油脂中脂肪酸检测方案

油脂中脂肪酸检测解决方案 1、 检测原理 由于油脂中的脂肪酸物质极性强，在色谱柱中分离峰型拖尾严重，且分离效果不佳，不能达到分析要求，所以必须对脂肪酸进行前处理，将性极强的脂肪酸物质转变成极性稍弱的脂肪酸酯物质进行间接检测分析。 油脂在氢氧化钠甲醇溶液中进行皂化反应，反应生成的脂肪酸盐与三氟化硼甲醇溶液再进行反应，生成脂肪酸甲酯，再进行气相色谱分析。 2、 前处理溶液试剂配制 （1）氢氧化钠甲醇溶液：浓度约为0.5 mol/L 配制方法：取2.0 g氢氧化钠于100mL小烧杯中，加入70mL甲醇试剂，溶解，将溶液转入100mL容量瓶中，洗涤小烧杯2次，将洗涤液转入容量瓶中，定容，盖塞，备用。 （2）饱和氯化钠溶液：250mL烧杯中加入200mL蒸馏水，再加入足量的氯化钠颗粒，直至氯化钠不能溶解，静止，上层溶液备用。 （3）三氟化硼甲醇溶液（外购，浓度为14%） （4）异辛烷，色谱纯。 3、 前处理操作 （1）皂化反应过程 取约0.4 g油脂样品于100mL烧瓶中，加入6.0mL 氢氧化钠甲醇溶液和一颗沸石，接上回流装置，放入65℃的恒温水浴锅中水浴回流，每隔5分钟缓慢摇晃烧瓶（以防止氢氧化钠形成固态附着在瓶壁），至烧瓶中油滴消失。 （2）三氟化硼甲醇酯化反应过程 待烧瓶中油滴消失后，从冷凝管顶部加入7.0mL三氟化硼甲醇溶液，继续煮沸回流5分钟。 （3）萃取过程 酯化反应完成后，从冷凝管顶部加入3.0~4.0mL异辛烷试剂，取下冷凝管，拿出烧瓶，立即加入约20mL饱和氯化钠溶液，塞住烧瓶，振摇烧瓶约1分钟。继续加入饱和氯化钠溶液至烧瓶颈部，静置分层 （4）除水取样 吸取上层异辛烷溶液于干燥洁净的玻璃瓶中，加入适量的无水硫酸钠颗粒（去除异辛烷溶液中少量的水），静置1-2分钟。取适量样品于进样小瓶，上机分析。 4、 标准溶液配制 （1）脂肪酸甲酯 单标溶液配制 取每种脂肪酸甲酯标准品的纯物质0.2g，分别放入单独的10mL容量瓶中，加入5mL异辛烷溶解样品，用异辛烷定容至10mL，配成浓度为20mg/mL脂肪酸甲酯单标溶液。 （2）脂肪酸甲酯 17种混标溶液配制 分别取17种浓度为20mg/mL的单标溶液100 ul于同一个10mL容量瓶中，加入异辛烷定容至10mL，摇匀备用，浓度为200 ug/mL。 17种脂肪酸甲酯详见下表 序号 检测项目俗称 标准样品名称 1 豆蔻酸 十四烷酸甲酯/肉豆蔻酸甲酯 2 棕榈酸 十六烷酸甲酯/棕榈酸甲酯 3 棕榈一烯酸 十六碳烯酸甲酯/棕榈一烯酸甲酯 4 十七烷酸 十七烷酸甲酯/ 5 十七碳一烯酸 十七碳烯酸甲酯 6 硬脂酸 十八烷酸甲酯/硬脂酸甲酯 7 油酸 十八碳烯酸甲酯/油酸甲酯 8 亚油酸 十八碳二烯酸甲酯/亚油酸甲酯 9 花生酸 二十烷酸甲酯/花生酸甲酯 10 花生一烯酸 二十碳烯酸甲酯/花生一烯酸甲酯 11 亚麻酸 十八碳三烯酸甲酯/亚麻酸甲酯 12 花生二烯酸 二十碳二烯酸甲酯/花生二烯酸甲酯 13 山嵛酸 二十二烷酸甲酯/山俞酸甲酯 14 芥酸 二十二碳烯酸甲酯/芥酸甲酯 15 二十二碳二烯酸 二十二碳二烯酸甲酯 16 木焦油酸 二十四烷酸甲酯/木焦油甲酸 17 二十四碳一烯酸 二十四碳烯酸甲酯 5、 气相色谱分析方法 GC-2000分析条件 进样口温度 250℃ 色谱柱类型 DM-2560 （100m ×0.25mm ×0.2 um） 程序升温 150℃，10℃/min升至180℃（10min），4℃/min升至220℃（11min） 氢火焰离子化检测器温度 250℃ 隔膜吹扫 3.0 mL/min 柱流速 2.0 mL/min 尾吹流量 25 mL/min 氢气流量 25 mL/min 空气流量 250 mL/min 分流进样 分流比10:1 6、 菜油样品分析 按照上述分析方法，分别对17种脂肪酸甲酯单标溶液和17种混标物质进行进样分析，保留时间定性。 将菜油样品按前处理方法进行处理，处理后样品溶液用GC-2000气相色谱仪进行分析，保留时间定性，面积归一法定量。 菜籽油中脂肪酸甲酯样品图 从上图可以看出，采用GC-2000气相色谱仪能在35分钟内完成17中脂肪酸甲酯的检测，17种物质互不干扰有很好的分离度，满足植物油脂中脂肪酸的检测需求。 检测结果如下表： 序号 检测项目俗称 标准样品名称 保留时间/min 峰面积 菜油检测含量/% 1 豆蔻酸 十四烷酸甲酯/肉豆蔻酸甲酯 11.7 26.57 0.061 2 棕榈酸 十六烷酸甲酯/棕榈酸甲酯 14.6 2014.42 4.629 3 棕榈一烯酸 十六碳烯酸甲酯/棕榈一烯酸甲酯 16.02 63.75 0.146 4 十七烷酸 十七烷酸甲酯/ 16.35 8.29 0.019 5 十七碳一烯酸 十七碳烯酸甲酯 17.82 0 0.000 6 硬脂酸 十八烷酸甲酯/硬脂酸甲酯 18.2 737.84 1.695 7 油酸 十八碳烯酸甲酯/油酸甲酯 19.52 22882.08 52.578 8 亚油酸 十八碳二烯酸甲酯/亚油酸甲酯 21.41 8532.86 19.607 9 花生酸 二十烷酸甲酯/花生酸甲酯 21.96 244.27 0.561 10 花生一烯酸 二十碳烯酸甲酯/花生一烯酸甲酯 23.19 1788.52 4.110 11 亚麻酸 十八碳三烯酸甲酯/亚麻酸甲酯 23.70 3412.71 7.842 12 花生二烯酸 二十碳二烯酸甲酯/花生二烯酸甲酯 25.1 59.35 0.136 13 山嵛酸 二十二烷酸甲酯/山俞酸甲酯 25.73 146.08 0.336 14 芥酸 二十二碳烯酸甲酯/芥酸甲酯 27.11 3326.7 7.644 15 二十二碳二烯酸 二十二碳二烯酸甲酯 29.37 107.75 0.248 16 木焦油酸 二十四烷酸甲酯/木焦油甲酸 30.19 57.65 0.132 17 二十四碳一烯酸 二十四碳烯酸甲酯 31.9 111.53 0.256