肉制品中农兽药残留检测方案

深圳逗点生物技术有限公司-biocomma biotech co.，ltd.- 动物源性食品中盐酸克仑特罗检测的固相萃取方法 ( Silibase TM C8/SCX) 一、实验目的 本实验利用固相萃取法作为猪肉样品的前处理方法， GC-MS法作为检测手段。该方法可简化猪肉样品的前处理过程，节省有机溶剂的用量。 二、实验目标物 盐酸克仑特罗(CAS：21898-19-1)。 三、应用范围 本方法适用于动物源性食品中盐酸克仑特罗的GC-MS检测及确证。 四、参考标准 农业部推行标准《NY/T 468-2006动物组织中盐酸克伦特罗的测定气相色谱-质谱法》。 五、实验材料 Biocomma°SilibaseMC8/SCX固相萃取柱500mg/6mL。 六、实验方法 1、样品提取 称取均质试样5.0g试样(精确至0.01g)于50mL离心管中，加入15mL乙酸乙酯，再加入3mL10.0%碳酸钠溶液，然后以10000r/min以上的速度均质60s。盖上盖子以5000r/min的速度离心2min，吸取上层有机试剂于离心管中，在残渣中再加入10mL乙酸乙酯在旋涡混合器上混合1min， 离心后吸取有机溶剂并合并提取液。在收集的有机试剂中加入5mL 0.1mol/L的盐酸溶液，涡旋混合30s。以5000r/min的速度离心2min，吸取下层溶夜，同样步骤重复萃取一次，合并两次萃取液，用2.5mol/L氢氧化钠溶液调节pH至5.2。 2、SPE柱净化 (1)活化：向C8/MCX复合柱小柱中依次加入5mL甲醇、水5mL和5mL30mmol/L盐酸润洗固相萃取小柱。 (2)上样和洗脱：将上述备用液过柱，依次欠5mL水、5mL甲醇淋洗，真空抽干，用4%氨化甲醇5mL洗脱小柱，收集洗脱液。 (3)衍生化及检测：50℃缓慢氮气流条件下吹至近干，加入甲苯100pL和双三甲基硅基三氟乙酰胺100pL，涡旋震荡20s，密封玻璃塞，置于80℃恒温烘箱中加热1h，冷却后加300pL甲苯，作为试样溶液，供气相色谱-质谱分析，上气相色谱-质谱仪测定。 3、GC-MS条件 气相色谱-质谱仪 色谱柱： HP-5MS(30mX0.25mm， 0.25um或相当者) 进样口：220℃ 柱温：70℃(保持0.6min)， 以25℃/min升温至200℃(保持6min)，以25℃/min升温至280℃(保持5min) 载气：高纯He，流速：0.9mL/min 进样体积：1uL GC/MS传输线温度：280℃ 溶剂延迟： 8min 分析器温度：230℃ 四级杆温度：150℃ 七、实验结果 1、添加回收结果 实验结果表明， C8/SCX复合固相萃取柱适用于动物组织中盐酸克伦特罗的预处理，能净化动物组织样品，实验加标回收率及RSD能满足定量实验的要求。 表1动物源性食品中盐酸克伦特罗的添加回收结果 编号 1 2 3 4 5 平均回收率(%) RSD(%) 回收率(%) 85.6 92.4 94.1 95.7 87.6 90.8 4.23 2、标准溶液色谱图 图1盐酸克仑特罗标准溶液气相色谱图 图2盐酸克仑特罗标准溶液色谱图 口 版本号：C/SCX-WW.Diocomma.cn