食盐中农药残留检测方案

Agela Technologies 食盐中农药残留的分析方法 AF10134应用及技术服务部 摘要：本实验采用固相萃取结合液相色谱-串联质谱的方法，建立了食盐中农药残留的检测方法。样品经水溶解， Cleanert PEP-2 固相萃取柱净化， Venusil MP C18 色谱柱(3 um， 100A；3.0×50mm)分离，采用水和乙腈为流动相进行洗脱，外标法进行定量。结果表明，标品添加量为 1.0 ug/kg 时，回收率在60%~105%之间，能够满足检测要求。 关键词：农药残留； Cleanert PEP-2固相萃取柱；； Venusil MP C18 色谱柱 前言 农药残留是农药使用后一个时期内没有被分解而残留于生物体、收获物、土壤、水体、大气中的微量农药原体、有毒代谢物、降解物和杂质的总称。施用于作物上的农药，其中一部分附着于作物上，一部分散落在土壤、大气和水等环境中，环境残存的农药中的一部分又会被植物吸收。残留农药直接通过植物果实或水、大气到达人、畜体内，或通过环境、食物链最终传递给人、畜。到目前为止，世界上化学农药年产量近200 万吨， 约有1000多种人工合成化合物被用作杀虫剂、杀菌剂、杀藻剂、除虫剂、落叶剂等类农药。农药尤其是有机农药大量施用，造成严重的农药污染问题，成为对人体健康的严重威胁。 实验部分 仪器、试剂与材料 主要仪器设备 AB SCIEX API 4000*液相质谱联用仪 试剂材料 甲醇为色谱纯；实验用水为超纯水；氨水为分析纯； 农药混合标准工作液：0.01 ug/mL，，甲醇溶解； Cleanert PEP-2： 60 mg/3 mL。 样品制备 样品提取 称取食盐10g于100mL水中，震荡溶解，待净化。样品净化 先将 PEP-2(60mg/3mL)小柱依次用5 mL甲醇，5 mL水活化平衡；然后将待净化液以 10 mL/min 的流速通过小柱，弃去全部流出液，用5mL水淋洗小柱并抽干；最后用 5 mL 5%氨化甲醇(V/V)洗脱。收集洗脱液于45℃氮气吹干，用1 mL 20%乙腈水(V/V)溶解残留物后，直接进样检测。 色谱条件 液相条件 色谱柱：Venusil MP C18， 3 pm， 100 A， 3.0×50 mm 流动相：A：水；B：乙腈 柱 温：30℃ 进样量：5uL 质谱条件 正离子模式 离子源： ESI+；电喷雾电压：4500V；雾化气压力：45 psi；气帘气压力：20 psi； 辅助气压力：45 psi； 离子源温度：450℃；采集方式： Scheduled MRM. 负离子模式 离子源： ESI-；电喷雾电压：-4500V；；雾化气压力：40 psi；气帘气压力：25 psi； 辅助气压力：40 psi； 离子源温度：550℃；采集方式：多反应监测(MRM)。梯度洗脱： 表1.液相色谱梯度洗脱条件 时间/min 流速/mL/min A/% B/% 0.50 0.40 95 5 1.00 0.40 60 40 3.00 0.40 15 85 质谱参数：见表3 表2.26种农药质谱参数 物质名称 Q1 Q3 DP/V CE/V 多菌灵 192.0 160.0 80 25 132.0 80 41 啶虫脒 223.0 126.0 70 27 99.0 70 47 吡虫啉 256.1 209.0 60 23 175.0 60 26 噻虫嗪 292.0 211.0 60 18 181.0 60 32 烯酰吗啉 388.1 301.0 115 29 165.0 115 43 苯醚甲环唑 406.1 251.0 120 37 337.0 120 23 三唑磷 314.0 162.0 70 25 119.1 70 47 克百威 222.1 165.0 70 17 123.1 70 29 咪鲜胺 376.2 308.0 65 17 70.1 65 43 除虫脲 311.0 158.0 72 21 141.2 72 47 甲基异柳磷 273.0 231.0 39 13 121.1 39 33 敌敌畏 221.0 109.0 70 23 127.0 70 25 灭多威 163.0 106.0 38 13 88.0 38 13 嘧霉胺 200.0 107.0 91 34 82.0 91 37 涕灭威 116.1 89.0 47 10 70.0 