中药中主要物质含量分析检测方案

黄连上清丸中游离大黄素和大黄酚的测定 前言 黄连上清丸，清热通便，散风止痛。用于上焦风热所致的头晕脑胀，牙龈肿痛，，口舌生疮，咽喉红肿，耳痛耳鸣，大便干燥，，小便黄赤。本实验采用日立UHPLC-ChromasterUltraRs 直接转换药典方法，对黄连上清丸中的游离大黄素和大黄酚进行分析。 分析条件与仪器配置 样 品 黄连上清丸(28mg/mL，甲醇溶解) 方法来源 2010年版《中国药典》一部修改 仪器设备 日立 UPLC： 6170泵，6270自动进样器， 6310柱温箱，6430 DAD 二极管阵列检测 器 色谱柱 Hitachi LaChromUltra I C18 (3*100mm， 1.9um) 检测波长 254 nm 柱 温 30℃ 流动相 A-甲醇：乙腈=23：42； B-0.1%磷酸水溶液 梯度方法 0-7min， 70%A； 流 速 1mL/min 进样量 3.5 uL 前处理 加25mL甲醇浸泡10 h 过0.22 um 滤膜后分析 样品来源：市售成药 供试品测定谱图 Minutes 结果 名称 保留时间 峰面积 峰高 理论塔板数 最高反压 分离度 min uV*sec uV MPa 杂质1 2.442 10854 3340 11957 73.5 大黄素 2.598 140211 36619 10279 73.5 1.62 大黄酚 3.889 1383849 262767 12375 73.5 10.54 注意事项 本实验流动相中含磷酸试剂，对色谱柱伤害较大，实验结束后应及时、正确清洗色谱柱以免影响柱寿命。 总结 采用日立 UHPLC-ChromasterUltra Rs 和日立 LaChromUltra II C18色谱柱，直接转化药典方法分析黄连上清丸，大黄素出峰时间为2.598 min， 理论塔板数为10279；大黄酚出峰时间为3.889 min， 理论塔板数为12375，满足分析要求，顺利地完成了从 HPLC 到 UHPLC 的方法转换，实现了黄连上清丸中游离大黄素和大黄酚快速、高效的分离分析。