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摘要: 本文研究了利用毛细管区带电泳法定量测定发酵产物中洛伐他汀含量分析方法。结果表明:洛伐他汀在5.9～23.9μg/mL范围内具有良好的线性关系,相关系数r=0.9979;方法检出限为0.2μg/mL,回收率在99%左右, 日内与日间误差均小于2%。该方法简单、灵敏、高效、成本低,对洛伐他汀的检测和监控具有重要意义。
关键词: 毛细管区带电泳; 发酵产物; 洛伐他汀
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内蒙古中医药44 2008年4月45 的癌性止痛药使用情况调查统计分析如下。 1资料与方法 1.1--般资料：通过查询我院住院药房麻醉品专册登记帐册台帐，统计住院病人常用的麻醉药品：盐酸(硫酸)吗啡缓(控)释片(30mg)、可待因片(30mg)、盐酸吗啡注射液(10mg)、盐酸哌替啶注射液(50mg)的处方的药名、用法用量、用药次数、天数、总量等情况。统计分析自2005年1月至2007年12月住院癌症患者止痛药的消耗量。 1.2方法：以WHO 推荐药物的限定日剂量 DDD)，药物利用指数 DUI) 为指标。DUI>1.0，则医师处方量>DDD；DUI<1.0，则医师的日处方量规格/DDD。 2结果 统计分析结果见表1。 表1122005年至2007年麻醉药品癌症患者使用统计情况及频度分析 药品名称 消耗量(片\支) 用药总量(mg) DDD(mg) DDS 用药时间(d) DUI 哌替定 2024 101200 100 1012 1984 0.51 吗啡针 88 880 15 59 64 0.92 可待因 3400 103200 90 1147 1774.4 0.97 吗啡片 1568 47040 90 523 625.2 0.83 由表可见随着我院三阶梯治疗的推广，I吗啡用量逐年增加，哌替啶用量有所减少，但麻醉药总量呈增加的趋势。 3讨论 癌症患者中有30%~45%的发生疼痛，而晚期癌症患者中 70%有中度至重度疼痛，镇痛药的选择由弱到强，首先选择非阿片类药物，主要是非甾体抗炎药，第二阶段选择的阿片类镇痛药可待因，最后选择第三阶梯镇痛药为强阿片类药物吗啡。过去临床镇痛，多采用发生疼痛时再给止痛剂的方式，患者用药后仍然会忍受痛苦等待药物起效。三阶梯止痛提倡按时给药，避免出现疼痛。由于疼痛阈值以及对镇痛药的敏感性的个体差异大，以消除疼痛的用药剂量作为个体的合理给药方案，晚期癌症剧痛可不考虑镇痛药的剂量问题。根据国家药品监督管理局在国药管安 1998] 160号《关于癌症病人使用吗啡极量问题的通知》对癌症患者镇痛使用的吗啡应由医师根据病情需要和耐受性决定剂量，长期口服吗啡是公认的治疗癌痛的最佳方案2。口服吗啡控释片相对于注射静脉给药方便，不易产生依赖性，且使血浓度维持在稳定的水平，有效控制中重度疼痛，不良反应少。而哌替啶镇痛强度仅为吗啡的1/8，维持时间为吗啡的1/2，并且在体内的代谢产物去甲哌替啶蓄积后可导致中枢神经系统中毒而吗啡安全性相对较高，有口服和注射剂型， 一旦出现中毒可使用纳络酮解救。我院近2年中，吗啡用药量逐年增加，占麻醉性镇痛药使用的主导地位，三阶梯止痛方案在我院已逐年趋向完善合理。 ( 参考文献 ) ( [1]合理用药[M.第4版.人民卫生出版社，2003.207. ) ( [2]陈卫兵，刘艳兵，石娟，等.我院麻醉药品使用情况调查与分 析[].中国药事，2001，132)：133. ) ( [3]史文慧，印容，罗朝利，等.我院住院病人麻醉药品使用情况 调查[].中国药物滥用防治杂志，2002，( 5)：32. ) 毛细管电泳法测定发酵产物中洛伐他汀的含量 孙骥* 摘 要：本文研究了利用毛细管区带电泳法定量测定发酵产物中洛伐他汀含量的分析方法。结果表明：洛伐他汀在5.9~23.9ug/mL范围内具有良好的线性关系，相关系数r-0.9979；方法检出限为0.2ug/mL，回收率在99%左右，日内与日间误差均小于2%。该方法简单、灵敏、高效、成本低，对洛伐他汀的检测和监控具有重要意义。 