前花青素中前花青素含量检测方案(液相色谱柱)

Dec 6，2016.LC Application Lab， Shiseido ChinaNo.31， BDA International Business Park，2 Jing Yuan Street， BeijingEconomic Technological Development Zone，Beijing， China 100176Phone 010-6785-6801， FAX 010-6785-6882 食品中前花青素的国标方法分析 本实验室严格按照国标 (GB/T 22244-2008)方法对客户提供前花青素标准品及蓝莓提取液样品进行分析。因国标方法中流动相条件为含有8%甲酸的强酸环境，选择资生堂耐酸色谱柱CAPCALL PAK C18 ACRS5；4.6mm i.d.×150mm (AGAB01096)，分析结果如图1所示。 Minutes 图 1 ACR分析对照品结果 HPLC Conditions： 色谱柱：：CAPCALL PAK C18 ACR S5；4.6mmi.d.×150mm 流动相： 水：甲醇：异丙醇：甲酸=73：13：6：8 流1.0mL/min温 检浓 35°C PDA 525nm 15mL 正丁醇与盐酸混合溶液(正丁醇：盐酸=95：5)加入0.5mL2%硫酸铁铵(2mol/L盐酸溶解)和0.1mg/mL对照溶液(甲醇溶解稀释)2mL，混匀，沸水浴回流40min，冰水中冷却，过滤后上样。 进样量： 10pL HPLC Conditions ： Column：CAPCALL PAK C18 ACR S5；4.6mm i.d.×150mm Mobile phase：water： methanol： isopropanol： formic acid = 73： 13：6：8 Flow rate： 1.0mL/min Temp：35°C Detection：FPDA 525nm Sample：Add 0.5 mL of 2% ammonium ferric sulfate (dissoved in 2 mol/L HCL) and 2 mL of 0.1 mg/mLreference solution (dissoved in methanol) in 15 mL of n-butyl alcohol mixed with hydrochloric acidsolution (n-butyl alcohol： hydrochloric acid =95：5)，And the solution was heated in boiling water bathand refluxed for 40 min， cooled down in ice water and filtered with 0.45pm. Inj.vol： 10pL 从结果中看出，氰定保留时间为 3.21min， 同主峰前杂质得到良好分离及分析峰形。多次重复进样，可以得到稳定保留时间。在相同流动相系统中，对客户提供蓝莓提取液样品按国标水解反应处理后，分析结果如图 2. 图2ACR分析样品结果 HPLC Conditions ： 色谱柱：CAPCALL PAK C18 ACR S5；4.6mm i.d.×150mm 流动相： 才水：甲醇：异丙醇：甲酸=73：13：6：8 流1.0mL/min温 检浓 35°C PDA 525nm 15mL 正丁醇与盐酸混合溶液(正丁醇：盐酸=95：5)加入0.5mL2%硫酸铁铵 (2mol/L盐酸溶解)和蓝莓发酵液样品2mL，混匀，沸水浴回流 40min，冰水中冷却，过滤后上样。 进样量： 10pL HPLC Conditions： Column：：CAPCALL PAK C18 ACR S5；4.6mmi.d.×150mm Mobile phase： water： methanol： isopropanol： formic acid = 73： 13：6：8 Flow rate： 1.0mL/min Temp：35°C Detection： PDA 525nm ：Sample：：AAdd 0.5 mL of 2% ammonium ferric sulfate (dissoved in 2 mol/L HCL) and 2mL of blueberries fermesample solution in 15 mL of n-butyl alcohol mixed with hydrochloric acid solution (n-butyl alcohol：hydrochloric acid =95：5)，And the solution was heated in boiling water bath and refluxed for 40 min，cooled down in ice water and filtered with 0.45pm. Ini.vol： 10pL 从图2中看出，分析蓝莓提取液样品可得到氰定的良好检出结果，样品中未见对照品主峰前杂质峰。 综宗实验结果，使用资生堂 CAPCALL PAK C18 ACR S5；4.6mm i.d.×150mm 丁谱柱可以实现国标方法对蓝莓提取液中前花青素的检测。 (注：数据存储路径仪器2/D/zhanghu/data/前花青素/20161205) 张虎郭彦丽