47 10 乐果 230.0 125.0 56 29 199.0 56 13 3-羟基克百威 238.0 181.0 65 14 163.0 65 20 涕灭威砜 223.0 148.0 63 12 76.1 63 10 水胺硫磷 273.1 231.0 67 15 121.0 67 32 三唑酮 294.0 197.0 81 21 225.0 81 17 灭幼脲 309.0 156.0 75 20 139.0 75 44 嘧菌酯 404.1 372.0 70 20 344.1 70 34 甲维盐 886.5 158.1 120 37 302.1 120 39 185.0 187.0 4-氯苯氧乙酸 127.0 -45 -17 91.0 -39 -40 129.0 -43 -17 2-萘乙酸 187.0 141.0 -18 -9 2，4-D 218.9 161.0 -36 -17 125.0 -32 -36 表3.食盐中加标回收实验结果(添加水平1.0 ug/kg) 物质名称 平均回收率/% 变异系数/% 多菌灵 105.2 12.2 啶虫脒 101.7 8.2 吡虫啉 108.5 5.1 噻虫嗪 90.6 4.3 烯酰吗啉 104.8 7.8 苯醚甲环唑 80.6 5.5 三唑磷 100.0 3.1 克百威 80.8 3.3 咪鲜胺 73.5 4.0 除虫脲 69.6 9.0 甲基异柳磷 91.8 1.8 敌敌畏 62.2 7.3 灭多威 86.6 6.7 嘧霉胺 90.3 2.3 涕灭威 76.9 10.6 乐果 94.0 2.3 3-羟基克百威 88.8 4.2 涕灭威砜 72.6 12.5 水胺硫磷 74.2 13.3 您的建议是我们进步的动力!您的成功是我们热切的期盼!www.agela.com.cn/ service@ agela.com.cn /400-606-8099 三唑酮 110.0 7.3 灭幼脲 81.7 9.0 嘧菌酯 99.7 0.3 甲维盐 67.9 14.2 4-氯苯氧乙酸 85.2 1.3 2-萘乙酸 98.5 0.7 2，4-D 91.0 6.9 实验谱图 图1.正模式0.01ug/mL标准溶液LC-MS/MS色谱图 图2.负模式0.01 pg/mL标准溶液LC-MS/MS色谱图 图3.正模式1.0 ug/kg食盐基质混合标准工作液LC-MS/MS色谱图 图4.负模式1.0 ug/kg食盐基质混合标准工作液LC-MS/MS色谱图 图5.正模式食盐空白基质LC-MS/MS色谱图 Agela Technologies 图6.负模式食盐空白基质LC-MS/MS色谱图 图7.正模式1.0 ug/kg食盐基质加标LC-MS/MS色谱图 图8.负模式1.0 ug/kg食盐基质加标LC-MS/MS色谱图 结论 本实验建立了食盐中农药的 LC-MS/MS 检测方法，并结合固相萃取技术对 食盐中农药的含量进行了测定。对于加标量为1.0 ug/kg的样品，农残样品回收率在60%~110%，变异系数小于15%，能够满足实验要求。说明 Cleanert PEP-2小柱可以用于食盐中农残的检测，且稳定性良好。由图1~图8可知，用 VenusilMP C18 色谱柱检测26种农药，分离度和峰形良好，且保留时间稳定。 附：相关产品 产品名称 规格描述 包装数量 订货号 Venusil MP C18 3 um， 100A， 3.0×50 mm 1支 VA930503-0 Cleanert PEP-2 60 mg/3 mL 50 支/pk PE0603-2 M08型正压固相萃取装置 8通道，配大体积上样 1台 SPE-M08 15位氮吹仪 15 位 1台 NV15-M 保护柱芯 3 um， 100 A； 3.0×10 mm 4支/包 VA930103-0 1.5 mL 样品瓶 短螺纹透明带书写处32×11.6mm 100/pk 1109-0519 1.5 mL 样品瓶盖 9 mm 中心孔蓝盖，红色 橡胶/米色 PTFE 隔垫45° Shore A； 1.0 mm 100/pk 0915-1819 一次性注射器 2mL 无针头 100支/包 LZSQ-2ML 第页共页 第页共页您的建议是我们进步的动力!您的成功是我们热切的期盼!www.agela.com.cn / service@ agela.com.cn /