肉制品中添加及非法添加检测方案

深圳逗点生物技术有限公司-biocomma biotech co.，ltd.- 动物源性食品中磺胺类药物检测的固相萃取方法 (SilibaseTM ALN) 一、实验目的 本实验利用固相萃取法法为样品的前处理方法， LC-MS/MS法作为检测手段。该方法可简化样品的前处理过程，节省有机溶剂用量。 二、实验目标物 磺胺噻唑(CAS：72-14-0)，磺胺甲基嘧啶(CAS：127-79-7)，磺胺醋酰(CAS：144-80-9)，磺胺吡啶(CAS：144-83-2)，磺胺甲甲异恶唑(CAS：127-69-5)。 三、应用范围 本方法适用于动物源性食品中磺胺类药物的LC-MS/MS检测及确证。 四、参考标准 推荐性国家标准《GB/T 21316-2007动物源性食品中磺胺类药物残留量的测定液相色谱-质谱/质谱法》。 五、实验材料 Biocomma" SilibaseM ALN固相萃取柱500mg/3mL。 六、实验方法 1、样品提取 将称取5g试样，精确到0.01g。置于50mL涡旋具盖离心管中，加入5mL水，于涡旋混合器上快速混合1min，使试样完全溶解。准确加入15mL乙酸乙酯，在振荡器上振荡10min， 以3000r/min 离心10min， 准确吸取上层乙酸乙酯12mL转入15mL的离心管中，置于浓缩吹氮仪在45℃吹扫蒸干，加入5mL水溶解，待净化。 2、SPE柱净化 将提取液过中性氧化铝柱，待溶液完全流出后，用2X3mL水洗柱，然后再用5mL乙腈+水淋洗柱，弃去全部淋出液。用真空泵减压抽干10min，最后用6mL乙酸乙酯洗脱，收集洗脱液10mL离心管中，于45℃用氮气吹干液吹干，用乙腈+水(20+80)定容至1mL， 供LC-MS/MS上机测定。 3、LC-MS/MS条件 液相色谱-质谱/质谱仪 色谱普： C18柱：150mm×2.1mm， 2.0pm，或相当者 流动相：乙乙-0.1%甲酸 七、实验结果 1、添加回收结果 向样品中加入不同水平的磺胺类药物，回收率结果如下：(见表1) 表1动物组织中磺胺类药物添加回收结果 样品名称 化合物名称 添加水平(ng/mL) 回收率(%) 猪肉 磺胺噻唑 50 84.76 100 89.44 磺胺甲基嘧啶 50 81.30 100 91.08 磺胺醋酰 50 92.92 100 94.37 磺胺吡啶 50 81.74 100 88.09 磺胺甲基异恶唑 50 81.81 100 88.22 2、空白样品添加磺胺类药物色谱图 图1磺胺噻唑标准色谱图 图2磺胺甲基嘧啶标准色谱图 XIC of+MRM(32 pairs)： 256.000/15… Max.3.8e4 cps. 12.19 3.8e4 .c 0.0 5 10 15 20 25 图3磺胺醋酰标准色谱图 图4磺胺吡啶标准色谱图 XIC of+MRM(32 pairs)： 250.000/15… Max.4.2e4 cps. 11.52 4.0e4- 2.0e41 图5磺胺甲基异恶唑标准色谱图 本号： ALN-WW.biocomma.cn