蜂蜜中四环素类药物残留检测方案(固相萃取)

蜂蜜中四环素类药物残留检测的固相萃取方法 WGLabsHLB 一、实验目的 本研究利用固相萃取作为样品前处理方法， HPLC作为分析方法，检测蜂蜜样品中四环素类抗生素的残留水平。该方法操作简便，可简化样品前处理过程，减少有机溶剂的使用。 二、实验目标物 土霉霉(CAS：79-57-2)，四环素(CAS：60-54-8)。 三、应用范围 本方法适用于蜂蜜中四环素类的固相萃取及HPLC检测与确证。 四、参考标准 《GB/T 21317-2007 食品安全国家标准动物源性食品中四环素类药物残留量检测方法液相色谱-质谱/质谱法与高效液相色谱法》。 五、实验材料 WGLabsS上HLB360mg/3ml Cat：WGHLB360 六、实验方法 1、样品提取 称取混匀蜂蜜试样5 g(精确到0.01 g)， 置于50mL离心管中，用0.1mol/L EDTA-Mcllvaine 缓冲液溶解并定容至50 mL， 漩涡混合1 min， 冰水浴超声10 min， 转移至50 mL离心管中，冷却至0℃-4℃，5000 r/min离心10min(温度低于15℃)，用中速滤纸过滤待净化。 2、SPE柱净化 (1)活化：HLB柱依次用5 mL甲醇和5 mL水活化。 (2)上样和洗脱：准确吸取10mL备用液以1滴/秒的速度过HLB固相萃取柱，待样液全部流出后，依次用5 mL水和5mL甲醇-水(5：95， v/v)淋洗，弃去全部流出液。2.0 kPa以下减压抽干5 min， 最后用10 mL甲醇-乙酸乙酯溶液(1：9，v/v)洗脱，收集洗脱液。 (3)重新溶解：洗脱液于40℃氮气吹干，加10 mmol/L三氟乙酸水溶液1.0 mL溶解残余物，滤膜过滤，供高效液相色谱测定。 3、HPLC条件 设备： Waters Alliance 2690 色谱柱： Welch Ultimate XB-C18 (4.6X250mm) WGLabs 为您提供完整的食品检测前处理方案! 检测器： Waters 2487 紫外检测器 检测波长：350nm 流动相：A：乙腈 B：10mmol/L三氟乙酸水溶液 洗脱方式：梯度洗脱 表1梯度洗脱条件 时间/min A/% B/% 0 4 96 8 30 70 18 35 65 20 4 96 28 4 96 流速：1mL/min 柱温：室温 进样体积：20pL 七、实验结果 1、蜂蜜基质中添加1mg/kg四环素的回收结果 表2蜂蜜基质中添加1mg/kg四环素的回收结果 目标物 回收率(%) 平均 回收率(%) RSD(%) 1 2 3 土霉素 80.2 89.4 89.5 86.38 1.92 四环素 85.7 85.5 86.5 85.88 1.2 2、添加水平为1mg/kg蜂蜜中四环素检测色谱图 图1添加水平为1mg/kg蜂蜜中四环素检测色谱图 WGLabs 为您提供完整的食品检测前处理方案! 本研究利用固相萃取作为样品前处理方法，HPLC作为分析方法，检测蜂蜜样品中四环素类抗生素的残留水平。该方法操作简便，可简化样品前处理过程，减少有机溶剂的使用。具体操作步骤详见附件！！！