在霉菌培养箱中培育乳制品菌落并测定其总数,通常需要遵循以下详细步骤,这些步骤基于GB 4789.15-2016标准: 准备阶段: 设备和材料准备: 霉菌培养箱:确保培养箱温度和湿度适宜。 无菌锥形瓶、吸管、平皿等。 稀释液:如生理盐水或特定的稀释液。 选择性培养基:如马铃薯葡萄糖琼脂(PDA)等。 培养基制备: 根据标准制备培养基,并进行高压灭菌。 培养基冷却至约50℃,倒入平皿,凝固备用。 实验步骤: 样品处理: 取适量乳制品样品,按照标准进行稀释,通常进行系列稀释,以便于计数。 接种: 将稀释后的样品涂布或倾注到培养基上。 每个稀释度至少接种两个平皿。 培养: 将接种好的平皿放入霉菌培养箱中。 在适宜的温度(通常为25-28℃)和湿度(通常为80-90%)下培养。 计数: 培养5-7天后,观察菌落生长情况。 选择菌落数在30-300 CFU之间的平板进行计数。 计算每个稀释度的平均菌落数。 结果计算: 根据稀释倍数和平均菌落数计算样品中的菌落总数。 公式:菌落总数(CFU/g或CFU/mL)=(平均菌落数×稀释倍数)/(接种量)。 注意事项: 确保实验过程中所有操作均符合无菌技术要求。 培养条件(如温度、湿度、时间)需严格遵守标准规定。 菌落计数时,应选择适当的稀释度,确保在30-300 CFU的范围内。 这些步骤为一般指导,具体操作可能根据不同的实验设计和标准有所调整。