低聚果糖中样品制备后表征检测方案

Agela Technologies博纳艾杰尔产品应用案例 低聚异麦芽糖制备案例 PP10019应用及技术服务部 摘要：本实验采用 Cheetah@ HP-100高压制备仪器结合蒸发光散射检测器(ELSD)的方法，选择 Hilic (5 um 100 A 20*250 mm) 填料对低聚异麦芽糖进行了制备。结果表明：在蒸发光检测器下，流动相为去离子水和乙腈，进行梯度洗脱，样品能够有效分离，且峰性良好。 关键词： CheetahHP-100；蒸发光检测器；低聚异麦芽糖； Hilic 色谱柱 前言 自然界中低聚异麦芽糖极少以游离状态存在，但作为支链淀粉或多糖的组成部分，在某些发酵食品如酱油、黄酒或酶法葡萄糖浆中有少量存在。。工业上以淀粉为原料生产低聚异麦芽糖需要一种酶，此酶为α-葡萄糖苷酶，又名葡萄糖基转移酶，(简称a-糖苷酶。它能切开麦芽糖和麦芽低聚糖分子结构中α-1，6糖苷键，并能将游离出来的一个葡萄糖残基转移到另一个葡萄糖分子或麦芽糖或麦芽三糖等分子中的α-1，6位上，形成异麦芽糖、异麦芽三糖、异麦芽四糖、异麦芽五糖和潘糖等。 表1.低聚异麦芽糖样品信息 样品名称 英文名 结构式 分子式 分子量 CAS编号 低聚异麦芽 isomaltooligosac CH (C5H10Os)n 300-2000 499-40-1 糖 charide HO -QH N=2-10 HO OH · HO OH 实验部分 仪器、试剂与材料 主要仪器设备 Cheetah@HP-100 高压制备仪器 试剂材料 去离子水；乙腈为色谱纯； 高效液相色谱柱： Hilic 5 um 100 A 20*250 mm ( 地址： 天 津经济开发区西区南大街179号 邮编：300462电话：0 2 2-25321032 传 真：022-25321033 ) ( Email： s e rv ic e @a gela. co m.cn 网址： w w w.agela .c o m. cn 客服：40 0 -606-8099 ) 低聚异麦芽糖样品：客户提供 样品溶解 取200 mg样品用1mL水超生溶解，过 0.22 u.m 滤膜后上样。 制备条件 色谱柱： Hilic 10 pm 100 A 20*250 mm； 流动相： A：去离子水B：乙腈； 检测器： ELSD(载气流量 2.5Ln/min， 漂移管温度60℃) 流速： 18 mL/min 进样量：40mg 梯度： 表2.液相色谱梯度洗脱条件 时间/min 流速/(mL/min) A/% B/% 0.0 18.0 25.0 75.0 60.0 18.0 45.0 55.0 检测条件 色谱柱： Hilic 5 um 100 A 4.6×250 mm； 流动相：A：去离子水B：乙腈； 检测器： ELSD(载气流量2.5Ln/min， 漂移管温度80℃) 流速：1mL/min 进样量：20uL 梯度： 表3.液相色谱梯度洗脱条件 时间/min 流速/(mL/min) A/% B/% 0.0 1.0 25.0 75.0 50.0 1.0 50.0 50.0 结果与讨论 本实验采用 Hilic (5 um 100 A 20*250 mm)对低聚异麦芽糖进行了制备，由表2及 ( 图1 可知，流动相为去离子水与乙腈，进行梯度洗脱时，样品通过制备，峰形良好， ) ( 电话：0 2 2-25321032 传 真：022-25321033 ) ( Email： s e rv ic e @a gela. co m.cn 网址： w w w.agela .c o m. cn 客服：40 0 -606-8099 ) 且与附近杂质分离度较好，所得产物纯度满足客户需求。 图1.制备色谱图(收集12.8min， 16.5min， 21min馏分) 三出 图2.12.8min馏分检测色谱图 图3.16.5min 馏分检测色谱图 ( 电话：0 2 2-25321032 传 真：022-25321033 ) Email： service@agela.com.cn 网址： www.agela.com.cn 客服：400-606-8099 图 4.21min 馏分检测色谱图 图5.样品检测色谱图 结论 本实验采用 Hilic (5 um 100 A 20*250 mm)色谱柱对低聚异麦芽糖进行了制备。结果表明 Hilic 填料对该样品分离效果良好，所得产物纯度能够满足客户要求。 附：相关产品 产品名称 规格 包装数量 订货号 Hilic 10 um 100 A 20x250 mm 1支 VH902520-0 Hilic 5 um 100 A 4.6×250mm 1支 VH952505-0 1.5 mL样品瓶 短螺纹透明带书写处 100/PK 1109-0519 ( 地址： 天 津经济开发区西区南大街179号 邮编：300462 ) ( 电话：0 2 2-25321032 传 真：022-25321033 ) ( Email： service@agela.com.cn 网址： w w w.agela .c o m. cn 客服：40 0 -606-8099 ) 博纳艾杰尔产品应用案例 32×11.6mm 1.5mL 样品瓶盖 9mm中心孔蓝盖，红色橡胶/米色 PTFE 隔垫 45°Shore A； 1.0mm 100/PK 0915-1819 一次性注射器 2mL无针头 100支/包 LZSQ-2ML 液相进样针 20uL， 平头 1支/盒 JYZ-20UL 乙腈 4L/瓶， UV级 4*4L/箱 AH015-4 针筒过滤器 0.22 um 13 mm 单膜 200个/包 AS011320 地址：天津经济开发区西区南大街 邮编： 地址：天津经济开发区西区南大街 邮编：