龙胆泻肝丸中龙胆苦苷检测方案

龙胆泻肝丸中龙胆苦苷、栀子苷和黄芩苷的测定 前言 龙胆泻肝丸，清肝胆，利湿热。用于肝胆湿热，头晕目赤，耳鸣耳聋，胁痛口苦，尿赤，湿热带下。本实验采用日立超高效液相色谱仪 ChromasterUltra Rs直接转换药典方法，对龙胆泻肝丸中的主要成分龙胆苦苷、栀子苷和黄芩苷进行分析。 分析条件与仪器配置 样 品 龙胆泻肝丸(20mg/mL，50%甲醇溶解) 方法来源 2010年版《中国药典》一部修改 仪器设备 日立 UPLC-ChromasterUltra Rs： 6170泵，6270自动进样器，6310柱温箱， 6430 DAD二极管阵列检测器 色谱柱 Hitachi LaChromUltra II C18 (2*100mm， 1.9um) 检测波长 254 nm 柱 温 35°℃ 流动相 A-甲醇； B-0.2%磷酸水 等度方法 0-5min， 20%A； 5-6 min， 20-38%A； 6-15 min， 38-39%A； 15.1-15.8 min， 100%A； 15.8-16.7 min， 100-20%A；16.7-18 min， 20%A 流 速 0.6 mL/min 进样量 1uL 前处理(样品来源：市售成药) 样品适量 研碎 粉末样品适量 50%甲醇水超声提取 20 mg/mL供试品 过0.22 um滤膜后分析 供试品测定谱图 结果 名称 保留时间 峰面积 峰高 理论塔板数 最高反压 分离度 min uV*sec uV MPa 龙胆苦苷 1.992 117685 37478 9167 95 --- 栀子苷 2.227 110985 31135 9007 95 2.67 黄芩苷 9.262 296520 49196 54307 95 --- 注意事项 本实验流动相中含有磷酸，对色谱柱伤害较大，实验结束后应及时、正确清洗色谱柱以免影响柱寿命。 总结 采用日立超高效液相色谱仪 ChromasterUltra Rs 和日立 LaChromUltra II C18色谱柱，直接转化药典方法分析龙胆泻肝丸，龙胆苦苷出峰时间为 1.99 min， 理论塔板数为9167；栀子苷出峰时间为2.23 min，理论塔板数为9007；黄芩苷出峰时间为9.26 min， 理论塔板数高达54307，满足分析要求，顺利地完成了从HPLC到 UHPLC 的方法转换，实现了龙胆泻肝丸中龙胆苦苷、栀子苷和黄芩苷快速、高效的分离分析。