关键词：毛细管区带电泳；发酵产物；洛伐他汀 中图分类号：R284.1 文献标识码：B 文章编号：1006-0979 2008)04-0044-03 洛伐他汀 LVT) 是一类强效降血脂药物，其酸式结构与内源性胆固醇合成的限速酶羟甲基戊二基辅酶 A HMG-CoA) 还原酶.2非常相似，且对该还原酶的亲和力比 HMG-CoA 高1万倍，从而竞争抑制胆固醇合成，降低细胞内胆固醇含量。近几年，利用高效液相色谱14-6、紫外分光光度法"、薄层层析色谱、超临界流体层析等测定洛伐他汀含量的报道很多，但是在2002年，M.K.Srinivas 等报道利用毛细管胶束电泳测定药物中洛伐他汀含量。本文研究了利用毛细管区带电泳来测定发酵产物中洛伐他汀含量，具有高效、快速、高灵敏度和所需样品量少等特点，可以满足实际的需要。 ( *上海交通大学生命科学技学学院200093) ) ( 2008年3月15日收稿 ) 1仪器与试剂 ACS2000 高效毛细管电泳仪： 北京彩陆科学仪器有限公司；WH-2微型漩涡混合仪： 上海沪西分析仪器厂；洛伐他汀(≥99.1%)，浙江海正股份有限公司提供；藤黄绿菌素、吩嗪-1-羧酸，自制；硼砂、NaOH均为 GR，磷酸、丙酮、苯甲酸、对硝基苯酚、苯酚、2.4-二氯苯份、(GR)无水乙醇、乙酸乙酯均为AR，以上试剂均购自上海化学试剂公司； 2实验过程 2.1样品的预处理：准确称取样品 60mg，置于5mL的离心管，分别加入0.5mL 磷酸 pH3.0)， 0.75mL乙酸乙酯，振荡提取后，5000rpm/min 离心 2min，取上清，沉淀再重复提取两次，合并上清，取1mL 乙酸乙酯层，加入内标，用75%乙醇定容至5mL备检测。提取时间的选择：按以上提取过程，分别振荡5、10、15、 表1提取时间对提取效果的影响重复测定6次) 时间 min) 5 10 15 20 含量(g/100g) 0.288 0.304 0.294 0.299 根据表1的结果，选择乙酸乙酯/磷酸pH3.0)振荡提取10min。 2.2溶液的制备 2.2.1对照品溶液A：精密称取洛伐他汀标准品2.5mg，置于5mL容量瓶中，用75%乙醇定容即得。 .2.2.2对照品溶液B：精密称取洛伐他汀标准品3mg，置于 5mL容量瓶中，用乙酸乙酯定容即得。 2.2.3内标溶液：精密称取耳嗪-1-羧酸 2.5mg， 置于5mL容量瓶中，用15mmol/L 硼砂-NaOH pH12.4)定容即得。 2.3电泳条件：实验条件：毛细管：51/43cm×5um，重力进样20s， h=15cm，操作电压13KV，温度20℃，检测波长238nm，运行缓冲液：15mmol/L硼砂-NaOH pH12.4)：无水乙醇 86：14)，每次进样前依次用 1mol/L盐酸冲洗 2min，1mol/L氢氧化钠冲洗 1min，缓冲溶液冲洗2min， 在选定的电泳条件下，洛伐他汀与内标的分离情况见图 1. A：标准溶液中洛伐他汀与内标的电泳图 B：乙酸乙酯样品处理液中洛伐他汀与内标的电泳图 图1洛伐他汀与内标的电泳图 3结果与讨论 3.1检测波长的选择：洛伐他汀228nm 处有一最大特征吸收峰，但当运行缓冲液中不添加乙醇时，洛伐他汀峰受到较多的杂峰干扰。分别以215、225、235、245、255nm为检测波长进行检测，但是波长的改变并不能屏蔽杂峰的干扰，且灵敏度降低，因此选择238nm为检测波长。 3.2内标的选择：分别选择了苯甲酸，2，4-二氯苯酚，苯酚，对硝基苯酚，藤黄绿菌素，吩嗪-1-羧酸作为内标，但苯酚峰与溶剂峰重叠，苯甲酸、2，4-二氯苯酚、对硝基苯酚在30分钟内不出峰，藤黄绿菌素灵敏度很低，都不适合做本试验的内标。只有吩嗪-1-羧酸，在 20min 以内出峰，且灵敏度高、峰形好、与样品中其他成分很好地分离，可以作为本实验的理想内标。 3.3缓冲液pH对分离的影响：在硼砂浓度为10mM， 电压 16kv的初始条件下，缓冲液pH 为 10.4、10.8、11.2、11.6、12.0、12.4的条件下，考察了pH对分离的影响。在所选定的pH范围内，洛伐他汀的峰形较好，低pH值时，洛伐他汀峰的右肩上含有较多的杂峰，随着 pH 的增大，洛伐他汀峰与其他杂峰的分离逐渐增加，但并不能达到完全分离，选择pH12.4。 