药食两用中药材中二氧化硫检测方案(离子色谱仪)

取5批药材，按“3”项下方法提取并制备样品溶液，进样测定，结果见表1。 表化 草珊瑚药材中依斯坦布林A的测定结果 产地 含量(%) 江西崇义 0.05249 江西上饶 0.08162 江西信丰 0.04915 江西贵溪 0.01837 江西新干 0.05701 11 讨论 11.1 根据依斯坦布林A 在草珊瑚中的提取分离条件和它的理化性质，并参照相关文献④，考察了多种流动相比例的色谱图，结果以甲醇：水(40：60)的分离效果最好。 11.2 考察了在超声处理条件下的提取时间，结果表明超声处理1h可提取完全。 11.3 我们在对草珊瑚药材进行化学成分研究时，得到了大量的倍半萜内酯类化合物依斯坦布林 A(3，并采用高效液相对依斯坦布林A 进行了含量测定。该法重现性较好，准确度较高，为草珊瑚的质量控制提供了新的定量方法和技术手段。 11.4 样品测定结果还表明，不同产地的草珊瑚药材，其依斯坦布林A成分的含量有较大差异。因此我们在对草珊瑚进行制剂研究、开发和生产时，应注意使用规范药材，这样才能比较好地控制和提高草珊瑚制剂的质量。 ( 参 考 文 献 ) ( [1]王钢力，等.肿节风的化学成分及制剂质量控制研究进 展.中草药，2003，34(8)：12. ) ( [2]K A WABATAJ， et al . Dime r ic sesquiterpenoidesters from chlorarthus serrus . Phytochemistry，1992 ，31(4)：1293. ) ( [3 ] 曾爱华，等.草珊瑚化学成分研究.中药材，2005，28 (4)：292. ) ( [4]王永兵，等.木香药材的质量评价研究-HPLC 法测定木香中2种倍半萜内酯的含量.药物分析杂志，2000，20 (6)：366. ) ( (2005-12-13收稿) ) ZENG Ai-hua， LUO Yong-ming， LIU Ning (1. Guangdong College of Pharmacy， Guangzhou 510006， China；2. Jiangxi College of Traditional Chinese Medicine， Nanchang33006； 3. Jiangxi Provincial Institute for Drug Control， NanChang 330006) Abstract Objective： To determine istanbulin A in Sarcandra glabra (Thunb.) Nakai. Methods： An RP-HPLC method was es-tablished and an hypersil ODS Cs column(4.6 mmx200 mm，5pm) was used. The detective wavelength was at 218nm. Results：Istanbulin A had a good linearity in the range of 0.135~2.16 ug. The recovery rate was 98.54%. Conclusion： This method is sim-ple， accurate and repeatable. It can be used to determine istanbulin A in Sarcandra glabra. Key wordsHPLC； Istanbulin A； Sareandra glabra 离子色谱法测定常用药食两用中药材中的二氧化硫含量 车镇涛，宗玉英 (香港中文大学中医学院，香港新界沙田) 摘要 目的：测定常用保健药食两用药材中二氧化硫含量。方法：采用酸蒸馏法及离子色谱法。结果：被测定的 32个样品中，26个样品含有二氧化硫，含量量等，多者可达3180 ug/g。用水清洗药材，二氧化硫不易除去。样品置于室外通风处或水煎煮可降低样品中二氧化硫含量，煎煮时间对煎液中残留的二氧化硫含量有一定的影响。结论：测定方法简便，精密度及重现性良好。 关键词 药食两用中药材；二氧化硫；离子色谱法 中图分类号：R284.1 文献识码：A 文章编号：1001-4454(2006)05-0444-03 不少中药材既可作为药用，又可作为食品，尤其在我国南方一带，香港澳门地区，熬汤时常根据节气在食物中加入各种具有保健功能的中药材。但是许 多中药材在加工过程中用硫磺熏蒸，药材残留过量的二氧化硫可能污染环境以及影响人体健康，各国对不同食品中二氧化硫含量限度作了相关的规定， 但是，我国目前尚无中药材中二氧化硫含量限度标准规定。本文采用酸蒸馏法及离子色谱法测定了香港地区常用药食两用中药材中二氧化硫含量，并且对降低药材中二氧化硫含量方法做了初步考察。 仪器与材料 仪器： Dionex LC 20 chromatography Enclosure：GP 40 Gradient Pump； CD 20 Conductivity Detector；AS 40 Automated Sampler。 