黄芪中黄芪甲苷检测方案(快速溶剂萃取)

车金水张艳海叶明立赛默飞世尔科技(中国)有限公司 关键词：加速溶剂萃取；中药；活性成分；黄芪；黄芪甲苷 Key words： Accelerated Solvent Extraction； Traditional Chinese Medicine；Active ingredients； Radix Astragli； Astragaloside 引言 中药成分十分复杂，很多贵重活性成分含量低至微量甚至痕量。因此，萃取中药材中的活性成分是对现有产品以及研发的新产品进行质控的关键。目前《中国药典(2010版)》中对中药材的中活性成分提取的主要方法仍是较为传统的煎煮法、浸泡提取、索氏提取、超声提取等，这些萃取方法耗时，耗力且需要大量的有机溶剂。 加速溶剂萃取技术 ( Accelerated Solvent Extraction， ASE)是在高温(40℃-200℃)和高压(1500psi)下用溶剂萃取固体或半固体样品的样品前处理方法(图1)。ASE具有萃取效率高，速度快、溶剂用量少等优点。与传统萃取方法相比可提高整个萃取过程的效率。例如，萃取1-10g样品通常只需10-15mL的溶剂在12-17min即可完成萃取。目前，ASE广泛应用于环境、食品、药物、天然产物和中药中的活性成分等领域。 本文介绍了使用ASE萃取黄芪中的活性成分黄芪甲苷。黄芪是常见的补益类中药，而其中的黄芪甲苷是黄芪中的主要活性成分，2010版药典一部中将其作为质量控制指标成分。黄芪甲苷可改善心肺功能，加强心脏收缩力，扩张血管，降低血压等功效。以下介绍采用ASE萃取黄芪甲苷具体方法。 ASE条件 仪器： ASE350 前处理方法：样品从当地中药材店购得。将样品粉碎，过筛。取4g样品，与硅藻土混合均匀后放入11mL萃取池中(萃取池的底部放置一片纤维素滤膜)，按表1ASE条件萃取。将ASE萃取液定容至50mL， 过0.22um滤膜，即得。 表1 ASE萃取条件 条件 参数 溶剂 甲醇 温度 140℃ 加热时间 7 min 静态萃取时间 10min 图1 ASE 150和ASE 350产品照片 循环次数 3 吹扫体积 60% 吹扫时间 90s 总体积 30mL 总时间 40min 仪器： UltiMate 3000高效液相色谱仪，配带在线脱气单元的双三元梯度泵；带有一个六通阀的柱温箱；紫外检测器。 富集柱： Acclaim PAII(3um， 4.6mm×50mm) 分析柱： Acclaim C18(5um， 4.6mmx150mm) 流动相组：乙腈，水；梯度洗脱 流速： 1.0mL/min 柱温：35℃ 进样量：50pL 检测器：电雾式检测器(CAD) 实际样品分析 图2黄芪饮片(蜜炙)色谱图 《中国药典(2010版)》萃取方法：取样品约4g，置索氏提取器中，加甲醇40mL，冷浸过夜，再加甲醇适量，加热回流4小时，萃取冷却定容，待HPLC分析。 ASE对黄芪中的黄芪甲苷的平均萃取率为0.069%，RSD为2.1%(n=5)。同时采用《中国药典(2010版)》萃取方法对同一样品进行萃取，索氏提取的平均提取率为0.063%， RSD为5.4%(n=5)。实验结果表明： ASE对黄芪中的黄芪甲苷的提取效率更高，稳定性更好，且ASE能够大大节省萃取时间。 表2 ASE和索氏提取比较(n=5) 萃取方法 样品量 溶剂量 耗时 萃取率 RSD ASE 4g 30mL 40min 0.069% 2.1% 索氏提取 4g 60mL 16h 0.063% 5.4% 结果 ASE是专为需要分析大量样品且从样品中提取有效产品信息的实验室而设计。ASE利用提高温和增加压力可以增加溶剂动力学的原理，萃取效率提高的同时减少溶剂消耗量和萃取时间。在许多应用领域的数据表明， ASE的萃取结果与其它传统萃取方法的结果相似。然而与传统分析相比， ASE萃取效率更高，将原来十几小时的萃取时间缩短至小于1小时甚至更短。 ( [1]. ChP(中国药典).2010.VolI(一部)：283 ) thermoscientific.com ( C 2012 T h e rmo Fishe r Scie n tific Inc . Al l ri g hts reserved. All trademarks are the pro p erty of Thermo Fisher Scientific Inc. a nd its s ubsidiaries. Specifications， terms a nd p r icin g are subject to change. Not all products are available in all countries. Please consult your ) local sales representative for details. 上海北京免费服务热线：上海浦东新金桥路27号6号楼北京东城区安定门东大街28号800 8105118邮编：201206雍和大厦西楼F座7层702-715室4006505118电话：021-68654588邮编：100007传真：021-64457830电话：010-84193588传真：010-88370548 ThermoFisherSCIENTIFIC oThermo Fisher Scientific，San Jose， CA USA is ISO Certified.