西他沙星中杂质检测方案(液相色谱仪)

Agela Technologies博纳艾杰尔产品应用案例 博纳艾杰尔产品应用案例 西他沙星制备案例 PP10065应用及技术服务部 摘要：本实验采用 Cheetah HP100 高压制备仪器结合紫外检测器的方法，选择 Venusil XBP C18(L)(5 um， 150 A， 30x150 mm)填料对西他沙星杂质进行了纯化。结果表明：流动相为0.05%三氟乙酸水溶液和乙腈，进行洗脱，能够有效分离，峰形良好。 关键词： Cheetah HP100；西沙他星杂质，，Venusil XBP C18(L)色谱柱 前言 西他沙星是一种喹诺酮类广谱抗菌药，由日本第一制药三共株式会社研发成功，因分子结构中含有一个顺式氟环丙胺基团，而具有良好的药代动力学特性，并可以减轻不良反应，其体外抗菌活性较大多数同类药物明显增强。需要建立一个分离方法将其中杂质分离做结构确证。 表1.西他沙星信息 样品名称 英文名 结构式 分子式 分子量 CAS编号 西他沙星 sitafloxacin hydrate HN- C16H16N3O3F 317.12 163253-35-8 、COOH O 实验部分 仪器、试剂与材料 主要仪器设备 Cheetah HP100 高压制备仪器 试剂材料 三氟乙酸、乙腈为色谱纯；；水为去离子水； 高效液相色谱柱：V\enusil XBP C18(L)， 5 um， 150 A， 30×150 mm； 西他沙星样品：客户提供。 样品前处理 ( Email： s s e e r v ice@ag el a . com . cn 网址： w w w. ag ela . com . cn 客服：400-606-8099 ) 样品棕色液体底部有黑色油状物，直接冻干得到棕色粉末。粉末用乙腈：水1：1溶解成浓度40 mg/mL溶液，过0.22Hm滤膜过滤后进样。 制备条件 色谱柱：Venusil XBP C18(L)， 5 um， 150 A， 30×150mm； 流动相：A：：0.05%三氟乙酸水溶液；B：乙腈； 检测器：295nm： 流速：：35mL/min： 进样量：200mg； 梯度： 表2.液相色谱梯度洗脱条件 时间/min 流速/(mL/min) A/% B/% 0.0 35.0 90.0 10.0 30.0 35.0 65.0 35.0 检测条件 色谱柱： Venusil XBP C18(L)， 5 um， 150 A， 4.6×250 mm； 流动相：A：0.05%三氟乙酸水溶液；B：乙腈； 检测器：295nm； 流速：1mL/min； 进样量：5uL； 梯度： 表3.液相色谱梯度洗脱条件 时间/min 流速/(mL/min) A/% B/% 0.0 1.0 90.0 10.0 30.0 1.0 40.0 60.0 结果与讨论 本实验采用 Venusil XBP C18(L) (5 um， 150A， 30x150 mm)对西他沙星杂质进行了制备，由表2及图1可知，流动相为0.05%三氟乙酸水溶液和乙腈，进行梯度洗脱时，样品通过制备，峰形良好，所得产物纯度满足客户需求。 ( Email： s s e e r v ice@ag el a . com.cn 网址： w w w. ag ela . com . cn 客服：400-606-8099 ) 图1.制备色谱图(收集15.7 min 馏分) 图2.制备产物检测色谱图 Spectrum RT 12.51-13.08{34 scans}-Background Subtracted 0.58-1.87 2014_1_31_97_532014.01.31 09：07：56 ； Intensity ESI +Max： 1.9E8 图3.制备产物 MASS 图谱 结论 本实验采用 Venusil XBP C18(L) (5 um， 150 A， 30×150 mm)色谱柱对西他沙星杂质进行了制备。结果表明 XBP C18(L)填料对该样品分离效果良好，所得产物纯度能够满足客户要求。 ( Email： s s e e r v ice@ag el a . com . cn 网址： w w w. ag ela . com . cn 客服：400-606-8099 ) 附：相关产品 产品名称 规格 包装数量 订货号 Venusil XBP C18(L) 5um， 150A， 30×150 mm 1支 VX951530-L Venusil XBP C18(L) 5um， 150A，4.6×250 mm 1支 VX952505-L 1.5 mL样品瓶 短螺纹透明带书写处32×11.6mm 100/PK 1109-0519 1.5mL样品瓶盖 9 mm 中心孔蓝盖，红色橡胶/米色PTFE 隔垫 45°Shore A；1.0mm 100/PK 0915-1819 一次性注射器 2mL无针头 100支/包 LZSQ-2ML 液相进样针 20 uL， 平头 1支/盒 JYZ-20UL 针筒过滤器 0.22 um 13 mm 单膜 200个/包 AS011320 地址：天津经济开发区西区南大街 邮编：话： 传真：