实验样品购自香港中药材商店。试剂均为分析纯，实验用水为高纯水(电阻率为 18.2 MQ·cm)亚硫酸钠对照品 ( Batch No 0131624， Assay99.00%)，Fisher chemicals 公司提供。 2 方法与结果 2.1 色谱条件 Alltech IC Sep AN1M色谱柱(9jum，4.6×250 mm)；淋洗液为1.8 mmlL Na，CO：1.7 mmol/L NaHCO，；流速：1.0ml/min；抑制电流50 mA，进样量50 ul， 2.2 供试品溶液的制备 取样品粗粉(过一号筛)约5 g，精密称定，置于1000 ml 圆底烧瓶中，加水500 ml，接通N，保护和水蒸气装置，快速加入10 ml6 mol/L 盐酸溶液(2.3]，通蒸水蒸气，冷凝管出口处用100 ml 茶色玻璃容量瓶作接收器[4.5]接收，吸收液为10ml淋洗液(含10 mmol/L甘露醇(1.6)，并用NaOH 调 pH 值至11-12(7)，待流出液达到刻度线附近时停止接收，接收液用淋洗液定容至刻度，混匀后以0.45 um 微孔滤膜滤过，立即进样检测。样品中的二氧化硫含量高(超出线性范围之外)，则蒸馏液用淋洗液稀释后测定。 2.3 对照品贮备液的制备 精密称取亚硫酸钠对照品200.2mg(标准液临用时用碘量法标定(6))，置100ml量瓶中，加淋洗液(含10 mmol/L甘露醇(5.6)，并用0.5 mol/L NaOH 调 pH值至11-12(7])溶解并稀释至刻度，制成相当于含 SO，为 1015.6pag/ml 的对照品贮备溶液。 2.4 线性关系试验精密吸取对照品贮备溶液适量，用淋洗液稀释成浓度分别为1.0156，5.0780，10.1560，15.2340，20.3120 ug/ml(以 SO， 计)的溶液。按照上述色谱条件分离，测定。以峰面积为纵坐标，对照品浓度(ug/ml)为横坐标，得回归方程：Y=105636.5243X-51154.431，r=0.9992，表明 SO，浓度为1.016~20.312 ug/ml线性关系良好。 2.5 共存离子的干扰元几种常见的阴离子Cl，NO，POa ，SO以及 NO，在本试验条件下不干扰SO，(S02)的测定。各种离子均能获得较好的分离度。见图1。 图1 离子色谱图 1-6号峰分别为 CI.NONO；，PO，SO?，So 2.6 精密度试验 对照品溶液10.156 ug/ml，置棕色玻璃瓶内，测定前置4℃冰箱内保存，按照色谱条件每间隔30 min 测定一次，分别测定5次，结果RSD 为1.73%。表明样品保存于棕色玻璃容器的，置4℃冰箱内放置2.5h 内精密度良好。 2.7 稳定性试验 精密取同一批样品(麦冬，购自药店1)，测定前置4℃冰箱内保存，按上述测定方法(样品浓度稀释至约10 mg/ml)，依法测定。每间隔30 min 测定一次，分别测定5次，结果样品峰面积为505143，RSD 为1.94%。表明供试品在棕色玻璃容器内，置4℃冰箱放置2.5 h 内稳定。 2. 8 重现性试验 取同批次麦冬样品，按供试品溶液制备方法平行制备5份，按上述测定方法，依法测定，结果样品 SO， 含量平均为 466.3 ug/g，RSD为1.88%。 2. 9 回收率试验 取同批次麦冬样品(SO，含量为466.3 jg/g)约2 g，精密称定，精密加入亚硫酸钠对照品溶液0.8 ml(1015.6 ug/ml，以SO，计)，按供试品的制备与测定同法操作，结果平均回收率为96.56% ，RSD 为1.40%。 2.10 样品测定 取样品溶液和亚硫酸钠对照品溶液(相当于含SO， 为5.078 ug/ml，10.156 p.g/ml)分别测定。以外标二点法计算样品中二氧化硫含量。对香港地区3家不同中药材商店样品检测结果见表1。 2.11 样品经过处理后二氧化硫含量变化 2.11.1 党参样品5 g加水淘洗2次，每次约1000ml 水，清洗时间共约5 min，去去水溶液，样品滤渣连同滤纸放入圆底烧瓶，按上述测定方法，依法测定，结果样品中 SO， 含量清洗前1876 pg/g，清洗后1865 ug/g，二氧化硫含量变化不大。 2.11.2 浙贝样品置于室外通风处摊开晾晒4天后，按上述测定方法，依法操作测定，含量由2189ug/g降低至990.7 ug/g。 表1 样品中二氧化硫含量(量g/g) 样品名称 药店1 药店2 药店3 红枣 461 779 麦冬 466 588 764 玉竹 708 448 473 当归 3180 903 539 党参 1876 222 180 浙贝 2189 465 956 川贝 433 508 672 百合 542 577 1363 山药 198 110 108 薏米 未检出 芡实 未检出 黄芪 未检出 莲子 未检出 元肉 未检出 黑枣 未检出 注：空格表示未测定 2.11.3 党参、玉竹、山药、红枣、浙贝分别置带嘴的煲汤罐内，加盖文火煎煮，党参、玉竹和山药打开罐盖放冷后，将药材及煎液转移人圆底烧瓶。