乳粉中黄曲霉毒素检测方案

专注霉菌毒素检测技术与产品服务 PriboFast@Pribo Lab泰乐祺联系电话：010-63395349 63380700 13311089404 E-mail： ra[idbio@126.com HPLC 法检测黄曲霉毒素 M1 需要主要仪器与耗材 产品名称(进口) 说明 价格 优惠价格 黄曲霉素M1 固体标准品 100ug 1980 1700 黄曲霉素M1 液体标准品 0.5ug/ml， 溶于乙腈-1ml 1500 1400 PriboFast 黄曲霉素M1免疫亲和柱3ml 用于样品前处理柱分析黄曲霉素 4000 3400 PriboFast 泵流操作架(8位) 用于免疫亲和柱样品处理 2500 2000 PriboFast 黄曲霉毒素检测专用玻璃纤维滤纸 110，1.5um(100P) 700 560 泰乐祺科技一高效液相色谱法检测黄曲霉毒素M1操作规程 作为国内专业从事霉菌毒素检测技术与产品服务的主要供应商之一， 近年来泰乐祺检测应用实验室重点关注食品安全事件尤其是涉及霉菌毒素安全等检测技术问题，以期望快速提出解决方案。针对近期奶中出现的黄曲霉毒素M1超标问题，泰乐祺科技提出以下液相色谱法精准检测方案。 1.仪器 1.1高效液相色谱仪配荧光检测器1.2震荡器(或高速搅拌器)1.3高速离心机1.4泵流操作架(带气泵) 1.5 PriboFast 黄曲霉毒素M1免疫亲和柱-3ml 2.试剂与试液 2.1色谱甲醇 2.2蒸馏水 2.3乙腈+水(25+75) 2.4石油醚 2.510%乙腈 2.6氢氧化钠溶液(0.5mol/L) 2.7玻璃纤维滤纸 (PriboFast 免疫亲和柱免费赠送) 3.测定法 本法系用高效液相色谱法(GB/T18980-2003)测定牛奶，奶粉等产品中的黄曲霉毒素M1，除另有规定外，按下列方法测定。 3.1色谱条件 色谱柱： C18柱，150×4.6mm， 5um 检测器：荧光检测器；激发波长365nm， 发射波长435nm； 流动相：乙腈-水(25：：775) 流 速：1.0ml/min 进样量：20ul 柱 温：室温 3.2 材标准品溶液的配制 取黄曲霉毒素M1标准品，用乙腈稀释成 0.5ug/ml 的标准储备液。根据使用需要，准确吸取10p1、20 u 1、50u1、100u1、200ul的黄曲霉毒素标准储备液，置5ml的容量瓶中，用流动相稀释至刻度，配成相当于 1ng/ml、2g/ml、5ng/ml、10g/ml、20ng/ml 的标准工作液，即得。 3.3 样品前处理 3.3.1牛奶： 将 100mL 牛奶水浴加热至40℃； 4000r/min 离心15min， 收集50mL 清澈液待用； 3.3.2乳粉和粉状婴幼儿配方食品 称取 10g奶粉样品，将100mL50℃水多次少量加入，搅拌，使奶粉充分溶解； 6000r/min 离心 15min， 收集50mL 清澈液待用； 3.3.3发酵乳(包括固体状、半固体状和带果肉型) 称取60 g混匀的试样，用0.5 mol/L 的氢氧化钠溶液在酸度计指示下调 pH至7.4； 用高速均质器在9500转/分钟，高速匀浆5 min 水浴加热至40℃； 4000r/min 离心15min， 收集50mL清澈液待用 3.3.4干酪 称取经切细、过10目圆孔筛混匀的试样5g置于50 mL离心管中，加2mL水和30 mL甲醇； 用高速均质器在9500r/分钟，高速匀浆5 min； 超声提取30 min； 在6000r/分钟下离心15 min， 收集上清液并移入250 mL 分液漏斗中。 在分液漏斗中加入30mL石油醚，振摇2min； 待分层后，将下层移于50 mL烧杯中，弃去石油醚层。 重复用石油醚提取2次；。 将下层溶液移到100 mL圆底烧瓶中，减压浓缩至约2mL； 浓缩液倒入离心管中，烧瓶用乙腈-水溶液(1+4) 5mL分2次洗涤，洗涤液一并倒入50 mL离心管中；加水稀释至约 50 mL，在6000转/分钟下离心5 min，上清液供净化处理。 3.3.5奶油 称取5g试样，置于50 mL烧杯中； 用20 mL 石油醚将其溶解并移于 250mL 具塞锥形瓶中。 加20 mL 水和30mL甲醇，振荡30 min 后， 将全部液体移于分液漏斗中； 待分层后，将下层溶液全部移到100 mL圆底烧瓶中，在旋转蒸发仪中减压浓缩至约5mL， 加水稀释至约50mL， 供净化处理。 3.4 供试品溶液的制备 3. 4. 1 PriboFast黄曲霉毒素M1 免疫亲和柱的操作 将免疫亲和柱连接于 50.0mL 玻璃注射器下。准确移取 50.0mL 净化溶液注入玻璃注射器； 将空气压力泵与注射器连接，调节压力使溶液以约 2-3mL/min 流速缓慢通过免疫亲和柱，直至2~3mL空气通过柱体； 更换 10ml 注射器与亲和柱连接，在注射器中加入10ml水，调节压力使水以约 6mL/min 流速清洗亲和柱。 准确加入4mL色谱级乙腈洗脱，流速为 1 mL/min~2mL/min， 收集全部洗脱液于玻璃试管中，供检测用。(建议将乙腈的量分2-4次加入。每次加入后，要让甲醇充分浸泡柱子里的凝胶2分钟。洗脱后的乙腈溶液，最好是水浴30℃加热吹近干。用10%乙腈定容后上液相) 3.5测定 精密量取 1ng/ml、2g/ml、5ng/ml、10g/ml、20ng/ml 的标准工作液各20ul， 注入液相色谱仪，测定峰面积，以峰面积为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线。另精密量取供试品溶液20ul， 注入液相色谱仪，测定峰面积，从标准曲线上读出供试品中相当于黄曲霉毒素M1的量，计算，即得。 1.本实验应有相应的安全、防护措施，并不得污染环境。 2.残留有黄曲霉毒素M1的废液或废渣的玻璃器皿，应置于专用贮存容器(装有10%氯酸钠溶液)内，浸泡24小时以上，再用清水将玻璃器皿冲洗干净。 详情技术咨询请联系：北京泰乐祺科技有限公司 电话：010-6339534963380700524531715245317013311089404网 址： http：//www.rapid-bio.com/ E-mail： rapidbio@126.com PriboLab 是面向全球提供霉菌毒素检测技术解决方案的主要服务商，凭借强大的研发团队和霉菌毒素检测技术的研究，为全球农业生产、食品加工与粮食、饲料工业等行业提供专业的真菌毒素检测技术产品与技术服务。我公司作为 PriboLab 在中国的唯一合作伙伴，积极为国内客户提供优质的霉菌毒素检测技术与产品服务。 我公司应对牛奶黄曲霉毒素 M1 超标进行如下促销：