喹啉类生物碱中快速分析检测方案(液相色谱柱)

Jun.24，2016LC Application Lab， Shiseido ChinaNo.31， BDA International Business Park，2Jing Yuan Street， BeijingEconomic Technological Development Zone，Beijing， China 100176Phone 010-6785-6801，FAX 010-6785-6882 喹啉类生物碱的快速分析 客户在进行中药样品分析时，有疏水性物质保留过长，不能得到快速且分离良好的实验结果。因此，为缩短疏水性物质保留时间，我们选取了保留较弱的色谱柱 C18 UG120 和 SPOLAR，以及特殊表面极性疏水性的ADME(金刚烷基键合柱)，同时使用常规C18 MG作为对比，在相同梯度条件下进行了比较。图1为四款色谱柱分离比较图，图2为10~30min局部放大图，图3为45~65min 局部放大图。 其中，对于10~30min(图2)极性较强物质， ADME 色谱柱体现出不同分离选择特性，得到完全分离结果，C18色谱柱均有一个峰未得到分离。而疏水性较强部分 45~65min(图3)， ADME 色谱柱相较 C18保留略长且对62min 色谱峰未见分离，三款 C18色谱柱得到相似分离效果。而对于疏水性最强的物质(图1中箭头所示)，MG、UG120、SPOLAR、ADME 的保留时间分别为：91.2min、 82.8min、 73.7min、76.8min。 SPOLAR 色谱柱虽然得到最短保留时间，但峰型不佳，其次为 ADME 分析时间较短。四款色谱柱分别对不同物质体现出不同保留时间和分离选择特性，客户可根据关注目标物质进行色谱柱选择。 图1270nm分析谱图 HPLC Conditions ： 色谱柱： CAPCELL PAK C18 MG S5；4.6mm i.d.×250mm CAPCELL PAK C18 UG120 S5；4.6mm i.d.×250mm C18 SPOLAR S5；4.6mm i.d.x250mm CAPCELL PAK ADME S5；4.6mm i.d.×250mm 流动相： A： 0.2%甲酸B：乙腈 30%(0min)->50%(50min)->100%(70min)->100%(110min)->30%(110.1min) 1.0 mL / min 30°C PDA270nm、254nm 未知，客户提供 进样量： 10 pL 我们又尝试使用具有与 2um 全多孔型色谱柱具有同等高柱效，但柱压低能够在常规液相上使用的核壳型色谱柱 CAPCELL CORE 系列，调整梯度条件进行快速分析尝试。分别选取金刚烷基团 ADME 键合和 C18型核壳色谱柱，在常规液相上进行快速分析，结果分别如图4图5所示。使用核壳型色谱柱，均能够在 40min 以内获得快速分析结果。 图 4 CORE ADME 分析结果 HPLC Conditions： 色谱柱： CAPCELL CORE ADME S2.7；2.1mm i.d.×150mm 流动相：：A：0.2%甲酸B：乙腈32%(0min)->50%(15min)->70%(25min)->100%(26min)->100%(36min)->32%(36.1min) 1.0mL/min PDA270nm、254nm ： 未知，客户提供 进样量： 图 5 CORE C18分析结果 HPLC Conditions ： 色谱柱： CAPCELL CORE ADME S2.7；2.1mmi.d.×150mm 流动相： A：0.2%甲酸B：乙腈 35%(0min) ->50%(15min)->70%(25min)->100%(26min)->100%(36min)->35%(36.1min) 流速1.0 mL / min温度检测浓度 40°C PDA270nm、254nm 未知，客户提供 进样量： 2pL 杨茜郭彦丽