初榨橄榄油中豆甾二烯含量检测方案

豆甾二烯用于特级初榨橄榄油掺假检测的研究 橄榄油是橄榄树果实的汁液，是唯一从新鲜果子中提取的使用油，也是世界上唯一以自然状态的形式供人类使用的木本植物油。其中具有最高营养品质的特级初榨橄榄油是市场上销售的主要橄榄油品种。但随着橄榄油日益受到人们的亲睐，掺假使假情景比比皆是。这些掺入的植物油脂不但便宜而且有些油脂用先进的检测手段也比较难发现。目前橄榄油的掺假鉴别以光谱法（如：荧光光谱，红外光谱，拉曼光谱等）和色谱法为主。一般而言，光谱法需要化学计量学的方法（如：主要成分分析、聚类分析等）对谱图进行分析后才能得出结果。而色谱法通过分析橄榄油中特性物质组成和含量，来判断特级初榨橄榄油是否掺入其他植物油。这些特征性物质包括脂肪酸、角鲨烯、游离生育酚、非蛋白质氨基酸等。鲜有报道以甾醇烯作为特征性指标应用于橄榄油掺假鉴别研究。甾醇烯类物质是油在脱色、水蒸气洗涤以及除臭等精炼过程中，油脂中的甾醇易发生脱水反应，产生烯键，形成的具有共轭双键的物质 。在植物油精炼过程中，以β-谷甾醇脱水产生的3,5-豆甾二烯含量最为丰富。 实验方法    1.标准溶液的配置 用正己烷配制3,5-豆甾二烯标准溶液，再用其稀释至所需浓度，保存在-18°C条件下。    2.样品处理 称取植物油样品1.0g于烧杯中，加入5ml石油醚，混匀，到入硅胶中，用5ml石油醚润洗烧杯2次，一并倒入柱中。当石油醚液面与上端无水硫酸钠层相切时，加入30ml石油醚，手机全部洗脱液至50ml收集管中，于45°C水浴中以氮气吹至干，用正己烷定容至1.0ml，待测。若样液浓度超出线性范围，则稀释一定倍数，使之在线性范围内。    3.液相色谱条件 C30色谱柱（250*4.6*5），柱温25°C，乙腈/叔丁基甲醚（75:25,V/V)做流动相等度洗脱，流速1.0ml/min,紫外检测波长235NM，进样量20UL.结果 利用高效液相色谱 (​http:​/​​/​www.kj17.com​/​html​/​kjcp​/​kejie_1178.html​)技术对植物油中3,5-豆甾二烯含量分析方法的准确性和精确度进行了研究，实验证明该方法回收率高，重复性好。3,5-豆甾二烯是特级初榨橄榄油掺假鉴别的重要指标，该指标准确、灵敏、可靠，能够鉴别出特级初榨橄榄油中掺入了0.3%油橄榄果渣油、2.1%葵花籽油、0.5%大豆油、0.3%玉米油、1.5%花生油、0.2%米糠油、0.6%核桃油。