粮食及加工品中真菌毒素检测方案

DIKMAA reliable partner for your lab ProElut AFT-3一步净化检测粮谷中黄曲霉毒素解决方案 目前检测黄曲霉毒素主要有薄层色谱法(TLC)、免疫亲和柱-高效液相色谱法(HPLC-FL)、酶联免疫法(ELISA)、免疫亲和柱-高效液相色谱法串联质谱法等，薄层色谱法和酶联免疫法主要应用黄曲霉毒素的定性，不能准确定量，免疫亲和柱-液相色谱法和液相色谱法-串联质谱能够准确定量，但是由于免疫亲和柱与质谱检测成本高，应用范围受到限制。 迪马科技开发的粮谷中黄曲霉毒素的测定采用检测成本较低的固相萃取-液相色谱法，对比国标方法《GB/T 18979-2003食品中黄曲霉毒素的测定免疫亲和层析净化高效液相色谱法和荧光光度法》，本方案具有以下优势： 方法优势 1. 前处理步骤简单，样品经有机溶剂提取后，直接上样固相萃取柱，收集流出液后进行色谱分析，方法具有回收率高、稳定性好、净化效果优异等特点； 2. 避免了免疫亲和柱容易受环境影响而引起黄曲霉毒素回收率低和净化效果不好的弊端，保证了实验结果的重现性和准确性； 3 过柱方法简单易操作，无需固相萃取柱活化、淋洗、洗脱步骤，上样后直接收集流出液进行色谱分析，-一步即可完成净化，对操作人员要求不高，检测成本相对较低，能被很多企事业单位采用； 4. 可同时检测黄曲霉毒素M1、G1、B1、G2、B2，并能够达到准确定性定量，检出限是0.05 ug/kg， 远低于国家标准《GB 2761-2011食品安全国家标准食品中真菌毒素限量》 ProElut AFT-3专用柱优势 1..FProElut AFT-3 柱由两种吸附剂按照一定的比例分层填装而成，采用不同作用机理去除杂质，同时对黄曲霉毒素没有不可逆吸附，保证了样品的净化效果及回收率； 2.本产品是商品化的成品柱，吸附剂稳定性好，不受外界环境因素影响，保证实验结果的重现性和准确性； 3.过柱过程操作步骤简单，节省时间，提高工作效率。 北京：400-608-7719 上海：021-61263966 天津：400-633-6606 广州：020-85593520 以下为详细解决方案，敬请参考! 1、适用范围 本方案适用于玉米面和花生中黄曲霉毒素M1、G1、B1、G2、B2的检测，方法检出限是0.05 pg /kg. 2、样品准备 称取2.0g样品，加入8 mL 85%乙腈水，振荡2 min， 超声 10 min， 6000rpm 离心2 min， 收集上清液，待净化。 3、SPE 柱净化——ProElut AFT-3 12 mL (Cat.#：65915) 将待净化液加入柱中，收集2mL流出液，在50℃水浴下减压蒸干。 4、衍生 依次加入 0.5 mL 正己烷和 0.5 mL三氟乙酸，旋好玻璃塞充分混匀衍生液，45℃静置10 min， 吹干衍生液，用10%乙腈水定容至1mL。 5、分析条件 色谱柱： Diamonsil C18(2)， 250×4.6mm， 5 pm (Cat.#： 99603) 流速： 1.0 mL/min 检测器：* 荧光检测器， Ex： 365nm； Em： 435 nm 柱温： 30℃ 进样量： 20pL 流动相： A：水 B：异丙醇+乙腈=3+2 梯度 时间(min) 0 5 15 20 21 30 A(%) 90 80 80 60 90 90 B(%) 10 20 20 40 10 10 北京：400-608-7719 上海：021-61263966 天津：400-633-6606 广州：020-85593520成都：028-86612625 沈阳：024-22943513 石家庄：0311-66686220 青岛：0532-83725230 6、添加回收结果 6.1玉米面中黄曲霉毒素添加回收结果 NO. 化合物名称 添加水平(pg/kg) 回收率(%) 1 M1 1.2 89.33 0.6 93.06 2 G1 1.2 93.94 0.6 123.44 3 B1 1.2 93.96 0.6 99.05 4 G2 1.2 100.01 0.6 106.07 5 B2 1.2 102.19 0.6 93.1 黄曲霉毒素M1、G1、B1、G2、B2的标准(0.6ug/L)液相色谱图 玉米面中(添加水平为1.2 pg/kg) 黄曲霉毒素M1、G1、B1、G2、B2的液相色谱图 玉米面中黄曲霉毒素M1、G1、B1、G2、B2(空白样品)的液相色谱图 黄曲霉毒素M1、G1、B1、G2、B2的标准(0.3 ug/L)液相色谱图 玉米面中(添加水平为0.6 pg/kg) 黄曲霉毒素M1、G1、B1、G2、B2的液相色谱图 玉米面中黄曲霉毒素M1、G1、B1、G2、B2(空白样品)的液相色谱图 6.2花生中黄曲霉毒素添加回收结果 NO. 