食品（肉、调料、奶粉）中富马酸二甲酯检测方案(气质联用仪)

thermoscientific应用指南 全扫描和选择离子扫描同时定性和定量食品和皮革制品中的富马酸二甲酯 吕建霞 练慧勇 余种天赛默飞世尔科技(中国)有限公司 关键词：定性；定量；富马酸二甲酯；食品；皮革制品。 1E目标 建立了一种全扫描和选择离子扫描同时进行的富马酸二甲酯的同时定性和定量的检测方法，、 y可用于食品、皮革制品、纺织品等样品中富马酸二甲酯的含量的检测。 富马酸二甲酯，19中文别名，霉克星1号，英文简称 DMF，是防霉保鲜剂。 DMF 对微生物有广泛、高效的抑菌、杀菌作用，曾广泛用于食品、饲料、烟草、皮革和衣物等防腐防霉及保鲜。DMF 会导致健康损害。根据临床试验， DMF可经食道吸入对人体肠道、内脏产生腐蚀性损害；并且当该物质接触到皮肤后，会引发接触性皮炎痛楚，包括发痒、刺激、发红和灼伤；对人类的身体健康造成了极大的危害。因此，DMF 的存在成为一种严重威胁。欧盟管制非常严格：禁止含DMF 的产品投放市场或销售，对于已经投放市场或在市场上销售的含 DMF 产品要求召回，其含量限制为 0.1mg/kg。为应对欧盟对于 DMF的严苛标准，相关部门制订了相关标准方法， 《SN/T 3623-2013出口食品中富马酸二甲酯的测定方法》以及《GB/T 28190-2011纺织品富马酸二甲酯的测定》。 本方法依据相关标准方法建立了食品及纺织品中富马酸二甲 酯的测定方法，采用全扫描和选择离子扫描同时进行的方式，一针进样同时实现定性分析和定量分析，提高工作效率，全扫描通道用于富马酸二甲酯的定性确认，选择离子扫描用于定量分析，提高检测灵敏度。 ( 3 仪器 ) Thermo Scientific'M ISQ 单四极杆气质联用仪，包括： -TRACE1310气相色谱，配分流不分流进样口； ( -ISQ L T 单 四 极杆 质 谱； ) ( - AS131 0自 动 进 样 器； ) Thermo ScientificM ChromeLeon 7.2 SR4 数据处理系统。涡旋振荡器； 旋转蒸发仪； 固相萃取装置； 天平：感量0.1mg和感量 0.01 g；离心机。 Thermo ScientificM毛细管色谱柱 TG-5 MS(30 m×0.25mmx0.25 um) (P/N 26098-1420) Thermo ScientificM 不分流衬管(P/N 453A1925 ) Thermo ScientificM 低流失进样口隔垫(P/N 31303233) Thermo Scientific M 10uL 液体进样针(P/N36520060)Thermo ScientificTM 气相色谱进样口石墨垫 0.25mm (P/N 29053488) Thermo ScientificM质谱端石墨垫 0.25mm(P/N 290VA191) Thermo ScientificM 2mL进样小瓶(P/N C4000-88W) Thermo ScientificM 2mL进样小瓶样品架 (5×10，C4012-25) Thermo ScientificM 10 ~ 100uL 移液器 (JH91538)Thermo ScientificM 100 ~1000pL 移液器(JH91348) 甲醇：色谱级。 乙酸乙酯：色谱级。 无水硫酸钠，用前在500℃马弗炉内烘5 h，200℃时取出贮存于干燥器中，冷却备用。 活性炭固相萃取小柱：500mg， 3mL 或相当者。 中性氧化铝固相萃取小柱：1g， 3mL或相当者。 标准储备溶液 准确称取适量标准品(精确至0.1mg)，用甲醇溶解，配制成浓度为 1 mg/mL的标准储备溶液，-18℃避光保存，有效期为12个月。 标准中间溶液 移取一定体积的富马酸二甲酯标准储备溶液用甲醇稀释为 10.0 ug/mL 的中间液，避光-18℃保存，有效期为6个月。 6：标准工作曲线溶液的制备 根据需要将标准中间溶液用甲醇稀释成适当浓度的标准工作液，现用现配。 7样品制备 称取5g样品(精确到0.01g)置于50mL具塞离心管中，再加入15mL乙酸乙酯，涡旋振荡5min，以 8000r/min 离心5min，将上清液倒入150mL梨形瓶，再用15mL乙酸乙酯重复上述提取步骤，合并收集液于梨形瓶。在旋转蒸发仪上浓缩至大约2mL，待净化。 