胞磷胆碱钠中有关物质检测方案(制备液相色谱)

Agela Technologies博纳艾杰尔产品应用案例 胞磷胆碱钠原料药分析报告 AP10180 应用及技术服务部 摘要：本实验采用高效液相色谱法结合紫外检测器，选择Venusil MP C18色谱柱(5 um， 100A，4.6×250 mm)对胞磷胆碱钠原料药进行了测试。结果表明：流动相为甲醇和磷酸盐缓冲液，等度洗脱时，测得有关物质供试品溶液中胞磷胆碱与相邻杂质峰分离渡为2.17，能够满足检测要求。 关键词：高效液相色谱法；紫外检测器；胞磷胆碱钠原料药；VenusilMP C18色谱柱 前言 胞磷胆碱钠，为核酸类衍生物。用于治疗急性颅脑外伤和脑手术后意识障碍，对脑中风所致的偏瘫可逐渐恢复四肢的功能，也可用于其他中枢神经系统急性损伤引起的功能和意识障碍，也用于缺血性脑血管病和血管性痴呆等症。 表1.胞磷胆碱钠化学信息 样品名称 英文名 结构式 分子式 分子量 CAS 编号 NH2 Citicoline N 胞磷胆碱 .OH C14H25N4NaO11P2 510.31 33818-15-4 sodium O· OH OO Nat 实验部分 仪器、试剂与材料 试剂材料 实验用水为屈臣氏蒸馏水；四丁基氢氧化铵、甲醇均为色谱纯试剂； 待测样品：某医药公司提供； 高效液相色谱柱：：V VenusilMP C18； 5 um， 100 A；4.6×250mm。 样品制备 ( Email： s e r vi c e@ag e l a .co m. cn 网址： w w w. ag e la.co m . c n 客服：400-606-8099 ) 称取本品粉末2.0 mg， 置10 mL样品瓶中，加水溶解，混匀，经0.45 um 滤膜过滤，取续滤液作为供试品溶液。 色谱条件 色谱柱：VenusilMP C18； 5 um， 100 A； 4.6x250mm； 四丁基氢氧化铵溶液：量取 13.04mL 四丁基氢氧化铵(10%)， 加水 500mL，用20%磷酸调节 pH值至4.5； 磷酸盐缓冲液：量取 0.1mol/L 磷酸二氢钾溶液500mL， 加上述四丁基氢氧化铵溶液500mL，混匀。 流动相：甲醇：磷酸盐缓冲液=3：97(v/v)； 波长：276nm： 柱温：30℃； 流速：1.0mL/min； 进样量：20uL。 结果与讨论 本实验采用 Venusil MP C18 色谱柱对胞磷胆碱钠原料药中有关物质进行了测试。由表2和下图可知，流动相为甲醇和磷酸盐缓冲液，等度洗脱，对供试品溶液中胞磷胆碱与相邻杂质峰分离效果较好。 表2.胞磷胆碱钠供试品溶液测试结果 序号 化合物名称 保留时间/min 理论塔板数 拖尾因子 分离度 1 胞磷胆碱 6.840 11267 1.12 2 未知杂质 7.465 8860 1.22 2.17 mAU 500- 400- 300 200- 100 0 17.5 min 地址：天津经济开发区西区南大街179号 邮编：300462 电话：022-25321032 传真：022-25321033 Email： service@agela.com.cn 网址： www.agela.com.cn 客服：400-606-8099 图1. VenusilMP C18色谱柱用于胞磷胆碱钠供试品溶液高效液相色谱图 图2. VenusilMP C18胞磷胆碱钠供试品溶液高效液相色谱图(纵坐标局部放大) 结论 本实验使用 Venusil" MP C18 色谱柱(5 um； 100 A； 4.6x250 mm)，对胞磷胆碱钠原料药有关物质进行了测试，实验结果表明流动相为甲醇和磷酸盐缓冲液等度洗脱时供试品溶液中胞磷胆碱与相邻杂质峰分离度为2.17>1.5，能够满足检测要求。 附：相关产品 产品名称 规格描述 包装数量 订货号 Venusi MP C18 5 um，100 A， 4.6×250 mm 1支 VA952505-0 分析型色谱柱温箱 室温+5-50℃，箱内一对夹套 1个 CC-100 保护柱套 适用于 4.6×10mm 和2.1×10mm 1支 SH-100 直联式保护柱芯 5 um， 150A； 4.6x10mm 4/pk VX950105-0S 1.5 mL样品瓶 短螺纹透明带书写处32×11.6 mm 100/pk 1109-0519 1.5mL样品瓶盖 9mm 中心孔蓝盖，红色橡胶/米色 PTFE 隔垫45°Shore A； 1.0 mm 100/pk 0915-1819 微孔滤膜 单膜，13 mm， 0.45 um 100个/包 AS021345-T 一次性注射器 2 mL 无针头 100支/包 LZSQ-2ML ( 电话：022-25321032 传真：022-25321033 ) ( Email： s e r vi c e@ag e l a .co m. cn 网址： w w w. ag e la.co m . c n 客服：400-606-8099 ) 地址：天津经济开发区西区南大街 邮编：话： 传真： 地址：天津经济开发区西区南大街 邮编：