丹参中丹酚酸B检测方案(纯水器)

丹酚酸B检测方法 在万众瞩目的淘宝双十一购物节时，阿里巴巴董事局主席马云发布了由他亲自主演的一个短片电影《功守道》，知名影星李连杰、甄子丹、吴京等均有出场。《功守道》为文化类公益短片，旨在宣扬中国传统文化，将太极拳等中华文化瑰宝推向整个世界。其间也穿插了其他的一些中国国粹——在其中的一幕，甄子丹在泡脚时，向水中加入了八味中药：丹参，赤芍，泽兰，王不留行、当归、大黄、牛膝、川芎。这些中药乃是知名药品“丹参泡脚片”的主方，用于足浴，可起到改善血液循环、清心活血、活血通经、消肿祛瘀的功效。 丹参泡脚片的主药是丹参。中药丹参是唇形科植物丹参 Salvia miltiorrhiza Bge.的干燥根和根茎。味苦，微寒。有活血祛瘀，通经止痛，清心除烦，凉血消痈的功效。丹参的主要有效成分包括丹参酮类和丹酚酸等。丹酚酸(salvianolic acid) 系丹参的水溶性有效成分，属酚酸类化合物。目前研究较多的有总丹酚酸(totalsalvianolic acid)、丹酚酸A (salvianolicacid A， SalA)和丹酚酸B (salvianolic acid B. SalB)。 丹酚酸B为水溶性化合物，分子式为 C36H30O16，相对分子质量为718.62。丹酚酸B也是丹酚酸的最主要成份。具有抗氧化、保护心脏、保护脑、纤维化、抗肿瘤等作用。下图为丹酚酸B结构式： 中国药典(2015版)中对丹参中的丹酚酸B检测作出了规定。RephiLe 根据药典与相关文献推出丹酚酸B含量检测解决方案。该方案采用 HPLC 检测。详细解决方案如下： 一、实验方法 高效液相色谱法(HPLC) 二、仪器和试剂 高效液相色谱仪， PURIST Pro超纯水系统 丹酚酸B标注品 三、试验方法 1、色谱条件 采用C18色谱柱，A相为乙腈，B相为0.05%磷酸水，梯度线性改变：0min： 19%A.81% B； 15 min： 23% A， 77%B； 30 min： 25%A， 75% B： 40min： 90% A，10%B。检测波长：286nm， 流速1.1mL/min；柱温30℃，进样体积2020uL。 2、标准品溶液配制 使用PURIST Pro产超纯水，精准配置浓度为1000 pg/mL的丹酚酸B水溶液， 置于色容量瓶中. 3、样品溶液制备 称取0.15g样品粉末置于三角瓶中，加入PURIST Pro产超纯水50 mL， 超声处理15min，过滤，精密量取滤液5mL， 移至10mL容量瓶中，超纯水定量至刻度。用0.45um的 RephiQuik PES针头式过滤器过滤后得试液。 4、标准曲线 分别别密吸取1000ug/mL 标准溶液 0.20mL、0.40mL、0.80 mL、1.60 mL、2.00mL于10mL容量瓶中，用PURISTPro超纯水定容。分别进样进行HPLC分析，然后以峰面积为纵坐标，以丹酚酸B的含量为横坐标，绘制标准曲线。 0 10 20 3D 40 5、试样测定 吸取10uL试液进行HPLC分析，测定其峰面积，从标准曲线计算得试液中丹酚酸B的含量。 6、结果计算 HPLC检测所需要的试剂都应该是色谱纯的试剂，纯水也不例外。乐枫提供的 PURIST Pro超纯水系统以纯水为进水，生产超纯水，水质达到或超过 GB/T 6682-2008的一级水标准和 GB/T 33087-2015 的高纯水标准。 关于PURIST Pro 超纯水仪： 1.使用两组大容量双管纯化柱，配合乐枫提供的最全系列的配方填料，灵活组合，精准满足用户的特定需求。乐枫的纯化化耗材包含低有机物型、低硼型、ICP型、低镁型等，适合HPLC、GC-MS、ICP-MS等高要求的仪器用水需求。 2. PURIST Pro 采用全氧化法在线检测 TOC， 不但满足中国药典要求，也符合ISPE 及USP对 TOC 检测方式必须通过基于完全氧化法设计的规定。 3. PURIST Pro 可配无线远程控制 Rephiblue APP， 远程查询纯水系统运行状态，追溯水质历史数据，而且可进行取水分账号管理，最多可设立10个独立账户，满足现代实验室科学管理实验用水，精准核算科研项目成本的要求。 另外，乐枫可提供各类标准所需的中英文 3Q认证和全套验证程序：IQ(安装确认)，OQ(操作确认)，PQ(性能确认)以及 GMP、GLP 环境下的维护程序，满足制药企业业于验证服务的需求。乐枫还可提供 Direct-Pure EDI 或 Direct-Pure RO纯水系统配合PURIST Pro 使用，为其提供合格的纯水，并满足实验室的日常清洗等使用。 通常试液上样前需要过滤，除掉试液内的颗粒及微生物，防止色谱柱堵塞、损坏泵等情况发生，保证仪器的操作性能及延长仪器使用寿命。乐枫提供PES、Nylon、PTFE等多种针头式过滤器，适用于各种水相及有机相的样品过滤，保证用户安全使用仪器。 关于上海乐枫生物科技有限公司 上海乐枫专业从事高端水纯化和实验室分离纯化产品的研发、设计和制造，致力力，为生命科学和生物技术提供精锐品质、高附加值的创新产品。乐枫产品线包括实验室纯水系统、密理博纯水兼容耗材和实验室分离纯化产品。成立十年，乐枫创立出了自已的品牌RephiLe(瑞枫)，拥有30多项专利和多个软件著作权。产品销往全球近90个国家和地区。 更多 RephiLe 产品信息，请登陆： www.rephile.cn RephiLe 企业微信名：乐枫纯水 见附件