按中性氧化铝小柱在下，活性炭小柱在上的顺序将二者串联，活性炭柱上加1cm 高的无水硫酸钠，5mL乙酸乙酯活化，上样并收集，再用3mL乙酸乙酯将梨形瓶清洗后上样洗脱并收集，合并收集液定容到5mL，待测。 8仪器条件 ( a)色谱 柱： TG-5MS(30 m x0 .2 5 mm× 0. 25 pm) 石英 毛 细 管柱 或相当者； ) b) 色谱柱温度：50℃保持1 min， 先以10℃ /min 程序升温至300℃，保持5 min； c)进样体积：1uL； d)载气：氦气，纯度≥99.999%，流速 1.0mL/min；e)进样口温度：260℃； f) 进样方式：不分流进样，不分流时间，1 min； g)El源：度度300℃；扫描模式：全扫描和选择离子同时检测，全扫描范围50-200；选择离子113*，59，114，85； h) GC-MS 接口温度：280℃； 9结果与讨论 9.1.1全扫描和选择离子扫描同时进行 ISQ 系列单四级杆气质联用仪具有最快的扫描速度，可达20000amu/s， 每秒钟可采集>100张质谱图。快速的扫描速度使得 ISQ 系列单四级杆气质联用仪可将不同扫描技术随意组合，并可得到高质量的谱图。不同扫描技术的组合可以同时兼顾定性和定量分析，而且无论是全扫描还是 SIM，1一次 进样分析可以随意的设置分段，没有数目限制。本方法中对富马酸二甲酯的检测就采用了全扫描和选择离子扫描同时进行的方法，一针进样，同时实现定性和定量分析。全扫描通道对阳性样品进行定性确认，选择离子扫描通道提高检测灵敏度，对含量进行定量计算。 9.2扫描方式的设置 方法设置中在质谱参数的界面，如图1，全扫描参数和选择离子扫描参数分别在各自的行中进行设定，注意 dwell time 需要设置合适的时间，使得 total scan time 在 0.3s 左右，以保证色谱峰上有足够的点数。 图1方法设置界面 9.3典型色谱图 标准溶液直接进样得到的谱图如下，一针进样通过选取不同的通道，可以得到全扫描谱图和选择离子扫描的谱图，如图2，上图为为全扫描通道，下图为选择离子扫描的通道。通过全扫描通道进行定性分析，选择离子扫描通道灵敏度高，进行定量分析。 图2富马酸二甲酯的标准溶液图谱，上图为全扫描通道，下图为选择离子子描通道 9.4 定量离子和检出限 富马酸二甲酯的结构和质谱图如图3，定性时，样品中目标物的质谱图经背景校正后，进行定性，匹配度一般达到800以上。定量时选择113作为定量离子，外标法定量。方法检出限为 0.01mg/kg. 图3富马酸二甲酯的质谱图 9.5加标回收实验 用空白样品加标方法进行回收率和精密度实验。分别对肉、调料、奶粉三种空白基质进行加标试验，添加的量相当于样品中含0.05 mg/kg， 0.1mg/kg 和0.2mg/kg 的富马酸二甲酯，每个加标水平分别进行3次平行分析。配置标准溶液浓度为 0.01， 0.02， 0.05， 0.1， 0.2mg/L的系列，在同样仪器条件下进样，得到的峰面积对浓度做标准曲线，外标法定量。加标样品进样，计算平均回收率和相对标准偏差，当添加水平在0.05 mg/kg， 0.1mg/kg 和 0.2mg/kg时，富马酸二甲酯的回收率在86.2%~103.8%之间，相对标准偏差2.9%~8.4%。 样品，样品加标，标准品对比的谱图见图4，自上而下依次为标准溶液、样品、0.05mg/kg加标样品、0.2mg/kg 加标样品。由图可见，样品的净化效果较好，样品基质对检测的干扰基本不存在。 Area： 19592 ·DMF 6.65 counts ：4969 ·Area： -DMF6.65RT： 1 图4标准溶液、样品、样品加标的谱图 10结论 实验结果表明，采用固相萃取净化，气质联用仪测定食品以及皮革制品中的富马酸二甲酯，谱图背景干扰小，具有良好的准确度和精密度，方法检出限也满足检测要求。赛默飞世尔科技的 ISQ系列单四级杆气质联用仪具有极快的扫描速度，.，可将不同扫描技术随意组合，并可得到高质量的谱图。不同扫描技术的组合可以同时兼顾定性和定量分析，而且无论是全扫描还是SIM，一次进样分析可以随意的设置分段，没有数目限制。本方法中对富马酸二甲酯的检测就采用了全扫描和选择离子扫描同时进行的方法，一针进样，同时实现定性和定量分析。该技术大大提高工作效率，提升检测的可靠性，值得推广应用。 学俱乐部 谱应用技术群 赛默飞世尔科技(中国)有限公司 www.thermofisher.com