粮油中卵磷脂检测方案(液相色谱仪)

上海通微分析技术有限公司Unimicro (Shanghai) Technologies Co.， Ltd.地址：上海市浦东新区张江高科技园区松涛路489号C01座邮编：201203电话：021-3895358850801569(技术服务专线)传真：021-38953636邮箱： info@unimicrotech.com.cn 粮油检验卵磷脂中磷脂含量的测定高效液相色谱法蒸发光散射检测法 《GB/T 35867-2018/ISO 11701：2009》解决方案 1.背景介绍 卵磷脂，属于一种混合物，l，由磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰肌醇等多种物质组成。卵磷脂来源于动植物组织中，尤其大豆和鸡蛋中含有丰富的卵磷脂，卵磷脂被称为“第三营养素”，具有多种营养功效，如：保护肝脏，预防脂肪肝，防止肝硬化；保护心脏，对降低胆固醇、高血脂及冠心病的发病率有一定作用；促进大脑发育，增强记忆力；改善血液循环，预防动脉硬化；有助于糖尿病的血糖控制等。且美国食品药品监督管理局(FDA)明确规定：在婴幼儿奶粉里，必须添加磷脂。 本实验依据中华人民共和国国家标准《GB/T 35867-2018/ISO 11701：2009 粮油检验卵磷脂中磷脂含量的测定高效液相色谱蒸发光散射检测法》分离检测了磷脂酸(PA)、磷脂乙醇胺(PE)、磷脂酰胆碱(PC)、磷脂酰肌醇(PI)等卵磷脂成分。 2.样品制备 、 参考《GB/T 35867-2018/ISO 11701：2009 粮油检验卵磷脂中磷脂含量的测定高效液相色谱蒸发光散射检测法》 hc3.测试条件 e t、 仪器： ● Easy ept@-1020液相色谱系统，配备ELSD检测器 色谱柱： BISCHOFF PRONTOSIL Diol (250mmx4.0mm，5um) 货号：2504F410PS050 流速： 柱流速：1.0ml/min；冲洗流速： 2.0mL/min 柱温： 55C ELSD参数设置： 检测器(漂移管)温度：50℃；检测器压力：0.2Mpa(2.0bar) 表1梯度洗脱程序 时间 A% B% 流速(mL/min) 0.0 95 5 1.0 5.0 80 20 1.0 8.5 60 40 1.0 15 0 100 1.0 17.5 0 100 1.0 17.6 95 5 1.0 21.0 95 5 1.0 22.0 95 5 2.0 27.0 95 5 2.0 29 5 1.0 注：A相：将814.2mL 正己烷、170.0 mL异丙醇、15.0mL乙酸和 0.8 mL三乙胺混合B相：将844.2 mL异丙醇、140.0 mL水、15.0 mL 乙酸和0.8 mL三乙胺混合 4.测试结果 1)色谱图 图1大豆卵磷脂色谱图 No 名称 保留时间(min) 峰面积(mV*s) 峰高(mV) 峰分离度(EP) 理论塔板数 (EP) 1 磷脂酸(PA) 8.651 2046.735 105.610 8.676 5627 2 磷脂酰乙醇胺(PE) 12.363 9516.182 631.640 1.960 15546 3 磷脂酰胆碱(PC 13.140 12329.880 787.577 4.123 17359 4 磷脂酰肌醇(PI) 14.855 5636.579 340.276 2.259 18643 5 LPC(溶血磷脂酰胆碱) 16.056 551.966 21.569 0.000 10367 6 总计 30081.341 377.335 2)线性关系考察 在一定浓度范围内，以进样量的对数值为横坐标，以峰面积的对数值为纵坐标，得到一系列线性回归方程： 组份名称 标准曲线 R² 磷脂酸(PA) y=1.4030x+2.9645 0.9991 磷脂酰乙醇胺 y=1.2651x+2.8939 0.9999 磷脂酰胆碱 y=1.2642x+2.8624 0.9992 磷脂酰肌醇 y=1.2956x+2.9340 0.9968 5.结论 采用 EasySep Q-1020液相谱谱系统，配备 ELSD 检测器， BISCHOFF PRONTOSILDiol(250mmx4.0mm， 5um)色谱柱，可以实现卵磷脂中磷脂酸(PA)、磷脂乙醇胺(PE)、磷脂酰胆碱(PC)、磷脂酰肌醇(PI)等卵磷脂成分的有效分离检测。 6.配置列表 仪器配置 EasySep Q-1020二元梯度泵液相色谱仪(配自动进样器、柱温箱) Unimicro ELSD-UNIEX-7700蒸发光散射检测器 Unimicro ChromStation 色谱工作站 ● BISCHOFF PRONTOSIL Diol (250mm×4.0mm，5um)货号：2504F410PS050 olicrimun ( 网址： w w w.unimicrotech.com.cn ) 卵磷脂，属于一种混合物，由磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰肌醇等多种物质组成。卵磷脂来源于动植物组织中，尤其大豆和鸡蛋中含有丰富的卵磷脂，卵磷脂被称为“第三营养素”，具有多种营养功效，如：保护肝脏，预防脂肪肝，防止肝硬化；保护心脏，对降低胆固醇、高血脂及冠心病的发病率有一定作用；促进大脑发育，增强记忆力；改善血液循环，预防动脉硬化；有助于糖尿病的血糖控制等。且美国食品药品监督管理局（FDA）明确规定：在婴幼儿奶粉里，必须添加磷脂。本实验依据中华人民共和国国家标准《GB/T 35867-2018/ISO 11701:2009 粮油检验卵磷脂中磷脂含量的测定高效液相色谱蒸发光散射检测法》分离检测了磷脂酸（PA）、磷脂乙醇胺（PE）、磷脂酰胆碱（PC）、磷脂酰肌醇（PI）等卵磷脂成分。