化合物名称 添加水平(mg/L) 回收率(%) 1 M1 0.6 96.78 2 G1 0.6 103.99 3 B1 0.6 94.05 4 G2 0.6 93.36 5 B2 0.6 93.67 黄曲霉毒素M1、G1、B1、G2、B2的标准(0.3pg/L)液相色谱图 花生中(添加水平为 0.6 pg/kg) 黄曲霉毒素M1、G1、B1、G2、B2液相色谱图 北京：400-608-7719 上海：021-61263966 天津：400-633-6606 广州：020-85593520 成都：028-86612625 沈阳：024-22943513 石家庄：0311-66686220 青岛：0532-83725230 济南：0531-83681355 重庆：023-62568657 花生中黄曲霉毒素M1、G1、B1、G2、B2(空白样品)的液相色谱图 黄曲霉毒素检测相关产品信息(现货)： 货号 名称 规格 样品前处理 65915 黄曲霉毒素检测专用固相萃取柱 ProElut AFT-3 (可用于黄曲霉毒素总量及黄曲霉毒素M1的测定) 12 mL，20/pk 82O-COIAC1005 黄曲霉毒素M1免疫亲和柱 3 mL， 25/pk 82O-COIAC1001 黄曲霉毒素总量(B1、B2、G1、G2)免疫亲和柱 1 mL，25/pk 82O-COIAC1004 黄曲霉毒素总量(B1、B2、G1、G2)免疫亲和柱 3 mL， 25/pk 244358 12管防交叉污染真空 SPE萃取装置 12位 4803 1，3，6mL柱管通用连接器 15/pk 4806 考克(控制流量) 15/pk 99011 真空/正压两用泵，无油 1/pk 99013 抽滤瓶套装(包括硅橡胶管2米，2L抽滤瓶及橡胶塞) 1/pk 30039 FitMax 针头式过滤器 Nylon 13 mm，0.22 um 100/pk 30040 FitMax 针头式过滤器 Nylon 13mm，0.45 um 100/pk 标准品 51-46304-U-1EA 黄曲霉毒素混标(B1，B2，G1，G2) 5×1 mL in Methanol Aflatoxin B1，1 pg/mLAflatoxin B2， 0.3 pg/mLAflatoxin G1， 1 pg/mL Aflatoxin G2，0.3 ug/mL 51-46319-U-1EA 黄曲霉毒素M1[6795-23-9] 1 mL， 10 pg/mL in acetonitrile 51-46323-U-1EA 黄曲霉毒素B1[1162-65-8] 1mL 3pg/mL in benzene：acetonitrile (98：2) 51-46324-U-1EA 黄曲霉毒素B2[7220-81-7] 1mL3pg/mL in benzene：acetonitrile (98：2) 51-46325-U-1EA 黄曲霉毒素G1[1165-39-5] 1mL 成都：028-86612625 沈阳：024-22943513 石家庄：0311-66686220 青岛：0532-83725230 济南：0531-83681355 重庆：023-62568657 3 pg/mL in benzene：acetonitrile (98：2) 51-46326-U-1EA 黄曲霉毒素 G2[7241-98-7] 1 mL 3 pg/mL in benzene：acetonitrile (98：2) 色谱柱及保护柱 99603 反相高效液相色谱柱Diamonsil C18(2) 250×4.6 mm，5pm 6201 EasyGuard C18保护柱 10×4.0 mm 1/pk2个柱芯+1个柱套 HPLC 溶剂·缓冲盐•离子对试剂 50101 乙腈 HPLC级 4L 50122 异丙醇 HPLC级 4L 50115 正己烷HPLC级 4L 50134 三氟乙酸HPLC 级 50 mL 通用色谱产品 52401B 瓶架/蓝色(现货) 50 孔 52401A 瓶架/白色(现货) 50孔 1034 样品瓶(棕色/螺纹) 2mL， 100/pk 1035 样品瓶盖/含垫(已经组装) 100/pk H80465 HPLC进样针 25 pL 红色产品货号#30039、#30040、#1034、#1035火热促销中 成都： 沈阳： 石家庄： 青岛：南： 重庆： 济南： 重庆：