托法替尼中有关物质检测方案(制备液相色谱)

Agela Technologies博纳艾杰尔产品应用案例 博纳艾杰尔产品应用案例 托法替尼分析报告 AP10080应用及技术服务部 摘要：本实验采用高效液相色谱 (HPLC) 法，按照客户提供的检测方法，使用 Venusil MP C18 (5um， 100A， 4.6×250mm)色谱柱对托法替尼中有关物质进行了测定。结果表明：流动相为磷酸盐缓冲液与乙腈梯度洗脱时，供试品溶液中托法替尼与相邻杂质峰分离效果较好，能够满足检测要求。 关键词：高效液相色谱法；托法替尼； VenusilMP C18色谱柱 前言 托法替尼(Tofacitinib)是一种强效 Janus 激酶3(JAK3)抑制剂，而且还带有一些JAK-1抑制活性。它会阻止下游 STAT 信号导致强效抑制炎性细胞因子产生的免疫抑制和抗炎活性。托法替尼(Tofacitinib)正在研究用于一些自身免疫性疾病包括类风湿关节炎，银屑病。 表1.托法替尼化学信息 化合物名称 英文名 结构式 分子式 分子量 CAS号 托法替尼 Tofacitinib N= C16H20N6O 312.37 477600-75-2 实验部分 仪器、试剂与材料 试剂材料 屈臣氏水；；乙腈、磷酸为色谱纯；!；磷酸氢二钠为分析纯； 磷酸盐缓冲液：：C 0.025 mol/L 磷酸氢二钠，用磷酸调节 pH=4.5； 托法替尼供试品溶液：无色透明液体，由某医药公司提供； 高效液相色谱柱： VenusilMP C18； 5 um， 100 A，，4.6×250mm。 色谱条件 色谱柱：VenusilMP C18；} ；5 u5 um， 100 A； 4.6×250mm； 流动相A：磷酸盐缓冲液：乙腈=90：10(v/v)； 流动相B：磷酸盐缓冲液：乙腈=50∶50(v/v)； 流速1.0mL/min：柱 温 40℃： 波 长：216nm； 进样量：220pL； 梯度： 表2.液相色谱梯度洗脱条件 时间/min A/% B/% 0 100 0 40 0 100 50 0 100 50.1 100 0 60 100 0 结果与讨论 本实验采用Venusil MP C18色谱柱测试托法替尼供试品溶液中有关物质，由表3及图1可知，流动相使用磷酸盐缓冲液与乙腈梯度洗脱时，托法替尼峰形良好，与相邻杂质分离度较好。 表2.托法替尼供试品溶液测试结果 色谱峰序号 保留时间/min 理论塔板数 拖尾因子 分离度 1 15.843 78217 0.80 2 17.481 83253 0.95 7.00 ( Email： s e r vi c e@ag e l a .co m. cn 网址： w w w. ag e la.co m . c n 客服：400-606-8099 ) 图1.托法替尼供试品溶液高效液相色谱图 结论 根据实验结果，使用 Venusil MP C18 色谱柱(5 um， 100A， 4.6×250 mm)测试托法替尼中有关物质。供试品溶液中托法替尼峰与相邻杂质分离度为7.00，分离效果较好，能够满足检测要求。 附：相关产品 产品名称 规格描述 包装数量 订货号 VenusilMP C18 5 um， 100 A， 4.6×250mm 1支 VA952505-0 1.5 mL样品瓶 短螺纹透明带书写处32×11.6mm 100/PK 1109-0519 1.5 mL 样品瓶盖 9 mm中心孔蓝盖，红色橡胶/米色 PTFE 隔垫45°Shore A； 1.0 mm 100/PK 0915-1819 微孔滤膜 单膜， 13 mm， 0.45 um 100个/包 AS021345-T 一次性注射器 2 mL 无针头 100支/包 LZSQ-2ML 乙腈 4L/瓶，色谱纯 4x4L/箱 AH015-4 ( Email： s e r vi c e@ag e l a .co m. cn 网址： w w w .ag e la.co m . c n 客服：400-606-8099 ) 地址：天津经济开发区西区南大街 邮编：话： 传真：mail： service@agela.com.cn 网址： www.agela.com.cn 客服： 地址：天津经济开发区西区南大街 邮编：话： 传真：