防晒产品中防晒剂类化合物检测方案(液相色谱仪)

利用PerkinElmer FX-15 操作系统及第三方软件分析 简介防晒剂类化合物， 长时间暴露在来自太阳或者日满足FDA新法规要求 晒机器床的紫外线(UV) 辐射下，会对皮肤细胞的DNA造成伤害，引起基因突变，从而导致皮肤癌，在美国每年有350万这样的病例，大约11500人死亡。UV分为三种：UVC、UVB和UVA。在这三者中，UVC的波长最短，也是最危险的。幸运的是，UVC被大气中的臭氧层完全吸收。UVB的波长较短，能够穿透皮肤的外层。UVA波长较长，能够穿透进入深层皮肤，从而引起皮肤晒斑和过早老化，这两种类型的UV都能够引起皮肤基因突变，从而导致皮肤癌。 可以通过避免长时间暴露在UV光源下，或者在皮肤暴露于UV光源之前或过程中使用防晒霜的方法来防止皮肤癌。防晒霜之所以能够保护皮肤，是由于其中包含一些化合物，这些化合物可以化学吸附或者物理方式阻隔UVA和UVB。2012年夏天，美国出台了新的法规，阐明了防晒霜的生产企业使用 "broad spectrum"的术语。新法规规定，只有防晒指数 (SPF) 值不少于15，提供充分的UVA/UVB防护的防晒产品，才能在其标签上标明“broad spectrum"。SPF15是指，假设UV的强度固定，使用防晒产品来防护UVB， 使用者暴露于UV下不被灼伤的时间比未使用防晒产品者不被灼伤的时间长15倍。 本应用文献提供了同时分析五种常用防晒剂的方法，从而帮助确保防晒产品具有足够防晒级别，安全性，并且符合新法规要求。本应用文献对标称SPF30、50和100的三种防晒霜进行了分析，测定了其中各种防晒剂类化合物的含量。 试验 分别称取一定量的纯物质于20mL的容量瓶中，制备5mg/mL的欧托奎雷、辛水杨酯、甲基水杨醇和2mg/mL的阿伏苯宗及二甲苯酮的储备液。首先加入10mL异丙醇，涡旋1min，，然后超声10min。冷却至室温，乙腈定容至刻度。移取标准储备溶液0.5mL于10mL的容量瓶中，乙腈定容至刻度，制备工作标准溶液。工作标准溶液连续六次进样计算重复性。 表1.UHPLC系统及色谱条件 操作系统： Flexar FX-15 UHPLC 自动进样器： FlexarTM FX UHPLC 设置：20uL定量环，部分定量环进样模式 进样2uL 淋洗溶剂：75：25甲醇/水 进样之前和之后淋洗 UV/VIS检测器： 检测波长长序：320nm 色谱柱： BrownleeM分析色谱柱C18，150x4.6 mm，5um，产品编号：N9303513 35℃ 等梯度洗脱： 10%的流动相A(1.25%乙酸水溶液) 90%B： 1：1=乙腈：甲醇 2min乙腈洗脱和进样之后2min预平衡 流速： 1.2mL/min 软件： Agilent's@ EZChrom EliteM3.3.2版 样品速率： 5 pts/s 图1.工作标准溶液的分析色谱图 图2.30SPF防晒霜的分析色谱图 防晒乳液样品制备：分别称取0.5g30SPF、50SPF、100SPF的防晒乳液样品置于三个10mL的容量瓶中，加入5mL异丙醇，涡旋1min后，超声10min，待溶液冷却至室温，乙腈定容至刻度。样品溶液5000RPM离心10min，分别移取30SPF、50SPF、100SPF样品上层溶液3mL、2mL、1.5mL于不同的50mL容量瓶中，乙腈定容至刻度。进样之前，样品经0.2um的尼龙膜过滤。 结果与讨论 本文献使用PerkinElmerBrownleeTM C-18分析色谱柱进行分离， 5um， 150 x 4.6 mm。运行时间约8min，最佳的流速为1.2mL/min， 且压力适当，背压为2000psi(138bar)。所有被分析的五个化合物得到了很好的分离。重复性结果良好， RSD%范围为0.7-1.0。根据三种防晒霜的标尔值计算，30SPF、50SPF、100SPF的回收率分别为83%，78%和85%。工作溶液的色谱图见图1所示， 30SPF、100SPF三个样品的色谱图分别见图2，3。方法性能和防晒霜样品测定结果见表2所示。不同防晒剂最大允许量如表3所示。 