3.4缓冲液浓度对分离的影响：在pH12.40，电压 10kv的初始条件下，选择硼砂浓度为5、10、15、20、25、30mM，考察硼砂浓 度对洛伐他汀与其他杂峰分离效果的影响。实验表明，随着硼砂浓度的增加，洛伐他汀的出峰时间逐渐延后，洛伐他汀峰的右肩峰逐渐渐少，且分离程度逐渐增加，但仍不能达到完全分离，当硼砂浓度达到30mM时，基线明显变差，且电流明显增加。综合以上因素，选择15mM为实验缓冲液浓度。 3.5电压对分离的影响：在10mM硼砂，pH12.40的条件下，选择了电压为7、10、13、16、19KV这几个点，考察了电压对分离的影响。实验发现，随着电压的增加，出峰时间明显缩短，洛伐他汀与其他杂峰也逐步难以分离，且在低电压，不但不能使洛伐他汀与其他杂峰达到完全分离，还导致了柱效降低，谱带呈展宽趋势。综合考虑，选择13KV作为实验电压。 3.5添加剂对分离的影响：缓冲液中无水乙醇的加入对样品中洛伐他汀峰与其他杂峰的分离起着一个十分关键的作用。有机添加剂通过改变缓冲液的粘度和 zeta电势，改变了样品中各成分的保留机制。分别配制含有2%，5%，8%，11%，14%，17%，20%乙醇的缓冲溶液，随着无水乙醇含量的增加，洛伐他汀峰的出峰时间逐步延后，与杂峰的分离程度也逐渐增加，14%时达到完全分离，综合考虑出峰时间及分辨率，选择在缓冲液中添加14%的无水乙醇。 3.6标准曲线的绘制：分别吸取59、79、99、119、139、159、179、199、219、239u1对照品溶液 A， 加入 88u1内标溶液后，用75%乙醇定容至 5mL，在选定的电泳条件下分析，测定洛伐他汀与内标的峰面积之比A。以A与洛伐他汀的质量浓度作图，结果见图2。其线性回归方程为 Y=21.1747X+0.8654，r值为0.9979，表明洛伐他汀在 5.9~23.9ug/mL 的浓度范围内与A具有较好的线性关系。 图2洛伐他汀的标准曲线 3.7最低检出限：在上述最佳条件下，产生3倍噪声信号所需要的物质浓度为该物质的最低检出限(LOD)。结果表明洛伐他汀的 LOD均为 0.2ug/mL 3.8方法回收率与精密度的测定：密称取两份40mg的样品，置于两5mL离心管中，一根离心管中加入100ul的乙酸乙酯溶液作为未加标样品，另一根加入100ul的对照品溶液B，平行预处理，处理方法见2.1，重复两次，测定结果见表2。同时对其中一组样品，连续四天，测得日内与日间精密度，结果见表3. 表2回收率测定结果 n=6) 加入量(ug) 检出量(ug) 回收率%) 偏差 RSD (%) 60 59.59 99.31 0.47 60 59.99 99.98 表3 精密度的测定结果 n=6) 样品 日内RSD(%) 日间 RSD(%) 未加标样品 1.01 0.97 加标样品 0.84 1.08 实验证明：毛细管区带电泳检测发酵产物中洛伐他汀含量是确实可行的。与高效液相色谱法相比，本方法具有操作简单，有机物消耗少，对环境的污染小，仪器成本低的优点，可以作为高效液相色谱法的有益补充。 ( 参考文献 ) ( [1]文镜，罗琳，常平，等.红曲及洛伐他汀的生理活性和测定方法研究进展.中国食品添加剂，2001，1：12-19. ) ( [2]Jozica Fruedrich， Mateja Zuzek， Mojca Bencina， Aleksa Cimerman， Ales Strancer，IvanRadez， J.Chromatography， 1995，704363-367. ) ( [3]Ye， Lily， Firby， Determinati o n o f lovastat i n i n human p lasma ) ( using Reverse-Phase H igh-Performance L i quid C h romatographywith U V， Therapeutic d rug monitoring， 2000，22 (6)：737-741 ( in Chinese). ) ( [4]张倩，郭涛，宓鹤鸣.高效液相色谱法测测定血脂平胶囊中洛 伐他汀的含量.中国药房，1998，9(2)：84. ) ( [5]张艳红，侯团章，张胜.