床中可作为一些疾病的诊断指针。监测体内氨基酸水平的变化，对疾病的诊断和治疗有重要参考价值。 L-门冬酰胺是机体合成蛋白质的重要氨基酸之一，在体内可水解为门冬氨酸和氨，体内正常细胞也可通过门冬酰胺合成酶合成L-ASN。1996年，Yellin and Wriston研究发现淋巴瘤细胞中门冬酰胺合成酶活性低，不能合成足够的L-ASN，必须从血液循环只能获取 L-ASN 以合成蛋白质，门冬酰胺酶能催化 L-ASN水解，迅速耗竭血液循环中的 L-ASN， 使肿瘤细胞不能获得足够的 L-ASN 导致蛋白合成抑制而凋亡，故门冬酰胺酶对淋巴瘤细胞有选择性细胞毒作用。目前，天然的火聚乙二醇修饰的 ASNase 已成为儿童急性淋巴细胞白血病联合化疗方案中的重要组成部分，对维持持儿持续完全缓解(CCR)起着不可替代的作用。 本文建立网络邻苯二甲醛柱前在线衍生反相高效液相色谱法，在方法学建立时采用 L-ASN耗竭空白人血清作为空白生物基质，能够快速、准确测定人血清中 L-ASN， 在临床研究中可用于监测 ASNase 治疗过程中患儿体内 L-ASN 的耗竭程度，为优化给药方案，降低不良反应提供重要依据。 仪器准备 仪器简介 LC-600A 智能全控液相色谱系统由 P600高压恒流泵与 UV600 紫外检测器直接构成等度分析系统。使用 WS600 工作站可以同时控制数台 P600 高压恒流泵、UV600 紫外检测器及恒温柱箱等，实行多元高压洗脱、波长扫描等功能。 应用领域 化合物检测、法医毒物分析、蛋白质组学食品检测、药物分析、环境分析、聚合物分析 传真：025-83738955 南京科捷分析仪器有限公司 QQ：2326515893 色谱条件： 色谱柱 Agilent ZORBAX Zclipse AAA (4.6mm×150mm， 5um) 流动相 A：0.01mol.L磷酸盐缓冲液(pH=7.8)B： 水-甲醇-乙腈(10：45：45) 梯度洗脱程序 0-17min， 29%B，18-32min， 100%B， 33-37min， 29%B； 进样量 15uL 流速 1ml/min 测定结果： 图3 L-ASN和内标标准溶液()、空白人血清b)和空白人血清外加 L -ASN 和内标标准品c)的色谱图 Fig 3HPLC chromatograms of L-ASN standard and the internal stand-ard a)、blank human serum 6) and blank human serum spiked with L-ASN standard and the internal standard 6) ( 传真：025-837389555 南京科捷分析仪器有限公司 ( QQ： 2 326515893 ) 氨基酸是蛋白质的基本结构单位，是人体完成生理功能的必须物质，人类许多疾病的发生和发展与血液循环中氨基酸的变化有密切联系。因此，血液中氨基酸水平在临床中可作为一些疾病的诊断指针。监测体内氨基酸水平的变化，对疾病的诊断和治疗有重要参考价值。