化合物 重复性%RSD (n=6) SPF 30 SPF 50 SPF 100 标称 结果 % 标称 结果 % 标称 结果 % 欧托奎雷 1.03% 2.0 1.7 85.0 7.0 5.5 78.6 10.0 8.6 86.0 辛水杨酯 0.77% 5.0 4.3 86.0 5.0 4.1 82.0 5.0 4.5 90.0 甲基水杨醇 1.21% 10.0 7.9 79.0 13.0 9.7 74.6 15.0 12.2 81.3 二甲苯酮 1.09% 2.0 1.7 85.0 4.0 3.2 80.0 6.0 5.2 86.7 阿伏苯宗 0.70% 2.0 1.6 80.0 3.0 2.2 73.3 3.0 2.4 80.0 平均值 0.96% --- --- 83.0 --- --- 77.7 --- --- 84.8 表3分析防晒剂的最大允许含量(重量/重量)% 防晒剂 美国 英国 巴西 日本 欧托奎雷 10 10 10 10 辛水杨酯 5 5 5 10 甲基水杨醇 15 10 15 10 二甲苯酮 6 10 10 5 阿伏苯宗 3 5 5 10 来源： International Journal of Cosmetic Science 2012， 34， 228 结论 在世界范围内，皮肤癌的发病率持续增加，达到了流行病的程度。使用防晒霜来防止该类疾病持续增长，由此防晒霜的功效和安全越来越被关注。本应用文献提供了6min内完成五种主要防晒剂的分析方法。方法性能突出，精密度的范围为0.7%-1.2%RSD。防晒霜中该五种防晒剂化合物分析结果在美国，英国，日本和巴西规定的最大允许含量范围之内。该分析利用可靠的PerkinElmer's FX 15系统，使用Agilent’s@ EZChromEliteTM色谱数据系统进行控制来完成。 ( 参考文献 ) ( 1.American Cancer S o ciety. C ancer F a cts & Figures 2011. http：//www.cancer.org/Research/CancerFactsFigures/ CancerFactsFigures/cancer-facts-figures-2011. Retrieved June 5， 2012 . ) ( 2. Centers for Diseases Control and Prevention. http：//www.cdc.gov/cancer/skin/pdf/toolkit/ Gui d elineToolsResources.pdf， r e trieved J u ne 5， 2 0 12. ) ( 3. Skin Cancer F oundation. Skin cancer facts： http：//www.skincancer.org/skin-cancer-information/ skin-cancer-facts#general， retrieved June 5， 2 0 12. ) ( 4. F DA Regulatory Action on Sunscreen：www.FDA.gov， retrieved June 5 ，2012. ) ( Federal Register / Vol.77， N o. 9 2 / F riday， May 1 1， 2012/ Rules and Regulations Federal Register /Vol. 7 6， N o. 117 / F riday， June 1 7，2011 / Proposed Rules ) 要获取全球办事处的完整列表，请访问http：//www.perkinelmer.com.cn/AboutUs/ContactUs/ContactUs版权所有 C PerkinElmer， Inc. 保留所有权利。PerkinElmer是PerkinElmer， Inc. 的注册商标。其士所有商标均为其各自持有者或所有者的财产。 本应用文献提供了同时分析五种常用防晒剂的方法，从而帮助确保防晒产品具有足够防晒级别，安全性，并且符合新法规要求。本应用文献对标称SPF30、50和100的三种防晒霜进行了分析，测定了其中各种防晒剂类化合物的含量