唾液乳杆菌中a-酮戊二 酸检测方案(气相色谱仪)

科捷仪器KEJIEINSTRUMENT电话：139-5161-2855网址： www.kj17.com 仪器准备 传真：025-83738955 南京科捷分析仪器有限公司QQ：2326515893 气相色谱法测定唾液乳杆菌发酵过程中有机酸测定 有机酸普遍存在于生物样品、食品、环境样品以及工业化学品中，但通常样品复杂且含量很低。色谱法是有机酸分析中最常用的方法。用高效液相色谱法(紫外检测器)测定有机酸时，易受夹杂成分的干扰，引起较大误差；另外在测定小分子有机酸是需要较低的pH值，易引起色谱柱的流逝。气相色谱只能分析气态物质和具有挥发性的有机物，一般来说，气体和沸点及极性较低的液体，可以直接进样分析，但对于某些物质，由于它们的极性很强，挥发性、热稳定性较低，不适于直接进样分析，对于这类物质，可用化学处理，将其转化为相应的挥发性衍生物，在进行色谱分析，常用简单易行的方法有甲酯化、硅烷化等。 检测有机酸的色谱柱通常有两种DB-5和FFAP。使用 DB-5 的柱子要求有机酸必须经过衍生化反应， FFAP 柱可以直接测定挥发性有机酸。利用气相色谱测定有机酸在食品、微生物等方面有报导。气相色谱测定对酸性代谢产物的测定也多有文章报道。 乳酸菌的应用十分广泛，国际市场上乳酸发酵支撑的产品，是农业、纺织、化工、医药等行业的重要原料。此外还有乳酸菌饮料、酸奶、酱油等不胜枚举。近年来，人们逐渐认识到乳酸菌的生理功能及其对人体健康的作用，使乳酸菌在食品和医药等方面具有广阔的应用前景。 目前，人们对乳酸菌带线的研究主要集中在源于丙酮酸的各种代谢路径，如双乙酰途径、丙酮酸-甲酸途径、丙酮酸-氧化酶途径、丙酮酸脱氧酶途径等，其中，由于双乙酰对发酵乳品品质其有重要影响，它赋予了很多乳制品奶油味。乳制品发酵过程中双乙酰的生成途径、生成条件及调控方式一直是研究人员关注的焦点。有机酸的检测可以为代谢途径的研究提供有力支持。唾液乳杆菌是乳酸菌的一种，具有益生功能，本文采用菌株来自功能乳品教育部北京市共建重点实验室。 GC5890N 气相色谱仪(南京科捷分析仪器有限公司)是利用国际先进技术，整合国产仪器优点，进行技术革新，推出的全新一代网络型实验室气相色谱仪。 1、全兼容美国安捷伦6890N气相色谱仪，可直接接驳安捷伦 6890N 氢火焰离子化检测器、热导检测器、电子捕获检测器、火焰光度检测器、氮磷检测器及相关检测器控制板； 2、仪器技术指标、性能、检测器灵敏度可与安捷伦 6890N 相媲美； 3、可连接安捷伦色谱工作站和自动进样器。 4、广泛应用于石油、化工、食品、制药、环保、疾控、安监、水务、电力、冶金、科研院所、质检部门等领域。 传真：025-83738955 南京科捷分析仪器有限公司 QQ：2326515893 样品处理： 1mg/ml 的富马酸甲醇溶液， 2mg/ml 的丙酮酸、苹果酸、a-酮戊二酸、草酸、草酰乙酸甲醇溶液， 0.024mg/ml 的乳酸甲醇溶液，4mg/ml 的丁二酸、异柠檬酸甲醇溶液合相同浓度的各有机酸混合标准液 色谱条件： 进样方式 不分流 进样口温度 280℃ 程序升温 45℃保持2min， 然后以6℃/min 的速率升至180℃，再以10℃/min的速率升至260℃，保持 5min 载气 氮气，流速2.2ml/min 进样量 1.ng 检测器温度 280℃ 谱图分析： 图6培养基的气相色谱图 Flg.6 Organic acid gas chromatography of modla