红枣煎煮1h后立即趁热转移人圆底烧瓶。按2.2及上述测定方法，依法操作测定，同时分别对不同煎煮时间进行观察。结果见表2。 表2 药材煎煮后二氧化硫含量变化 样品处理 浙贝 山药 党参 玉竹 红枣 药材未经处理 SO， 含量(pg/g) 2189.0 198.1 1876.44 708.0 461.4 水煎煮 30min 后 SO，含量(pg/g) 1081.5 水煎煮 45 min 后 SO， 含量(ug/g) 792.1 水煎煮 60min 后 SO， 含量(pg/g) 未检出 368.6 89.9 349.4 3 讨论 3.1 中药材用硫磺熏蒸法防腐漂白是传统的中药加工方法之一，但是残留在药材中的二氧化硫过量，会影响人体健康和影响环境空气质量。尤其是作为药食两用的具有保健功能的中药材的食品安全更应引起注意。 3.2 中药材中的二氧化硫用水清洗不易去除，样品置户外摊开晾晒或煎煮可程度不同地降低样品中二氧化硫含量，煎煮时间和煎锅密闭程度对煎液中残留的二氧化硫含量有一定的影响。 3.3 本试验色谱条件可同时分离样品中对人体健康易造成危害的亚硫酸盐、亚硝酸盐和硝酸盐。 3.4 本试验用甘露醇代替文献常用的甲醛作为稳定剂，结果稳定，样品蒸馏后应置棕色玻璃容器内，保存于冷令处，在2.5h内分析完毕。 ( 致谢：香港中文大学生物系为本研究提供离子色谱仪。 ) ( 参 考 文 献 ) ( [1]钟志雄，梁春穗，杜达安，等.离子色谱法测定食品中亚硫酸盐的应用研究.中国卫生检验杂志，2003，13(1)： 29. ) ( [2]王兆基，关锡耀，汪洁，等.中药材中二氧化硫的含量测 定、中草药，2000，31(2)：97. ) ( [3] 杨一超，许春斌.离子色谱法测定食品中总二氧化硫含量.中 国 卫生检验杂志，2004，14(4)：463. ) ( [4]潘炜，李鹏，董广彬，等.离子色谱法测定辛辣食品中的SO， (SO，)含量.化学分析计量，2004，13(5)：28. ) ( [5]温俨，崔桂芬.甲醛缓冲溶液吸收测定二氧化硫的稳 定性研究.科技研讨，2000，10(3)：29. ) ( [6]A O AC Off i cial Method 990.31， Sulfites in Foods and Bev- erages， Ion Exclusion Chromatographi c Method . @ 2000 AOAC International，47.3.46. ) ( [7 ] 时艳，刘江潮.离子色谱法普定水样中 S、SO、SO、 S0吉林地质，2001，20(2)：64. ) ( (2005-12-20收稿) ) Determination of Sulphur Dioxide in Commonly Used Chinese Herbal Medicines with BothFood and Medicine Function for Heath Care by Ion-chromatographic Method CHE Zhen-tao， ZONG Yu-ying . ( School of Chinese Medicine， The Chinese Universiry of Hong Kong， Hong Kong， China) AbstractObjective： To dertermine SO， in Chinese herbal medicine with both food and medicinal functions. Methods： A distil-ling and ion-chromatorgraphic method was applied. Results： The results indicated that among 32 commonly used Chinese herbal medi-cines， 26 samples contained sulphur dioxide， varying in its contents and up to 3180 ug/g. The amount of sulphur dioxide did notchange much after samples were washed by water. On the other hand， sulphur dioxide contents decreased after samples were exposed outdoor or boiled in water. Conclusion： The method was simple， accurate and reproducible Key words Chinese herbal medicines； Sulphur dioxide； Ion chromatography ·中药材第第期◎ China Academic Journal Electronic Publishing House. All rights reserved. http：//www.cnki.net