高效液相色谱法测定红曲米中洛伐他 汀的含量.食品科学，2001，227)：68-69. ) ( [6]Yunhui Wu， Jamie Zhao， Jack H e nion， et al， Journal ofmassspectrometry，1997，32，379-387. ) ( [7]张建国，刘文华.紫外分光光度法测定洛伐他汀胶囊含量.中 国生化药物杂志，1999，20 3) ： 152. ) .网络时代医院图书馆的发展对策 吴爱平”张吴佳” 摘要：网络化、信息化已成为医院图书馆未来的发展方向，如何在网络环境下搞好医院图书馆的建设是医院图书馆当前面临的重大挑战，本文详细论述了医院图书馆在网络环境下的发展对策。 关键词：网络；医院图书馆；发展 中图分类号：R197.322 文献标识码：B 文章编号：1006-0979 2008) 04-0046-02 随着信息技术的飞速发展，文献已从过去的印刷型逐步向声像、数字化等多种形式并存的方向发展，尤其是进入21世纪以来，由于互联网的迅速应用，促成了网络环境下图书馆事业的发展，使得传统图书馆向数字化图书馆的转型迈进了一大步。 医院图书馆的现状与读者分析 医院图书馆的馆藏一般都较小，无法与大型图书馆相比，但它却有自己的优势，比如专业性强、服务群体单一、易于管理等。医院图书馆的读者比较固定，一般以医护人员居多，他们文化层次高，专业知识深，由于他们工作性质的特殊性使得他们迫切需要得到本学科最新发展动态及科学研究；他们查找的范围广泛、种类繁多，既有专业书籍又有各类书刊文献，既有中文的又有外文的；而且他们对信息的准确性、完整性要求很高，对信息检索的速度要求也较快。但是从目前大多数医院图书馆来看，却有很多不足之处，图书管理员水平较低，对读者服务的业务能力较差，很难保证读者及时准确完整地获取信息。 2网络为读者获取信息开辟了新途径 随着网络技术的发展，网络资源越来越丰富，由于它传播速度快、涉及范围广、内容更新及时，正好符合医护人员需求，因此也就倍受医护人员及其他读者的青睐，，i读者可以坐在办公室或家里通过计算机查询到自己所需要的相关信息。但是不可否认互联网也存在着一些缺陷，有些资源保存起来比较困难，还有一部分资源是需要付费的，这就很难满足各阶层读 ( *包头市第三医院图书馆014040) ) ( 2008年3月20日收稿 ) 者的需求。这些情况也给我们管理人员提出了更高的要求，怎样才能让所有读者通过网络及时准确的检索到自己所需的资料，是图书管理者今后面临的主要任务。 3对图书管理人员的素质需求 图书管理员的主要职责就是通过不断地学习使自己成为信息资源的组织者和管理者，不断地为读者提供和传播各类信息资源，以满足不同层次读者的需求。这就要求图书管理人员熟练掌握本专业知识和计算机知识，特别是互联网的使用等。 4优化馆藏，转变服务模式 4.1优化馆藏，顺应时代发展：医院图书馆应根据医护人员需求，在保持馆藏特色的基础上，顺应时代发展，逐步由单一的印刷型向多媒体方向转变，，7不断加大电子文献和网络文献的馆藏比例，从传统的文献服务向网络服务发展，信息的内容也从单一的文字型向声、光、电等多媒体转变，也就是把以借阅为主的服务形式转变为开放式、多层次、全方位的服务形式。 4.2转变服务模式，更好的为读者服务：医院图书管理员要改变传统的等待读者上门借阅的服务形式，主动研究医护人员对信息的需求，经常开展有针对性的跟踪课题服务，编写专题文摘索引等，定期为读者提供国内外最新医学动态及专题信息，真正做到为读者提供具有针对性、高质量、有特色的信息服务。 4.3建立网上导航系统，确保读者及时准确的获取信息：在网络环境下，为了提供专业性较强的信息服务，图书馆不仅要及时的从网上获取信息，并进行编辑整理；同时还要收集相关的站点，引导用户准确的在网上检索资料，当然开展这项工作必须要在有局域网的环境下进行。图书管理人员应准确的分析读者的结构和信息需求，根据实际需要和本馆的实际情况，确 O China Academic Journal Electronic Publishing House. 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